人類精子冷凍保存和儲(chǔ)存：增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容，更具可操作性。本手冊(cè)對(duì)人類精子的冷凍保存提出了具體建議：將樣本分管分罐分開儲(chǔ)存；對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序；所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng)，以監(jiān)測(cè)溫度和液氮液位，傳感器應(yīng)連接警報(bào)器，可通過(guò)實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒。新證據(jù)表明，玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無(wú)污染液氮直接接觸并快速冷凍，可以防止冰晶的形成，并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無(wú)菌玻璃化冷凍)中，也可以使用封閉系統(tǒng)，不需要無(wú)菌的液氮。電腦全自動(dòng)精子采集分析儀是一款高科技醫(yī)療設(shè)備，它巧妙地融合了現(xiàn)代計(jì)算機(jī)技術(shù)和自動(dòng)控制技術(shù)。香港前向運(yùn)動(dòng)精子分析VCL

CASA可將每個(gè)精子的活力按以下分級(jí)：（1）前向運(yùn)動(dòng)型（PR）：精子運(yùn)動(dòng)活躍、線性運(yùn)動(dòng)或者在較大的范圍內(nèi)運(yùn)動(dòng)。（2）非前向運(yùn)動(dòng)型（NP）：所有其他非前向運(yùn)動(dòng)的形式，如精子在較小的范圍內(nèi)運(yùn)動(dòng)，精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動(dòng)。（3）完全不動(dòng)型（IM）：精子完全不動(dòng)。CASA系統(tǒng)檢測(cè)的這些參數(shù)有一套標(biāo)準(zhǔn)的術(shù)語(yǔ)。（1）VCL=曲線速度（mm/s）。精子頭沿其實(shí)際的曲線，即在顯微鏡下見到的二維方式運(yùn)動(dòng)軌跡的平均速度。檢測(cè)細(xì)胞活力。（2）VSL=直線速度（mm/s）。根據(jù)精子頭在開始檢測(cè)時(shí)的位置與***所處位置之間的直線運(yùn)動(dòng)的時(shí)間平均速度。（3）VAP=平均路徑速度（mm/s）。精子頭沿其空間平均軌跡移動(dòng)的時(shí)間平均速度。（4）ALH=精子頭側(cè)擺幅度（mm）。精子頭沿其空間平均軌跡側(cè)擺的幅度。以側(cè)擺的最大值或平均數(shù)值表示。（5）LIN=直線性。曲線軌跡的直線性。即VSL/VCL。（6）WOB=擺動(dòng)性。精子頭沿其實(shí)際軌跡的空間平均路徑擺動(dòng)的尺度。即VAP/VCL。（7）STR=前向性?？臻g平均路徑的直線性。即VSL/VAP。（8）BCF=鞭打頻率（Hz）。精子曲線軌跡越過(guò)其平均路徑軌跡的時(shí)間平均速率。（9）MAD=平均移動(dòng)角度（度）。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時(shí)間平均***值。上海馬精子分析VCL精子分析，平均角位移（MAD）?：精子頭沿其曲線軌跡瞬時(shí)轉(zhuǎn)折角度的時(shí)均J對(duì)值?。

精子分析儀是計(jì)算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)結(jié)合的**分析儀器設(shè)備，通過(guò)顯微鏡下攝像和計(jì)算機(jī)快速分析多個(gè)視野內(nèi)精子的運(yùn)行軌跡，客觀記錄了精子的密度、活動(dòng)力、活動(dòng)率和存活率等各項(xiàng)參數(shù)。計(jì)算機(jī)輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、恒溫系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構(gòu)成。此外，儀器一般配有**樣品盒，以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統(tǒng)：由顯微鏡及CCD組成?？梢詫?biāo)本信號(hào)通過(guò)顯微放大由CCD傳輸?shù)接?jì)算機(jī)2.圖像采集系統(tǒng)：由圖像卡構(gòu)成，其功能是對(duì)CCD信號(hào)進(jìn)行抓拍、識(shí)別、預(yù)處理后，將成熟信號(hào)輸送到計(jì)算機(jī)。3.恒溫系統(tǒng)：由加溫和保溫設(shè)備組成。加溫是通過(guò)熱吹風(fēng)機(jī)不斷將適宜的溫度熱風(fēng)鼓入封閉保溫罩內(nèi)，提供穩(wěn)定、可靠的檢查環(huán)境。4.計(jì)算機(jī)系統(tǒng)：對(duì)圖像信號(hào)進(jìn)行***系統(tǒng)的加工處理，對(duì)獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行輸出和存儲(chǔ)的設(shè)備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質(zhì)量分析軟件，利用現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)識(shí)別技術(shù)和圖像處理技術(shù)，對(duì)精子的動(dòng)靜態(tài)特征進(jìn)行***的量化分析，對(duì)精子的密度、活力、活率、運(yùn)動(dòng)軌跡等特征進(jìn)行量的檢測(cè)分析

CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：3.2**分析儀閾值的確定（1）精子灰度、對(duì)比度閾值：由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來(lái)判斷精子的真?zhèn)?，?duì)亮度和對(duì)比度要求特別高，檢測(cè)時(shí)應(yīng)多次試用，尋找能準(zhǔn)確識(shí)別精子的比較好灰度閾值[8]。（2）碎片：測(cè)定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾，測(cè)定活動(dòng)精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9]，這些也是需要注意的。對(duì)于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分，如精原細(xì)胞、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等，可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對(duì)于無(wú)精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計(jì)數(shù)在內(nèi)，應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后，再涂片檢查，確認(rèn)無(wú)精后再出報(bào)告。該設(shè)備還支持多種分析模式，包括精子濃度、活力、形態(tài)和DNA損傷等參數(shù)的測(cè)量，滿足用戶的多樣化需求。

七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子：＜10%-15%；凝集精子：＜10%；未成熟精細(xì)胞：＜1%。[臨床意義]1．精索靜脈曲張病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟時(shí)已進(jìn)入精液，或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過(guò)高和睪丸組織缺氧，或血液帶有毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸，上述原因均有損于精子形態(tài)。2.精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能異常。3.睪丸曲細(xì)精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時(shí)，精液中可出現(xiàn)較多病理性未成熟精細(xì)胞。八、精液細(xì)胞檢查[正常參考值]白細(xì)胞(WBC)：＜5個(gè)/HP(高倍鏡視野)；紅細(xì)胞(RBC)：0-偶見/HP。[臨床意義]1．精液中白細(xì)胞增多，常見于精囊炎、前列腺炎及結(jié)核等。2．精液中紅細(xì)胞增多，常見于精囊結(jié)核、前列腺*等。3.精液中若查到*細(xì)胞，對(duì)生殖系*有診斷意義。Hamilton Thorne自動(dòng)精子分析儀具有高精度、高效率和自動(dòng)化的優(yōu)點(diǎn)。北京精子分析W.H.O 4

CASA系統(tǒng)通過(guò)計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)，能夠提供精確的量化數(shù)據(jù)，優(yōu)于人工檢測(cè)方法。香港前向運(yùn)動(dòng)精子分析VCL

精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法1.原理：將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?，混勻注入?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)，再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法（按照***版第四版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》）1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。3.計(jì)算1).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子少于10個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子在10~40個(gè),應(yīng)計(jì)10個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子多于40個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式：精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml香港前向運(yùn)動(dòng)精子分析VCL