在精子形態(tài)學檢查中，通過CASA系統(tǒng)對精子形態(tài)學特征進行分析，有些特征（細胞大小、形狀、光學密度、尾的存在以及其它）可由操作者選擇，這樣就會引起同一標本在不同實驗室或不同分析者測得的結(jié)果一致性較差[10]。4結(jié)論和展望計算機輔助**分析具有較好的可靠性、重復性和穩(wěn)定性，與傳統(tǒng)的光學顯微鏡目測估計相比，更具有快速方便、對比性強、便于交流等明顯優(yōu)點[11]，常規(guī)**檢查無法測定精子微細運動特點，顯示CASA在男性不育癥診斷篩選中的優(yōu)越性。王益鑫亦發(fā)現(xiàn)，部分手工**檢查正常的不育患者，進行**全自動分析及生化檢測，均發(fā)現(xiàn)明顯異常[12]。因此，CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗方面具有重要的實際應用意義。全自動精子分析儀極大提高臨床檢驗水平，廣泛應用于泌尿科，男性科以及計劃生育、優(yōu)生優(yōu)育研究等。廣州馬精子分析DCL

精子分析儀使用注意事項

1.樣品制備是CASA取得高質(zhì)量檢查結(jié)果的關(guān)鍵。CASA采用深度為10um樣品池，能保證精子在單層界面內(nèi)自由運動。取樣分析前標本必須充分混勻，用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中，用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。

2.不潔凈的計數(shù)池可影響精子的活力，尤其影響灰度CASA精子計數(shù)的準確性。

3.精子樣品密度過大時，造成圖像處理上的粘連，無法分析每個精子的運動特性。**中所含精子太少時，需增加檢查視野數(shù)量或者使用低倍物鏡觀察，以提高樣品檢出率。 前向運動精子分析ALHWHO第6版明確提出：使用CASA系統(tǒng)須遵循適當?shù)某绦虿襟E，才能獲得可靠和可重復的結(jié)果。

精子分析儀工作原理

以灰度識別CASA為例，采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合，**標本液化后吸入計數(shù)，通過顯微鏡放大后，用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計算機。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運動移位及運動參數(shù)，對采集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態(tài)分析，由計算機處理后，打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態(tài)檢測分析，2-3分鐘即可完成檢測 [1]。

優(yōu)點：

操作簡便，用量少，檢測速度快，重復性優(yōu)于人工檢測，并且能夠快速、準確的測定精子密度、活力、精子分級等，還可提供精子運動狀態(tài)的多種參數(shù)等。

缺點：

影響分析結(jié)果的因素較多，除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外，不同的精子計數(shù)池的相對準確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。

CASA可將每個精子的活力按以下分級：（1）前向運動型（PR）：精子運動活躍、線性運動或者在較大的范圍內(nèi)運動。（2）非前向運動型（NP）：所有其他非前向運動的形式，如精子在較小的范圍內(nèi)運動，精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動。（3）完全不動型（IM）：精子完全不動。CASA系統(tǒng)檢測的這些參數(shù)有一套標準的術(shù)語。（1）VCL=曲線速度（mm/s）。精子頭沿其實際的曲線，即在顯微鏡下見到的二維方式運動軌跡的平均速度。檢測細胞活力。（2）VSL=直線速度（mm/s）。根據(jù)精子頭在開始檢測時的位置與***所處位置之間的直線運動的時間平均速度。（3）VAP=平均路徑速度（mm/s）。精子頭沿其空間平均軌跡移動的時間平均速度。（4）ALH=精子頭側(cè)擺幅度（mm）。精子頭沿其空間平均軌跡側(cè)擺的幅度。以側(cè)擺的最大值或平均數(shù)值表示。（5）LIN=直線性。曲線軌跡的直線性。即VSL/VCL。（6）WOB=擺動性。精子頭沿其實際軌跡的空間平均路徑擺動的尺度。即VAP/VCL。（7）STR=前向性。空間平均路徑的直線性。即VSL/VAP。（8）BCF=鞭打頻率（Hz）。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時間平均速率。（9）MAD=平均移動角度（度）。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時間平均***值。精子分析儀能分析與精子運動功能相關(guān)的各種參數(shù)。

方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細胞計數(shù)池、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法。精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較，具有速度快、量比性好、準確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測依據(jù)。上海計數(shù)精子分析DAP

HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，直線性（LIN）?：曲線軌跡的直線性。廣州馬精子分析DCL

精液顯微鏡檢查

精子計數(shù)：正常人精子計數(shù)為0．6×10¹²～1．5×0.012/L，相當于一次排出的精子總數(shù)為400×10⁶～600×10⁶。當精子計數(shù)值＜20×10⁶/ml或一次排精總數(shù)＜100×10⁶為精子減少，超過致孕極限而導致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無精癥。見于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結(jié)核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷，是導致少精或無精的重要原因，也是導致不育的重要原因。檢查有無精子也是檢查輸精管結(jié)扎術(shù)的效果觀察。結(jié)扎六周后，連續(xù)檢查無精子，說明手術(shù)成功，如果結(jié)扎兩個月后，精液中仍有精子，說明手術(shù)不成功。 廣州馬精子分析DCL