人類精子冷凍保存和儲(chǔ)存：增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容，更具可操作性。本手冊(cè)對(duì)人類精子的冷凍保存提出了具體建議：將樣本分管分罐分開儲(chǔ)存；對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序；所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng)，以監(jiān)測(cè)溫度和液氮液位，傳感器應(yīng)連接警報(bào)器，可通過實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒。新證據(jù)表明，玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍，可以防止冰晶的形成，并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中，也可以使用封閉系統(tǒng)，不需要無菌的液氮。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，直線性（LIN）?：曲線軌跡的直線性。Hamilton Thorne精子分析STR

檢查具備條件受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后，禁房事5－7天（上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)）；[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè)，以**方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標(biāo)本離體時(shí)間；貼身保溫，30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室，并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間。精液常規(guī)觀察：精液總?cè)萘浚ê辽?，精子活?dòng)情況，精子密度（個(gè)/毫升），精液液化時(shí)間（標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間），不動(dòng)精子（個(gè)/高倍視野）等。見不動(dòng)精子，須染色方可區(qū)分：不活動(dòng)的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗(yàn)，仍然找不到精子；方可報(bào)告無精。經(jīng)三次取樣化驗(yàn)，結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無精子癥。北京山羊精子分析高準(zhǔn)確率精子分析儀參數(shù)，平均路徑速率（VAP）?：精子頭沿其平均路徑移動(dòng)時(shí)的時(shí)均速率。

通過結(jié)果的生物學(xué)意義對(duì)結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測(cè)試中表現(xiàn)出較小的可變性時(shí)則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評(píng)估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動(dòng)性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運(yùn)動(dòng)精子百分率上的相關(guān)性較低］。Holt等報(bào)道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對(duì)**參數(shù)值進(jìn)行比較，其結(jié)果為：采用同一個(gè)測(cè)定池由不同的操作者測(cè)定**參數(shù)；變異系數(shù)（CV）是29％?活動(dòng)精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯(cuò)誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來評(píng)估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運(yùn)動(dòng)性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動(dòng)性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)（授精I(xiàn)VF）的發(fā)展使檢測(cè)精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能；同樣可以驗(yàn)證CASA測(cè)定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。

1.基本檢查：是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法，不僅是男科實(shí)驗(yàn)室，任何開展精液檢查的實(shí)驗(yàn)室都能遵循。精子計(jì)數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方法，但計(jì)數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法，伊紅染色和低滲腫脹實(shí)驗(yàn)只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對(duì)于精子活動(dòng)率大于40%的樣本沒有必要做存活率評(píng)估。與第5版手冊(cè)中淡粉色判讀為活精子不同，明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明，鑒別快速前向運(yùn)動(dòng)精子非常重要。因此，關(guān)于精子活力分級(jí)，第6版手冊(cè)建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動(dòng)、慢速前向運(yùn)動(dòng)、非前向運(yùn)動(dòng)和不活動(dòng)4個(gè)活力級(jí)別，但精子活動(dòng)率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(dòng)(PR)、非前向運(yùn)動(dòng)(NP)、不活動(dòng)(IM)3個(gè)活力級(jí)別計(jì)算。第6版手冊(cè)強(qiáng)調(diào)，精子形態(tài)學(xué)評(píng)估的價(jià)值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后，還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對(duì)于3%和5%的精子“正?！毙螒B(tài)率的判斷，則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評(píng)估1500個(gè)精子來完成；對(duì)于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液，應(yīng)單獨(dú)計(jì)算并在報(bào)告中注明；CASA系統(tǒng)減少了人為因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，提高了檢測(cè)的客觀性和可重復(fù)性?。

