精子分析儀使用注意事項(xiàng)

1.樣品制備是CASA取得高質(zhì)量檢查結(jié)果的關(guān)鍵。CASA采用深度為10um樣品池，能保證精子在單層界面內(nèi)自由運(yùn)動。取樣分析前標(biāo)本必須充分混勻，用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中，用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。

2.不潔凈的計(jì)數(shù)池可影響精子的活力，尤其影響灰度CASA精子計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。

3.精子樣品密度過大時，造成圖像處理上的粘連，無法分析每個精子的運(yùn)動特性。**中所含精子太少時，需增加檢查視野數(shù)量或者使用低倍物鏡觀察，以提高樣品檢出率。 所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓(xùn)，嚴(yán)格按照使用指南進(jìn)行操作?。香港快速運(yùn)動精子分析負(fù)相差

精子分析儀是計(jì)算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)結(jié)合的**分析儀器設(shè)備，通過顯微鏡下攝像和計(jì)算機(jī)快速分析多個視野內(nèi)精子的運(yùn)行軌跡，客觀記錄了精子的密度、活動力、活動率和存活率等各項(xiàng)參數(shù)。

計(jì)算機(jī)輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、恒溫系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構(gòu)成。此外，儀器一般配有**樣品盒，以確保單層取樣 [1]。1.顯微攝像系統(tǒng)：由顯微鏡及CCD組成。可以將標(biāo)本信號通過顯微放大由CCD傳輸?shù)接?jì)算機(jī)2.圖像采集系統(tǒng)：由圖像卡構(gòu)成，其功能是對CCD信號進(jìn)行抓拍、識別、預(yù)處理后，將成熟信號輸送到計(jì)算機(jī)。3.恒溫系統(tǒng)：由加溫和保溫設(shè)備組成。加溫是通過熱吹風(fēng)機(jī)不斷將適宜的溫度熱風(fēng)鼓入封閉保溫罩內(nèi)，提供穩(wěn)定、可靠的檢查環(huán)境。4.計(jì)算機(jī)系統(tǒng)：對圖像信號進(jìn)行***系統(tǒng)的加工處理，對獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行輸出和存儲的設(shè)備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質(zhì)量分析軟件，利用現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)識別技術(shù)和圖像處理技術(shù)，對精子的動靜態(tài)特征進(jìn)行***的量化分析，對精子的密度、活力、活率、運(yùn)動軌跡等特征進(jìn)行量的檢測分析 美國前向運(yùn)動精子分析ALH全自動精子分析儀在臨床Z療中展現(xiàn)了明顯的優(yōu)勢。

擴(kuò)展性檢查：可以在某些情況下由實(shí)驗(yàn)室選擇或根據(jù)臨床醫(yī)生的特殊要求而使用的項(xiàng)目。手冊增加了精子DNA損傷、遺傳學(xué)和炎癥細(xì)胞等相關(guān)檢查項(xiàng)目。提出了基因突變是導(dǎo)致不育和精液常規(guī)檢查異常的原因。新增了精液相關(guān)細(xì)胞因子、趨化因子等檢測的方法、試劑、檢測步驟等內(nèi)容。在精液參數(shù)異常的男性中普遍存在精子DNA損傷，并且已有報(bào)道指出其與精液參數(shù)正常男性的不育有關(guān)。由于與精液質(zhì)量相關(guān)，精子DNA損傷檢測是男性不育檢查中的重要補(bǔ)充內(nèi)容，已成為男科學(xué)基礎(chǔ)和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標(biāo)志物之一。本版手冊增加了大量篇幅對其原理和檢測方法進(jìn)行了描述。新增了基因和基因組測序內(nèi)容。臨床上，越來越多的人意識到染色體異常[數(shù)量異常、結(jié)構(gòu)異常(包括微缺失和微重復(fù))]和基因突變是導(dǎo)致各種男性不育癥的基礎(chǔ)病因，而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測序常規(guī)在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，但一些男科實(shí)驗(yàn)室也在做同樣的檢測。為明確生殖道炎癥對于男性不育的影響，泌尿男科醫(yī)生可能提出對精液中的趨化因子和細(xì)胞因子進(jìn)行評估。本手冊納入了精液中白細(xì)胞介素檢測方法。

方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時,CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時,CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。Hamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能，能夠在短時間內(nèi)處理大量樣本，提高工作效率。

醫(yī)生處置質(zhì)量是指診斷質(zhì)量?是以當(dāng)今醫(yī)學(xué)科學(xué)知識、技術(shù)為基礎(chǔ)依據(jù)癥狀來完成的。CASA系統(tǒng)可以為醫(yī)生提供優(yōu)于傳統(tǒng)精子分析的手段和快速準(zhǔn)確的分析結(jié)果［5］。CASA在醫(yī)生處置質(zhì)量方面的特點(diǎn)在于：①當(dāng)CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定和樣品的處理方式（溫度、稀釋法、緩沖液）確定時?通過個體內(nèi)和個體間的比較?CASA的精子活力重復(fù)性明顯好于直觀評估［6］。②實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)資料是質(zhì)量的一部分?CASA系統(tǒng)所有數(shù)據(jù)都是直接在線獲得的?因此明顯優(yōu)于其他方法［6］?記錄傳遞到數(shù)據(jù)庫的過程無錯誤發(fā)生?可清楚準(zhǔn)確地打印出結(jié)果。所有的數(shù)據(jù)可直接轉(zhuǎn)換到數(shù)據(jù)庫、能夠?qū)?**前和***后測定的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較［9］、質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的采集與保存、每天的標(biāo)本測試記錄以及許多其他報(bào)告等等?如此大量數(shù)據(jù)的處理只有在計(jì)算機(jī)中才能完成。但是CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定也許限制了其質(zhì)量?特別是在精子形態(tài)學(xué)檢查中?通過CASA系統(tǒng)對精子形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析［7］?這些特征（細(xì)胞大小、形狀、光學(xué)密度、尾的存在以及其它）可由操作者選擇?這樣就會引起同一標(biāo)本在不同實(shí)驗(yàn)室或不同分析者測得的結(jié)果一致性較差［8］。就形態(tài)學(xué)分析而言?傳統(tǒng)方法的可變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于CASA分析。Hamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩(wěn)定性，能夠長時間穩(wěn)定運(yùn)行，保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。美國精子分析精子動力分析

CASA系統(tǒng)可以給出多種精子運(yùn)動狀態(tài)的參數(shù)，這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運(yùn)動特性。香港快速運(yùn)動精子分析負(fù)相差

二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn)：1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L?！九R床意義】（1）精液果糖為0，可見于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導(dǎo)致精子運(yùn)動能量缺乏，甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者。（3）精漿酸性磷酸酶檢測是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L?！九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān)，其活力不足，可導(dǎo)致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相對活性：≥0.426。【臨床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運(yùn)動獲能的關(guān)鍵酶，該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標(biāo)。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發(fā)生缺陷時無LDH-X形成，少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。香港快速運(yùn)動精子分析負(fù)相差