超濾離心管關(guān)于回收率的疑問(wèn)?一般對(duì)濃度大于0.1mg/ml的溶質(zhì)進(jìn)行回收,回收率在90%以上。通常,樣品損失是由于濾膜表面和料管表面的非特異性吸附造成的。為了獲得較高的回收率,所選濾膜的截留率約為目標(biāo)蛋白的1/3。超濾膜是一種非對(duì)稱膜,其孔徑呈正態(tài)分布。在高壓離心下也可能發(fā)生泄漏,在這種情況下蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變形。因此,截留孔徑越小,流速越慢,但回收率會(huì)更高。濃縮過(guò)程中有蛋白質(zhì)沉淀,如何處理?如果蛋白質(zhì)濃縮過(guò)快或過(guò)多,都可能造成蛋白質(zhì)沉淀,濃縮后的蛋白質(zhì)之后濃度不宜過(guò)高;對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感、易沉淀的蛋白質(zhì),建議改進(jìn)方法如下:1)降低離心速度,2)使用截留分子量較大的超濾膜3) 吹吸濃縮管,然后離心。超濾離心管還可以用于檢測(cè)樣品中的元素、抗體等生物活性分子。重慶30K超濾離心管生產(chǎn)廠商
蛋白質(zhì)濃縮和替代緩沖液常用的超濾管,微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超濾管。根據(jù)靶蛋白的分子量、濃縮前的體積和濃縮的靶體積,還可提供不同尺寸和尺寸的其他類型的mwco超濾管。它可以重復(fù)使用。1。選擇合適的超濾管主要考慮分子量和濃度。通常靶蛋白的分子量不應(yīng)大于靶蛋白分子量的1/3。例如,當(dāng)靶蛋白的分子量為35kDa時(shí),可以選擇靶蛋白分子量為10kDa的超濾管。如果靶蛋白的分子量約為10kd,則可使用分子量為3kd的超濾管。2。新購(gòu)買的超濾是干燥的。使用前加入Milliq水。水的體積完全覆蓋在膜上,冰浴或冰箱被預(yù)先冷卻幾分鐘。倒出水后,可以加入蛋白質(zhì)溶液。蛋白質(zhì)添加量不超過(guò)管頂白線。超濾管在加入蛋白質(zhì)溶液前需要在冰上預(yù)先冷卻。三。平衡。浙江30K超濾離心管廠家電話超濾離心管通常被用于食品科學(xué)中,以確定食品成分和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。
離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液盛放在離心管中在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(如細(xì)胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離。而離心管就是離心試驗(yàn)中必備的實(shí)驗(yàn)耗材之一。含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面。對(duì)超濾離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失,大多數(shù)情況下,在濃縮稀蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率,因?yàn)槿芤嚎商顫M膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn)。鈍化的方法是預(yù)先用較高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子1小時(shí)以上,蒸餾水徹底沖洗柱子,再用蒸餾水離心一次以徹底除去可能殘留在膜上的鈍化溶液。注意鈍化處理后別讓膜干了。如果要留待以后使用,需要加無(wú)菌蒸餾水保持膜濕潤(rùn)。
超濾管,即超濾離心管,是生物、化學(xué)實(shí)驗(yàn)室非常重要的分離裝置。超濾管可以去除蛋白質(zhì)及大分子雜質(zhì),經(jīng)常用于蛋白濃縮和更換緩沖液的操作,超濾是實(shí)驗(yàn)室常用的分離技術(shù),是一種加壓膜分離技術(shù),膜孔徑介于微濾和反滲透之間,通過(guò)膜表面的微孔結(jié)構(gòu)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行選擇性分離。在一定壓力下,小分子物質(zhì)可穿過(guò)一定孔徑的特制薄膜,而大分子物質(zhì)不能透過(guò),從而將小分子與生物大分子分開,實(shí)現(xiàn)濾除微小固型顆粒物、大分子、病毒以及細(xì)菌等微生物的目的。超濾管一般由蓋子、過(guò)濾器和離心管三個(gè)部分組成。超濾管具有快速超過(guò)濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液或復(fù)雜的樣本組合中進(jìn)行濃縮液回收,其豎式設(shè)計(jì)以及可用的濾膜表面面積能夠提供快速的樣本處理速度和較高的樣本回收率,并能進(jìn)行80倍濃縮。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的操作流程和實(shí)驗(yàn)室規(guī)范,并定期進(jìn)行質(zhì)量控制和評(píng)估。
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;較新推出ZL產(chǎn)品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。超濾離心管可以去除混合物中的雜質(zhì)和低分子量化合物,得到高純度的目標(biāo)化合物。重慶30K超濾離心管生產(chǎn)廠商
在使用超濾離心管時(shí),需要注意保持管子清潔、干燥和無(wú)污染。重慶30K超濾離心管生產(chǎn)廠商
超濾管采用其特有的再生纖維素膜,定義為:一個(gè)確定NMWL 的超濾膜應(yīng)該截留至少90% 以上的這個(gè)大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的再生纖維素膜得率超過(guò)90%。請(qǐng)仔細(xì)查看以下默克生命科學(xué)官方數(shù)據(jù):(以0.5mL的AU0.5為例,其它型號(hào)截留分子量的選擇原則一致,具體離心力和離心時(shí)間不同。截留分子量選小啦!看到這個(gè)表,你是否發(fā)現(xiàn)原來(lái)抱怨超濾管流速偏慢的根源來(lái)自對(duì)于截留分子量定義的誤解。膜孔徑要小于目的分子這是一原則。如果分子有近似球形的立體結(jié)構(gòu)(而非明顯的線性分子),在再生纖維素超濾膜體系內(nèi),選擇“等于”或“略小于”目的分子的截留分子量的超濾管是較佳選擇,這樣操作起來(lái)又快又好,既保證了樣品回收率,又縮短了離心時(shí)間,大幅降低大分子損傷風(fēng)險(xiǎn)。重慶30K超濾離心管生產(chǎn)廠商
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超濾離心管具有多種容量和規(guī)格,以滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。在選擇時(shí),需綜合考慮樣本量、目標(biāo)分子濃度、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.. [詳情]
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2025-04-27