測定精子密度和精子總數(shù)的方法主要包括顯微鏡計數(shù)和全自動分析。1.顯微鏡計數(shù)：這是傳統(tǒng)的測定方法，需要收集精液，通常是使用量杯。收集后，應(yīng)在實驗室中盡快進行計數(shù)。應(yīng)在光學顯微鏡下將精子進行分類，這一步非常重要，因為完整的精子才能被計數(shù)。然后，將剩余的精液樣本通過自然沉降或離心的方法讓精子下沉，通過顯微鏡觀察并計數(shù)。這種方法需要一定的經(jīng)驗和技巧，而且受到許多因素的影響，如精子的活動性、濃度、形態(tài)等。2.全自動分析：隨著科技的發(fā)展，現(xiàn)在有全自動的精子分析儀，可以快速準確地測定精子密度和總數(shù)。這種方法通過激光技術(shù)進行，可以測量大量精子，包括前向運動的精子。這些儀器通?？梢蕴峁└_的結(jié)果，并且減少了人為錯誤。在進行精子計數(shù)前，男性應(yīng)避免長時間禁欲，因為這可能會影響精子的數(shù)量和質(zhì)量。同時，健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數(shù)量和質(zhì)量。CASA系統(tǒng)可以給出多種精子運動狀態(tài)的參數(shù)，這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運動特性。北京狗精子分析重復(fù)性高

通過結(jié)果的生物學意義對結(jié)果質(zhì)量進行評估?當所有具生物學意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運動精子百分率上的相關(guān)性較低］。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進行比較，其結(jié)果為：采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù)；變異系數(shù)（CV）是29％?活動精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)（授精IVF）的發(fā)展使檢測精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能；同樣可以驗證CASA測定結(jié)果與精子真實質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。北京CASA精子分析DAPCASA系統(tǒng)用量少，檢測速度快，能夠顯著提高實驗室的工作效率。

二、生化及免疫學檢驗：1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L?！九R床意義】（1）精液果糖為0，可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導(dǎo)致精子運動能量缺乏，甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者。（3）精漿酸性磷酸酶檢測是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L。【臨床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān)，其活力不足，可導(dǎo)致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相對活性：≥0.426?！九R床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運動獲能的關(guān)鍵酶，該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發(fā)生缺陷時無LDH-X形成，少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。

精液顯微鏡檢查(1)精子存活率：排精后30～60分鐘，正常精子存活率應(yīng)為80%～90%，精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因。(2)精子活動力：指精子活動狀態(tài)，也是指活動精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級：①精子活動好，運動迅速，活潑有力，直線向前運動；②精子活動較好，運動速度尚可，游動方向不定，呈直線或非直線運動，帶有回旋；③精子運動不良，運動遲緩，原地打轉(zhuǎn)或抖動，向前運動能力差；④死精子，精子完全不活動。正常精子活動力應(yīng)在③級以上，若＞40%的精子活動不良(③、④)級，常是導(dǎo)致男性不育的重要原因。精子活動力低，主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***，應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。在男科和輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域，精子質(zhì)量的評估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié)。

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術(shù)。有研究認為，氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實驗、精子染色質(zhì)檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分，強調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測精子超活化運動的內(nèi)容。對精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運的內(nèi)容。?HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，前向性（STR）?：平均路徑的直線性。北京人精子分析負相差

HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，擺動性（WOB）?：實際的曲線路徑關(guān)于平均路徑的擺動值。北京狗精子分析重復(fù)性高

精子計數(shù)是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細胞計數(shù)板上，在顯微鏡下計數(shù)紅細胞計數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細胞計數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計數(shù)精子數(shù)量。將已經(jīng)液化的精液標本均勻混合，用白細胞計數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計數(shù)板內(nèi)，計數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù)，在尾數(shù)后加5個“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計數(shù)為1280個，則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi)，稀釋后進行計數(shù)。如精子的數(shù)目極少，亦可改為稀釋10倍計數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來的，因此單憑一次排精的精子計數(shù)來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計數(shù)來反映睪丸的生精機能。北京狗精子分析重復(fù)性高