1.基本檢查：是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法，不僅是男科實(shí)驗(yàn)室，任何開(kāi)展精液檢查的實(shí)驗(yàn)室都能遵循。精子計(jì)數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方法，但計(jì)數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法，伊紅染色和低滲腫脹實(shí)驗(yàn)只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對(duì)于精子活動(dòng)率大于40%的樣本沒(méi)有必要做存活率評(píng)估。與第5版手冊(cè)中淡粉色判讀為活精子不同，明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明，鑒別快速前向運(yùn)動(dòng)精子非常重要。因此，關(guān)于精子活力分級(jí)，第6版手冊(cè)建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動(dòng)、慢速前向運(yùn)動(dòng)、非前向運(yùn)動(dòng)和不活動(dòng)4個(gè)活力級(jí)別，但精子活動(dòng)率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(dòng)(PR)、非前向運(yùn)動(dòng)(NP)、不活動(dòng)(IM)3個(gè)活力級(jí)別計(jì)算。第6版手冊(cè)強(qiáng)調(diào)，精子形態(tài)學(xué)評(píng)估的價(jià)值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后，還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對(duì)于3%和5%的精子“正常”形態(tài)率的判斷，則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評(píng)估1500個(gè)精子來(lái)完成；對(duì)于無(wú)尾精子(只有頭部的精子)超過(guò)總精子數(shù)20%的精液，應(yīng)單獨(dú)計(jì)算并在報(bào)告中注明；傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法，準(zhǔn)確率有待提高。南京綿羊精子分析頻閃光源

擴(kuò)展性檢查：可以在某些情況下由實(shí)驗(yàn)室選擇或根據(jù)臨床醫(yī)生的特殊要求而使用的項(xiàng)目。手冊(cè)增加了精子DNA損傷、遺傳學(xué)和炎癥細(xì)胞等相關(guān)檢查項(xiàng)目。提出了基因突變是導(dǎo)致不育和精液常規(guī)檢查異常的原因。新增了精液相關(guān)細(xì)胞因子、趨化因子等檢測(cè)的方法、試劑、檢測(cè)步驟等內(nèi)容。在精液參數(shù)異常的男性中普遍存在精子DNA損傷，并且已有報(bào)道指出其與精液參數(shù)正常男性的不育有關(guān)。由于與精液質(zhì)量相關(guān)，精子DNA損傷檢測(cè)是男性不育檢查中的重要補(bǔ)充內(nèi)容，已成為男科學(xué)基礎(chǔ)和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標(biāo)志物之一。本版手冊(cè)增加了大量篇幅對(duì)其原理和檢測(cè)方法進(jìn)行了描述。新增了基因和基因組測(cè)序內(nèi)容。臨床上，越來(lái)越多的人意識(shí)到染色體異常[數(shù)量異常、結(jié)構(gòu)異常(包括微缺失和微重復(fù))]和基因突變是導(dǎo)致各種男性不育癥的基礎(chǔ)病因，而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測(cè)序常規(guī)在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，但一些男科實(shí)驗(yàn)室也在做同樣的檢測(cè)。為明確生殖道炎癥對(duì)于男性不育的影響，泌尿男科醫(yī)生可能提出對(duì)精液中的趨化因子和細(xì)胞因子進(jìn)行評(píng)估。本手冊(cè)納入了精液中白細(xì)胞介素檢測(cè)方法。南京山羊精子分析BCFHamilton Thorne精子分析儀采用先進(jìn)的光學(xué)成像，能夠?qū)崟r(shí)分析精子的動(dòng)力學(xué)參數(shù)，提供有效的精子質(zhì)量評(píng)估。

二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn)：5、精漿肉堿測(cè)定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L?！九R床意義】精漿肉堿測(cè)定精漿中的肉堿主要由附睪分泌，其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種，附睪中含高濃度的肉堿，主要與精子在附睪成熟時(shí)所需的能量來(lái)源有關(guān)?，F(xiàn)認(rèn)為精漿肉堿含量和果糖含量的變化，常反映附睪、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常，表明附睪、精囊功能正常。當(dāng)肉堿含量高于正常的50%，而果糖含量降低，則提示精囊功能障礙，附睪功能正常；精漿肉堿約為正常含量的50%左右，果糖含量正常，說(shuō)明附睪功能障礙，精囊功能正常；而肉堿急劇下降，果糖含量亦減少，表示精囊、附睪功能均發(fā)生障礙。6、抗精子抗體(AsAb)測(cè)定【正常參考值】陰性。【臨床意義】AsAb檢測(cè)對(duì)不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb，可抑制精子的活動(dòng)，干擾精子的運(yùn)行，阻礙精子穿透及精卵結(jié)合，使受精發(fā)生障礙。即使已經(jīng)受精，也可能影響發(fā)育中的胚胎，造成免疫性流產(chǎn)。不育夫婦AsAb陽(yáng)性者占25%-30%，當(dāng)精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎癥、附睪等生殖系***時(shí)，系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體。

CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗(yàn)應(yīng)用中的功能要求和參數(shù)設(shè)置CASA是將現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)技術(shù)和先進(jìn)的圖象處理技術(shù)應(yīng)用于精子質(zhì)量的臨床檢驗(yàn)，通過(guò)對(duì)精子動(dòng)（靜）態(tài)圖象中精子特性的***分析，為臨床提供有關(guān)精子質(zhì)量各項(xiàng)指標(biāo)的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。CASA系統(tǒng)一般包括硬件和計(jì)算機(jī)軟件支持系統(tǒng)幾個(gè)部分：（1）相差顯微鏡、恒溫裝置和**技術(shù)板（Makler板、Macro板或MicroCell計(jì)數(shù)池等）；（2）高速、高分辨率的攝像機(jī)和電視監(jiān)視器組成的攝像系統(tǒng)；（3）計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)及打印機(jī)打印輸出。Hamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能，能夠在短時(shí)間內(nèi)處理大量樣本，提高工作效率。

精子分析儀使用注意事項(xiàng)1.樣品制備是CASA取得高質(zhì)量檢查結(jié)果的關(guān)鍵。CASA采用深度為10um樣品池，能保證精子在單層界面內(nèi)自由運(yùn)動(dòng)。取樣分析前標(biāo)本必須充分混勻，用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中，用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。2.不潔凈的計(jì)數(shù)池可影響精子的活力，尤其影響灰度CASA精子計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。3.精子樣品密度過(guò)大時(shí)，造成圖像處理上的粘連，無(wú)法分析每個(gè)精子的運(yùn)動(dòng)特性。**中所含精子太少時(shí)，需增加檢查視野數(shù)量或者使用低倍物鏡觀察，以提高樣品檢出率。所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓(xùn)，嚴(yán)格按照使用指南進(jìn)行操作?。北京馬精子分析VSL

通過(guò)計(jì)算機(jī)圖像處理功能對(duì)顯微鏡下放大的精子圖像進(jìn)行識(shí)別和跟蹤計(jì)算，從而得出精子動(dòng)靜態(tài)各項(xiàng)參數(shù)。南京綿羊精子分析頻閃光源

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評(píng)估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專(zhuān)業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測(cè)技術(shù)。有研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激可能是影響人類(lèi)精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(cè)(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊(cè)重寫(xiě)了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分，強(qiáng)調(diào)了CASA對(duì)于檢測(cè)精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測(cè)精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對(duì)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊(cè)新增了檢測(cè)精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。南京綿羊精子分析頻閃光源