HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ與IVOSⅡ一致性比對分析根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對新精子分析系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證后,應(yīng)與舊系統(tǒng)進(jìn)行一致性評價(jià),從而保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法:選用原有HamiltonThorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ?yàn)閷?shí)驗(yàn)儀器,對精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)進(jìn)行分析比對。結(jié)果:兩臺儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗(yàn)、偏倚圖和散點(diǎn)圖的線性關(guān)系和離群值檢測所有參數(shù)均能符合比對要求,檢測結(jié)果具有相關(guān)性;對實(shí)驗(yàn)儀器的檢測結(jié)果適合范圍的檢驗(yàn),當(dāng)其精子濃度r=0.988,前向運(yùn)動(dòng)精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對預(yù)期偏倚(Bc)的接受性評價(jià)表明當(dāng)精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當(dāng)前向運(yùn)動(dòng)精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項(xiàng)檢測的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實(shí)驗(yàn)儀器經(jīng)比對分析顯示符合質(zhì)控要求。結(jié)論:通過比對分析,得出兩臺精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測結(jié)果一致,可同時(shí)用于臨床標(biāo)本的檢測。精子分析儀與人工方法相比具有客觀,高效,高精度的優(yōu)點(diǎn)。南京快速運(yùn)動(dòng)精子分析頻閃光源
精子分析儀工作原理以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標(biāo)本液化后吸入計(jì)數(shù),通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動(dòng)、靜態(tài)圖像后輸入計(jì)算機(jī)。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動(dòng)移位及運(yùn)動(dòng)參數(shù),對采集圖像進(jìn)行精子密度、活動(dòng)力、活動(dòng)率、運(yùn)動(dòng)特征等幾十項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目動(dòng)態(tài)分析,由計(jì)算機(jī)處理后,打印出“**分析檢查報(bào)告以及精子動(dòng)態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個(gè)精子進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測[1]。優(yōu)點(diǎn):操作簡便,用量少,檢測速度快,重復(fù)性優(yōu)于人工檢測,并且能夠快速、準(zhǔn)確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的多種參數(shù)等。缺點(diǎn):影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,不同的精子計(jì)數(shù)池的相對準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。美國山羊精子分析VCL計(jì)算機(jī)輔助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科學(xué)名詞。
擴(kuò)展性檢查:可以在某些情況下由實(shí)驗(yàn)室選擇或根據(jù)臨床醫(yī)生的特殊要求而使用的項(xiàng)目。手冊增加了精子DNA損傷、遺傳學(xué)和炎癥細(xì)胞等相關(guān)檢查項(xiàng)目。提出了基因突變是導(dǎo)致不育和精液常規(guī)檢查異常的原因。新增了精液相關(guān)細(xì)胞因子、趨化因子等檢測的方法、試劑、檢測步驟等內(nèi)容。在精液參數(shù)異常的男性中普遍存在精子DNA損傷,并且已有報(bào)道指出其與精液參數(shù)正常男性的不育有關(guān)。由于與精液質(zhì)量相關(guān),精子DNA損傷檢測是男性不育檢查中的重要補(bǔ)充內(nèi)容,已成為男科學(xué)基礎(chǔ)和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標(biāo)志物之一。本版手冊增加了大量篇幅對其原理和檢測方法進(jìn)行了描述。新增了基因和基因組測序內(nèi)容。臨床上,越來越多的人意識到染色體異常[數(shù)量異常、結(jié)構(gòu)異常(包括微缺失和微重復(fù))]和基因突變是導(dǎo)致各種男性不育癥的基礎(chǔ)病因,而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測序常規(guī)在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,但一些男科實(shí)驗(yàn)室也在做同樣的檢測。為明確生殖道炎癥對于男性不育的影響,泌尿男科醫(yī)生可能提出對精液中的趨化因子和細(xì)胞因子進(jìn)行評估。本手冊納入了精液中白細(xì)胞介素檢測方法。
醫(yī)生為了鑒定男性生育能力,常囑男方作精液檢查,正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長者,可呈淡黃色,若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色,則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升,常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液絲長度一般不超過2厘米,否則視為異常。精液呈弱堿性,PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過2000萬/毫升。排精后1小時(shí)內(nèi)活動(dòng)精>=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動(dòng)力分為四級:0級:不活動(dòng);1級:精子原地?cái)[動(dòng);2級:有中等的前向運(yùn)動(dòng);3級:前向運(yùn)動(dòng)活躍,快速直線運(yùn)動(dòng)。正常的精子活動(dòng)力為2~3級的精子>=40%~50%.精子形態(tài):畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論,應(yīng)對精子數(shù)量活力活動(dòng)率液化時(shí)間畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析。采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。該設(shè)備還具備良好的售后服務(wù),Hamilton Thorne公司提供培訓(xùn)和技術(shù)支持,確保用戶能夠充分利用設(shè)備的功能。
前沿性檢查:目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術(shù)。有研究認(rèn)為,氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素;新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊重寫了計(jì)算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分,強(qiáng)調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質(zhì)控要求,增加了CASA檢測精子超活化運(yùn)動(dòng)的內(nèi)容。對精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此,手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。精子分析儀能分析與精子運(yùn)動(dòng)功能相關(guān)的各種參數(shù)。廣州濃度精子分析VCL
傳統(tǒng)的CASA系統(tǒng)仍使用傳統(tǒng)閾值圖像處理方法,準(zhǔn)確率有待提高。南京快速運(yùn)動(dòng)精子分析頻閃光源
CASA精子運(yùn)動(dòng)速度和運(yùn)動(dòng)軌跡特征主要參數(shù)有:①軌跡速度(VCL):也稱曲線速度,即精子頭部沿其實(shí)際行走曲線的運(yùn)動(dòng)速度。②平均路徑速度(VAP):精子頭沿其空間平均軌跡的運(yùn)動(dòng)速度,這種平均軌跡是計(jì)算機(jī)將精子運(yùn)動(dòng)的實(shí)際軌跡平均后計(jì)算出來的,可因不同型號的儀器而有所改變。③直線運(yùn)動(dòng)速度(VSL):也稱前向運(yùn)動(dòng)速度,即精子頭部直線移動(dòng)距離的速度。④直線性(LIN):也稱線性度,為精子運(yùn)動(dòng)曲線的直線分離度,即VSL/VCL。⑤精子側(cè)擺幅度(ALH):精子頭實(shí)際運(yùn)動(dòng)軌跡對平均路徑的側(cè)擺幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型號的CASA系統(tǒng)由于計(jì)算方法不一致,因此相互之間不可直接比較。⑥前向性(STR):也稱直線性,計(jì)算公式為VSL/VAP,亦即精子運(yùn)動(dòng)平均路徑的直線分離度。⑦擺動(dòng)性(WOB):精子頭沿其實(shí)際運(yùn)動(dòng)軌跡的空間平均路徑擺動(dòng)的尺度,計(jì)算公式為VAP/VCL。⑧鞭打頻率(BCF):也稱擺動(dòng)頻率,即精子頭部跨越其平均路徑的頻率。⑨平均移動(dòng)角度(MAD):精子頭部沿其運(yùn)動(dòng)軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時(shí)間平均值。⑩運(yùn)動(dòng)精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子數(shù)。南京快速運(yùn)動(dòng)精子分析頻閃光源
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可...
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