精子分析儀是計(jì)算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)結(jié)合的**分析儀器設(shè)備，通過顯微鏡下攝像和計(jì)算機(jī)快速分析多個(gè)視野內(nèi)精子的運(yùn)行軌跡，客觀記錄了精子的密度、活動(dòng)力、活動(dòng)率和存活率等各項(xiàng)參數(shù)。計(jì)算機(jī)輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、恒溫系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構(gòu)成。此外，儀器一般配有**樣品盒，以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統(tǒng)：由顯微鏡及CCD組成?？梢詫?biāo)本信號(hào)通過顯微放大由CCD傳輸?shù)接?jì)算機(jī)2.圖像采集系統(tǒng)：由圖像卡構(gòu)成，其功能是對(duì)CCD信號(hào)進(jìn)行抓拍、識(shí)別、預(yù)處理后，將成熟信號(hào)輸送到計(jì)算機(jī)。3.恒溫系統(tǒng)：由加溫和保溫設(shè)備組成。加溫是通過熱吹風(fēng)機(jī)不斷將適宜的溫度熱風(fēng)鼓入封閉保溫罩內(nèi)，提供穩(wěn)定、可靠的檢查環(huán)境。4.計(jì)算機(jī)系統(tǒng)：對(duì)圖像信號(hào)進(jìn)行***系統(tǒng)的加工處理，對(duì)獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行輸出和存儲(chǔ)的設(shè)備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質(zhì)量分析軟件，利用現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)識(shí)別技術(shù)和圖像處理技術(shù)，對(duì)精子的動(dòng)靜態(tài)特征進(jìn)行***的量化分析，對(duì)精子的密度、活力、活率、運(yùn)動(dòng)軌跡等特征進(jìn)行量的檢測(cè)分析CASA系統(tǒng)操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)速度快，且重復(fù)性優(yōu)于人工檢測(cè)。Hamilton Thorne精子分析STR

?精子分析可以分析參數(shù)有，曲線速率（VCL）?：精子頭沿其實(shí)際曲線運(yùn)動(dòng)的時(shí)均速率。Hamilton Thorne精子分析STR

醫(yī)生處置質(zhì)量是指診斷質(zhì)量?是以當(dāng)今醫(yī)學(xué)科學(xué)知識(shí)、技術(shù)為基礎(chǔ)依據(jù)癥狀來完成的。CASA系統(tǒng)可以為醫(yī)生提供優(yōu)于傳統(tǒng)精子分析的手段和快速準(zhǔn)確的分析結(jié)果［5］。CASA在醫(yī)生處置質(zhì)量方面的特點(diǎn)在于：①當(dāng)CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定和樣品的處理方式（溫度、稀釋法、緩沖液）確定時(shí)?通過個(gè)體內(nèi)和個(gè)體間的比較?CASA的精子活力重復(fù)性明顯好于直觀評(píng)估［6］。②實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)資料是質(zhì)量的一部分?CASA系統(tǒng)所有數(shù)據(jù)都是直接在線獲得的?因此明顯優(yōu)于其他方法［6］?記錄傳遞到數(shù)據(jù)庫的過程無錯(cuò)誤發(fā)生?可清楚準(zhǔn)確地打印出結(jié)果。所有的數(shù)據(jù)可直接轉(zhuǎn)換到數(shù)據(jù)庫、能夠?qū)?**前和***后測(cè)定的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較［9］、質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的采集與保存、每天的標(biāo)本測(cè)試記錄以及許多其他報(bào)告等等?如此大量數(shù)據(jù)的處理只有在計(jì)算機(jī)中才能完成。但是CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定也許限制了其質(zhì)量?特別是在精子形態(tài)學(xué)檢查中?通過CASA系統(tǒng)對(duì)精子形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析［7］?這些特征（細(xì)胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它）可由操作者選擇?這樣就會(huì)引起同一標(biāo)本在不同實(shí)驗(yàn)室或不同分析者測(cè)得的結(jié)果一致性較差［8］。就形態(tài)學(xué)分析而言?傳統(tǒng)方法的可變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于CASA分析。Hamilton Thorne精子分析STR