精子分析儀工作原理
以灰度識別CASA為例,采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合,**標本液化后吸入計數(shù),通過顯微鏡放大后,用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計算機。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運動移位及運動參數(shù),對采集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態(tài)分析,由計算機處理后,打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態(tài)檢測分析,2-3分鐘即可完成檢測 [1]。
優(yōu)點:
操作簡便,用量少,檢測速度快,重復性優(yōu)于人工檢測,并且能夠快速、準確的測定精子密度、活力、精子分級等,還可提供精子運動狀態(tài)的多種參數(shù)等。
缺點:
影響分析結(jié)果的因素較多,除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外,不同的精子計數(shù)池的相對準確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。 Hamilton Thorne精子分析儀是一款功能強大、準確可靠的精子質(zhì)量評估設(shè)備。狗精子分析負相差
前沿性檢查:目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術(shù)。有研究認為,氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素;新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實驗、精子染色質(zhì)檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分,強調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質(zhì)控要求,增加了CASA檢測精子超活化運動的內(nèi)容。對精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運的功能分析,可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此,手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運的內(nèi)容。香港密度精子分析VAPIVOS具有高分辨率和高靈敏度的特點,能夠捕捉到微小的細節(jié)和變化,進一步提高了精子分析的準確性。
二、生化及免疫學檢驗:1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L。【臨床意義】(1)精液果糖為0,可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常見于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可導致精子運動能量缺乏,甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【臨床意義】(1)精漿酸性磷酸酶含量增高,常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。(2)精漿酸性磷酸酶含量降低,常見于前列腺炎患者。(3)精漿酸性磷酸酶檢測是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L?!九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān),其活力不足,可導致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相對活性:≥0.426。【臨床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性,是精于運動獲能的關(guān)鍵酶,該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失,精子發(fā)生缺陷時無LDH-X形成,少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。
精子計數(shù)是在顯微鏡下計算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,滴于血細胞計數(shù)板上,在顯微鏡下計數(shù)紅細胞計數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細胞計數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計數(shù)精子數(shù)量。
將已經(jīng)液化的精液標本均勻混合,用白細胞計數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計數(shù)板內(nèi),計數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),在尾數(shù)后加5個“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計數(shù)為1280個,則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時,可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),稀釋后進行計數(shù)。如精子的數(shù)目極少,亦可改為稀釋10倍計數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,因此單憑一次排精的精子計數(shù)來衡量睪丸生精機能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計數(shù)來反映睪丸的生精機能。 男性精液檢測主要依賴計算機輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses,CASA)。
全自動的IVOS可以提供**快的分析速度以及高質(zhì)量數(shù)據(jù)輸出??梢允褂靡淮涡缘暮涂芍貜偷妮d玻片,深度從10um~100um。每次分析捕捉100幀圖像,掃描速度每秒60幀。**的軟件升級。
IVOS能提供:精確、客觀、具有重復性的結(jié)果。高速分析,在60Hz下半秒掃描30幀,為實驗室節(jié)省成本。 [1]主要功能IVOS自動精子活動、濃度、形態(tài)分析系統(tǒng)。Hamilton Thorne的CASA系統(tǒng)適用于臨床、研究實驗室、動物繁殖基地、水產(chǎn)業(yè)、制藥公司等各種領(lǐng)域,成為了精液分析業(yè)的金標準??梢詰?yīng)用于包括人類、公牛、馬、野豬、狗、兔子、老鼠、綿羊、山羊、魚以及各種瀕危動物。在TOX IVOS上有**的大鼠精液分析軟件。 精子分析儀參數(shù),精子頭側(cè)擺幅度(ALH)?:精子頭關(guān)于其平均路徑的側(cè)向位移幅度。兔子精子分析高準確率
?精子分析可以分析參數(shù)有,曲線速率(VCL)?:精子頭沿其實際曲線運動的時均速率。狗精子分析負相差
[臨床意義]1. 若數(shù)日未**、且精液量少于1.5ml者為不正常,說明精囊或前列腺有病變;若精液量減至數(shù)滴,甚至排不出,稱為無精液癥,見于生殖系統(tǒng)的特異性***,如結(jié)核、淋病和非特異性炎癥等。2.若精液量過多(一次超過8ml),則精子被稀釋而相應(yīng)減少,有礙生育。二、顏色檢查[正常參考值]灰白或乳白色,久未**者可呈淺黃色。[臨床意義]1.黃色或棕色膿樣精液:見于精囊炎或前列腺炎等。2.鮮紅或暗紅色血性精液:見于生殖系統(tǒng)的炎癥、結(jié)核和**等。三、粘稠度和液化檢查[正常參考值]粘稠膠凍狀,30分鐘內(nèi)自行液化。[臨床意義]1.精液粘稠度低,似米湯樣,可因精子量減少所致,見于生殖系統(tǒng)炎癥。??2.液化時間過長或不液化,可抑制精子活動而影響生育,常見于前列腺炎癥等。四、精子活動率檢測[正常參考值]正常精子活力一般在Ⅲ級(活動較好,有中速運動,但波形運動的較多)以上,**后1小時內(nèi)有Ⅲ級以上活動能力的精于應(yīng)>0.60。[臨床意義]如果0級(死精子,無活動能力,加溫后仍不活動)和Ⅰ級(活動不良,精子原地旋轉(zhuǎn)、擺動或抖動,運動遲緩)精子在0.40以上,常為男性不育癥的重要原因之一。狗精子分析負相差
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學評估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學、中段甚至主段的形態(tài),可...
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