超濾離心管從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中濃縮蛋白，在園子里找到一些關(guān)于濃縮蛋白的一些帖子，但還有些問題還是向園子里的大蝦請教一下。我們定的是 15ml規(guī)格的管子，不知道有沒有誰以前做過的，有關(guān)于轉(zhuǎn)速，時間給一些建議，另外細(xì)胞上清液離心前是否需要什么預(yù)處理？離心之后回收蛋白時怎么盡量減少損失？如果要把管子重復(fù)利用，NaoH清洗后，如何在20%的乙醇中保存？是將其浸到乙醇中防于4度，還是在管子中灌入乙醇？我用過5ml的管子，當(dāng)時使用的轉(zhuǎn)速是4000rpm 8min，可以把5ml的樣品液濃縮到約200ul，這只供參考，具體情況還要由您的樣品決定。我保存5ml管子的方法是把內(nèi)管取出，浸泡于裝有20％乙醇的燒杯中。四度保存。超濾離心管可以通過手動或自動方式進(jìn)行操作，以適應(yīng)不同的實驗室流程要求。廣州10K超濾離心管供應(yīng)商

塑料離心管的優(yōu)點是透明或者是半透明的，它的硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺點是易變形，抗有機(jī)溶劑腐蝕性差，使用壽命短。塑料離心管都有管蓋，它的作用是防止樣品外泄，尤其是用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時防止樣品外泄是很重要的一點；管蓋還有一個作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管，防止離心管變形。在挑選這一點的時候還要注意檢查管蓋是否嚴(yán)密，在試驗時能否蓋嚴(yán)，以到達(dá)倒置不漏液；我們都知道在塑料離心管中，常用材料有聚乙烯PE)，聚碳酸酯(PC)，聚丙烯(PP)等，其中聚丙烯PP管性能會相對較好，所以，我們在挑選塑料離心管時盡可能的考慮聚丙烯的塑料離心管。廣東再生纖維素離心管選擇超濾離心管適用于從細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、尿液等樣品中分離蛋白質(zhì)、核酸、多糖等大分子化合物。

蛋白質(zhì)濃縮和替代緩沖液常用的超濾管，微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超濾管。根據(jù)靶蛋白的分子量、濃縮前的體積和濃縮的靶體積，還可提供不同尺寸和尺寸的其他類型的mwco超濾管。它可以重復(fù)使用。1。選擇合適的超濾管主要考慮分子量和濃度。通常靶蛋白的分子量不應(yīng)大于靶蛋白分子量的1/3。例如，當(dāng)靶蛋白的分子量為35kDa時，可以選擇靶蛋白分子量為10kDa的超濾管。如果靶蛋白的分子量約為10kd，則可使用分子量為3kd的超濾管。2。新購買的超濾是干燥的。使用前加入Milliq水。水的體積完全覆蓋在膜上，冰浴或冰箱被預(yù)先冷卻幾分鐘。倒出水后，可以加入蛋白質(zhì)溶液。蛋白質(zhì)添加量不超過管頂白線。超濾管在加入蛋白質(zhì)溶液前需要在冰上預(yù)先冷卻。三。平衡。

離心管主要有塑料、不銹鋼制成，塑料離心管常用資料有聚丙烯（PP）.聚乙烯（PE），聚碳酸酯（PC）等。其中PP管性能較好，塑料離心管的優(yōu)點是透明（或半透明），硬度小，可用穿刺法取出梯度，缺陷是易變形，抗有機(jī)溶劑腐蝕性差，運用壽命短；不銹鋼離心管強(qiáng)度大，不變形，能抗凍，抗熱，抗化學(xué)腐蝕，但用時要防止接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品、如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等化學(xué)試劑。這里主要介紹塑料離心管：塑料離心管都有管蓋，離心前管蓋必需蓋嚴(yán)，倒置不漏液。管蓋有三種作用：①避免樣品外泄，用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時②避免樣品揮發(fā)③支持離心管，避免離心管變形。超濾離心管通常被用于生物醫(yī)學(xué)中，以研究疾病細(xì)胞、干細(xì)胞等。

超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用，不過對于蛋白質(zhì)樣本處理，特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附較小化，但是,某些蛋白,特別是稀的時候,會有問題。非特異結(jié)合的程度隨著個別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面。對超濾離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失，大多數(shù)情況下，在濃縮稀蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率，因為溶液可填滿膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點。鈍化的方法是預(yù)先用較高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子1小時以上，蒸餾水徹底沖洗柱子，再用蒸餾水離心一次以徹底除去可能殘留在膜上的鈍化溶液。注意鈍化處理后別讓膜干了。如果要留待以后使用，需要加無菌蒸餾水保持膜濕潤。使用超濾離心管時，應(yīng)注意控制轉(zhuǎn)速，以避免過度旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致超濾膜損壞或溢出樣品。安徽10K超濾離心管訂做

超濾離心管也可用于從血漿或尿液中提取蛋白質(zhì)和核酸等大分子化合物。廣州10K超濾離心管供應(yīng)商

超濾是大分子脫鹽、濃縮較方便的方法，重復(fù)性好，得率有保障，已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標(biāo)準(zhǔn)操作；在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管采用離心方式快速處理樣品，是很多科研小伙伴們每天要用到的基本裝備。但是，在默克生命科學(xué)團(tuán)隊推出超濾管中文說明書(AU0.5/4/15)之前，我們發(fā)現(xiàn)近90%的使用者在選擇和使用過程中因為缺乏必要信息而沒有獲得較佳體驗，更重要的是，寶貴的樣本會遭受本可避免的損失！如果目的蛋白是120kDa，請問應(yīng)該選擇的超濾管規(guī)格是100k，50k，還是30k甚至10k？你采用的是1/2，1/3抑或1/6算法？這些沒有統(tǒng)一的說法，是因為不同廠家的膜的截留分子量的定義不同。廣州10K超濾離心管供應(yīng)商

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