1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,不僅是男科實驗室,任何開展精液檢查的實驗室都能遵循。精子計數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計數(shù)板的方法,但計數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實驗只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明,鑒別快速前向運動精子非常重要。因此,關(guān)于精子活力分級,第6版手冊建議恢復(fù)到快速前向運動、慢速前向運動、非前向運動和不活動4個活力級別,但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運動(PR)、非前向運動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強調(diào),精子形態(tài)學(xué)評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正?!毙螒B(tài)率的判斷,則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評估1500個精子來完成;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液,應(yīng)單獨計算并在報告中注明;CASA系統(tǒng)操作簡便,檢測速度快,且重復(fù)性優(yōu)于人工檢測。南京人精子分析ALH
醫(yī)生處置質(zhì)量是指診斷質(zhì)量?是以當(dāng)今醫(yī)學(xué)科學(xué)知識、技術(shù)為基礎(chǔ)依據(jù)癥狀來完成的。CASA系統(tǒng)可以為醫(yī)生提供優(yōu)于傳統(tǒng)精子分析的手段和快速準(zhǔn)確的分析結(jié)果[5]。CASA在醫(yī)生處置質(zhì)量方面的特點在于:①當(dāng)CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定和樣品的處理方式(溫度、稀釋法、緩沖液)確定時?通過個體內(nèi)和個體間的比較?CASA的精子活力重復(fù)性明顯好于直觀評估[6]。②實驗室數(shù)據(jù)資料是質(zhì)量的一部分?CASA系統(tǒng)所有數(shù)據(jù)都是直接在線獲得的?因此明顯優(yōu)于其他方法[6]?記錄傳遞到數(shù)據(jù)庫的過程無錯誤發(fā)生?可清楚準(zhǔn)確地打印出結(jié)果。所有的數(shù)據(jù)可直接轉(zhuǎn)換到數(shù)據(jù)庫、能夠?qū)?**前和***后測定的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)比較[9]、質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的采集與保存、每天的標(biāo)本測試記錄以及許多其他報告等等?如此大量數(shù)據(jù)的處理只有在計算機中才能完成。但是CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定也許限制了其質(zhì)量?特別是在精子形態(tài)學(xué)檢查中?通過CASA系統(tǒng)對精子形態(tài)學(xué)特征進行分析[7]?這些特征(細(xì)胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇?這樣就會引起同一標(biāo)本在不同實驗室或不同分析者測得的結(jié)果一致性較差[8]。就形態(tài)學(xué)分析而言?傳統(tǒng)方法的可變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于CASA分析。北京精子分析DAP精子分析儀節(jié)省時間,提高實驗室的工作效率,讓醫(yī)生和科研人員更快速地獲取實驗分析結(jié)果。
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點,但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進行**分析應(yīng)注意以下幾點:3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運動參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時間的延長,精子活動力及活動率有減少的趨勢。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進行分析。(7)檢測精子活動力,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。
CASA精子運動速度和運動軌跡特征主要參數(shù)有:①軌跡速度(VCL):也稱曲線速度,即精子頭部沿其實際行走曲線的運動速度。②平均路徑速度(VAP):精子頭沿其空間平均軌跡的運動速度,這種平均軌跡是計算機將精子運動的實際軌跡平均后計算出來的,可因不同型號的儀器而有所改變。③直線運動速度(VSL):也稱前向運動速度,即精子頭部直線移動距離的速度。④直線性(LIN):也稱線性度,為精子運動曲線的直線分離度,即VSL/VCL。⑤精子側(cè)擺幅度(ALH):精子頭實際運動軌跡對平均路徑的側(cè)擺幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型號的CASA系統(tǒng)由于計算方法不一致,因此相互之間不可直接比較。⑥前向性(STR):也稱直線性,計算公式為VSL/VAP,亦即精子運動平均路徑的直線分離度。⑦擺動性(WOB):精子頭沿其實際運動軌跡的空間平均路徑擺動的尺度,計算公式為VAP/VCL。⑧鞭打頻率(BCF):也稱擺動頻率,即精子頭部跨越其平均路徑的頻率。⑨平均移動角度(MAD):精子頭部沿其運動軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時間平均值。⑩運動精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子數(shù)。Hamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能,能夠在短時間內(nèi)處理大量樣本,提高工作效率。
測定精子密度和精子總數(shù)的方法主要包括顯微鏡計數(shù)和全自動分析。1.顯微鏡計數(shù):這是傳統(tǒng)的測定方法,需要收集精液,通常是使用量杯。收集后,應(yīng)在實驗室中盡快進行計數(shù)。應(yīng)在光學(xué)顯微鏡下將精子進行分類,這一步非常重要,因為完整的精子才能被計數(shù)。然后,將剩余的精液樣本通過自然沉降或離心的方法讓精子下沉,通過顯微鏡觀察并計數(shù)。這種方法需要一定的經(jīng)驗和技巧,而且受到許多因素的影響,如精子的活動性、濃度、形態(tài)等。2.全自動分析:隨著科技的發(fā)展,現(xiàn)在有全自動的精子分析儀,可以快速準(zhǔn)確地測定精子密度和總數(shù)。這種方法通過激光技術(shù)進行,可以測量大量精子,包括前向運動的精子。這些儀器通常可以提供更精確的結(jié)果,并且減少了人為錯誤。在進行精子計數(shù)前,男性應(yīng)避免長時間禁欲,因為這可能會影響精子的數(shù)量和質(zhì)量。同時,健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數(shù)量和質(zhì)量。CASA系統(tǒng)用量少,檢測速度快,能夠顯著提高實驗室的工作效率。美國密度精子分析VAP
精子分析,直線速率(VSL)?:精子頭在開始檢測時的位置與終止所處位置之間的直線運動的時均速率。南京人精子分析ALH
美國Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國內(nèi)外毒理學(xué)實驗室所使用。本試驗研究目的對精子分析儀和血細(xì)胞計數(shù)板在大鼠附睪精子計數(shù)結(jié)果的比較驗證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計數(shù)進行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOX IVOS精子分析儀載物臺,進行精子計數(shù),同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計數(shù)板內(nèi),通過光學(xué)顯微鏡進行計數(shù),比較兩種計數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計數(shù)器的精子計數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計數(shù)器的精子計數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計數(shù)器的精子計數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細(xì)胞計數(shù)板的精子計數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價值。南京人精子分析ALH
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可...
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