CASA可將每個精子的活力按以下分級:(1)前向運動型(PR):精子運動活躍、線性運動或者在較大的范圍內(nèi)運動。(2)非前向運動型(NP):所有其他非前向運動的形式,如精子在較小的范圍內(nèi)運動,精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動。(3)完全不動型(IM):精子完全不動。CASA系統(tǒng)檢測的這些參數(shù)有一套標準的術語。(1)VCL=曲線速度(mm/s)。精子頭沿其實際的曲線,即在顯微鏡下見到的二維方式運動軌跡的平均速度。檢測細胞活力。(2)VSL=直線速度(mm/s)。根據(jù)精子頭在開始檢測時的位置與***所處位置之間的直線運動的時間平均速度。(3)VAP=平均路徑速度(mm/s)。精子頭沿其空間平均軌跡移動的時間平均速度。(4)ALH=精子頭側擺幅度(mm)。精子頭沿其空間平均軌跡側擺的幅度。以側擺的最大值或平均數(shù)值表示。(5)LIN=直線性。曲線軌跡的直線性。即VSL/VCL。(6)WOB=擺動性。精子頭沿其實際軌跡的空間平均路徑擺動的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性??臻g平均路徑的直線性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打頻率(Hz)。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時間平均速率。(9)MAD=平均移動角度(度)。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉折角度的時間平均***值。計算機輔助精子分析根據(jù)初估的精子濃度選擇合適的檢測方法,確保檢測過程的準確性和可靠性?。精子分析精確溫度控制
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽#€可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標準差和中位數(shù),以及對染色的精子頂體區(qū)進行測量[3]。與人工操作相比,自動化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復性的潛力[4]。精確度和重復性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗的技術人員的手工評估。兩個研究已經(jīng)提示在CASA結果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動分析的正常精子形態(tài)的結果是預示體外受精率和妊娠率的有意義指標[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關系。Z%和VSL與生育力間的關系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會進一步增加[7]。美國前向運動精子分析在男科和輔助生殖技術領域,精子質量的評估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié)。
ivos自動精子分析系統(tǒng)hamiltonthorne的casa系統(tǒng)適用于臨床、研究實驗室、動物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領域,成為了精液分析業(yè)的金標準??梢詰糜诎ㄈ祟悺⒐?、馬、、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動物。全自動的ivos可以提供快的分析速度以及高質量數(shù)據(jù)輸出??梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜偷妮d玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級。ivos能提供:、客觀、具有重復性的結果高速分析,在60hz下半秒掃描30幀為實驗室節(jié)省成本。高等級數(shù)據(jù)安全。(順應美國fda的操作軟件)數(shù)據(jù)結果包括:計數(shù)、濃度。運動以及前進運動三種速度參數(shù)vap,vsl和vcl,外加運動參數(shù)lin,alh,str和bcf。內(nèi)置質控保證分析精度可以回放精子活動,標記不同狀態(tài)精子。迅速根據(jù)新的設定對上次分析結果進行重新計算,此過程不會損失畫面。形態(tài)可選附件:三維嚴謹形態(tài)(人類):的經(jīng)過認證的嚴謹?shù)男螒B(tài)分析。用戶自定義形態(tài)。即時形態(tài)分析熒光可選附件:自定義熒光(只有ivos)可以用濾光片的casa系統(tǒng)。高精度的計數(shù)。同時在氙氣燈析運動和靜止,使用各種熒光染色,自動探測計數(shù)染色細胞,自動歸類,可選彩色攝像頭。
通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關性較低]。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進行比較,其結果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(授精IVF)的發(fā)展使檢測精子質量與各參數(shù)間的關系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。精子分析儀能分析與精子運動功能相關的各種參數(shù)。
CASA系統(tǒng)進行**分析應注意以下幾點:3.2**分析儀閾值的確定(1)精子灰度、對比度閾值:由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)?,對亮度和對比度要求特別高,檢測時應多次試用,尋找能準確識別精子的比較好灰度閾值[8]。(2)碎片:測定精子濃度準確性受**中細胞成份和非精子的顆粒物質的干擾,測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質的影響[9],這些也是需要注意的。對于系統(tǒng)誤認為精子的非精子成分,如精原細胞、白細胞和非白細胞顆粒等,可人為準確記數(shù)后在可刪除雜質一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結果應間隔復查反復檢查2?3次方能得出比較正確的結果。3.4對于無精子的患者應仔細進行視野檢查注意不要將雜質誤認為精子計數(shù)在內(nèi),應將**3000ɡ離心15分鐘后,再涂片檢查,確認無精后再出報告。在精子研發(fā)的歷程中,計算機輔助精子檢測經(jīng)歷了黑白圖像機、彩色圖像檢測。目前先進的是熒光精子圖像檢測。香港瀕危物種精子分析BCF
精子分析儀的出現(xiàn)簡化了檢驗流程,提高了診斷的可靠性,對于提升男性生殖健康領域的Z療效果具有重要作用。精子分析精確溫度控制
精子檢測是通過一系列檢測方法來評估男性生育能力的指標之一。而檢測方法的選擇直接影響到檢測的準確性和結果的可靠性。目前,常用的檢測方法有手動計數(shù)法、顯微鏡計數(shù)法、電子顯微鏡計數(shù)法、精子運動軌跡分析法等。手動計數(shù)法是通過顯微鏡手動計算精液中精子數(shù)量的方法,該方法簡單易行,但因操作者技能不同,容易出現(xiàn)誤差。顯微鏡計數(shù)法是通過顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法,該方法比手動計數(shù)法更加準確,但需要專業(yè)的技能和經(jīng)驗。電子顯微鏡計數(shù)法是通過電子顯微鏡觀察精液中精子數(shù)量的方法,該方法非常準確,但需要昂貴的設備。精子運動軌跡分析法是通過計算機分析精子運動軌跡來判斷精子活力和數(shù)量的方法,該方法不僅準確性,而且可以直觀地顯示精子的運動狀態(tài),但需要較為復雜的技術。除了以上常見的檢測方法,還有一些新興的檢測方法,如流式細胞術、全自動分析系統(tǒng)等。這些檢測方法雖然在檢測精子數(shù)量、活力等方面具有一定優(yōu)勢,但由于技術上的限制和設備的昂貴,目前還沒有得到廣泛應用。在選擇檢測方法時,需要考慮檢測的目的、檢測的準確性和結果的可靠性等因素。同時,需要選擇正規(guī)的醫(yī)療機構進行檢測,避免因設備不足或技術不過關等因素導致檢測結果出現(xiàn)誤差。精子分析精確溫度控制
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