下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。實(shí)施例1一種可用于熒光PCR擴(kuò)增的快速提取全血基因組的方法中的熒光PCR擴(kuò)增反應(yīng)液包括濃度或含量和組分如表1。將所述的熒光PCR擴(kuò)增反應(yīng)液對(duì)血液樣本中的管家基因***DH進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增,方法如下:將**管顛倒混勻后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸釋放劑,渦旋混勻,然后5000g離心30s,棄上清,獲得細(xì)胞沉淀;然后再加入200μL核酸釋放劑,渦旋1min至沉淀完全散開,5000g離心30s,棄上清;向細(xì)胞沉淀中加入50μL核酸釋放劑,渦旋振蕩1min,室溫放置5min,12000g離心30s,取上清液即為提取的血液基因組DNA;取上清液3μL,加入到配制好的熒光PCR反應(yīng)液,于ABI7500熒光PCR儀中進(jìn)行擴(kuò)增。所述的熒光PCR擴(kuò)增程序如下。步驟①:50℃,2min,循環(huán)1次。步驟②:95℃,5min,循環(huán)1次。步驟③:95℃15s,55℃30s(收集熒光),循環(huán)40次。結(jié)果分析:平行擴(kuò)增的熒光定量PCR反應(yīng)中,陰性對(duì)照無擴(kuò)增,說明反應(yīng)體系正常,無污染。用本發(fā)明處理了10份來源不同的人血液樣本,然后用人管家基因***DH引物進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增檢測(cè),結(jié)果如圖1所示。 用口腔拭子檢測(cè)后請(qǐng)仔細(xì)填寫送檢登記表上的相關(guān)信息。遼寧海綿口腔拭子供應(yīng)商家
紫藍(lán)色結(jié)節(jié)、瘺孔等,分泌物量、性質(zhì)、顏色、氣味等,陰道有無橫隔、縱隔、斜隔、狹窄、閉鎖、雙陰道等畸形,宮頸大小、形狀、色澤,有無糜爛、舊裂、贅生物、紫藍(lán)色結(jié)節(jié)及接觸性出血等,宮頸管分泌物性狀,宮頸陰道段長(zhǎng)度及雙宮頸畸形等。盆腔檢查檢查前先排便,排便困難者可先導(dǎo)尿及服用緩瀉劑,有陰道出血者需先消毒外陰并戴無菌手套;月經(jīng)期一般不做盆腔及陰道檢查;未婚者一般*作肛門指診檢查。
(1)雙合診:即陰道腹部雙合診。檢查者戴無菌手套,以示指、中指蘸潤(rùn)滑液后順陰道后壁輕輕插入,檢查陰道有無腫塊、狹窄、瘢痕、彈性等,子宮頸高度、大小、質(zhì)地、硬度,有無舉痛,后穹窿是否飽滿,軟硬度,有無彈性,結(jié)節(jié)、腫塊、浸潤(rùn)、觸痛。然后將另1手置于下腹壁與陰道內(nèi)手指配合檢查盆腔生殖器先作宮體觸診,注意子宮體大小、位置、形狀、硬度、活動(dòng)度及有無壓痛。將內(nèi)診指放在一側(cè)穹窿,雙手檢查附件與宮旁組織有無增厚、壓痛、包塊,如有腫塊需查清大小、活動(dòng)度、質(zhì)地、形狀,有無觸痛以及與子宮有無粘連,有無向周圍組織臟器浸潤(rùn)等,先查不痛的一側(cè),然后再查對(duì)側(cè)。
(2)三合診:又稱陰道直腸腹部三合診。用示指插入陰道、中指插入肛門內(nèi)觸診。 遼寧海綿口腔拭子供應(yīng)商家口腔拭子適用于采集任何年齡段人群的DNA樣本。
中文名稱: 口腔拭子DNA樣本保存管
英文名稱: Swab DNA Storage Tube
產(chǎn)品規(guī)格: 200μl×20支
發(fā)貨周期: 1~3天
產(chǎn)品價(jià)格: 詢價(jià)
本產(chǎn)品采用醫(yī)療**的聚氨脂海綿為原材料,具有吸液性強(qiáng)、柔軟潔凈、發(fā)塵量低等優(yōu)點(diǎn)。采樣拭子頭可折斷,使用方便。采用的物料對(duì)微生物無危害,能大量地增加樣本的采集、釋放量,增強(qiáng)樣本送檢期間的保存效果。能夠常溫保存口腔拭子DNA長(zhǎng)達(dá)12個(gè)月,其獲得的DNA可用來完成各種基因檢測(cè)及分析實(shí)驗(yàn),如qPCR、NGS、SNP分析。為運(yùn)輸和存儲(chǔ)提供方便,并減低其成本。
使用方法:
1.取樣前清潔雙手,用清水漱口1-2次,去除口腔中的食物殘?jiān)?,咽盡口腔中剩余的清水。
2.撕開采樣棉簽外包裝。
3.將棉簽伸進(jìn)口腔內(nèi),在內(nèi)側(cè)頰粘膜處反復(fù)擦拭20次以上,至棉頭已經(jīng)被唾液充分浸潤(rùn)(應(yīng)無食物殘?jiān)犬愇镎掣?。
4.打開樣本采集管蓋,將采樣后的棉簽放入樣本采集管內(nèi),沿手柄上的折痕折斷手柄。
5.隨即蓋上樣本采集管,完成樣品取樣。
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本發(fā)明的特征在于:應(yīng)用本發(fā)明的血液基因組DNA提取方法在10分鐘內(nèi)提取血液基因組可用于熒光PCR擴(kuò)增檢測(cè),主要步驟如下。(1)將**管顛倒混勻后,吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子樣本保存液至,加入200μL的核酸釋放劑,渦旋混勻,然后5000g離心30s,棄上清,獲得細(xì)胞沉淀。(2)將步驟(1)中得到的血液細(xì)胞沉淀中再加入200μL核酸釋放劑,渦旋振蕩1min,至沉淀完全散開,然后5000g離心30s,棄上清。(口腔拭子樣本則無需進(jìn)行此步驟)。(3)向步驟(2)所獲得的沉淀中加入50μL核酸釋放劑,渦旋振蕩1~2min;室溫放置5min,12000g離心30s,取上清液即為提取的基因組DNA;所述的核酸釋放劑組成為20mM~80mM的氫氧化鈉溶液、~、~、~、~***鈉、~3%甲酰胺;所述熒光PCR反應(yīng)液組成為ROX、TaqMan探針、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及緩沖液。附圖說明圖1為實(shí)例1檢測(cè)的8份血液樣本平行實(shí)驗(yàn)的熒光擴(kuò)增曲線圖。圖2~圖5為實(shí)施例1提供的四份血液樣本的三次平行實(shí)驗(yàn)的熒光擴(kuò)增曲線圖。圖6為實(shí)施例2對(duì)比實(shí)例1提供的對(duì)8份血液樣本平行實(shí)驗(yàn)的熒光擴(kuò)增曲線圖。具體實(shí)施方式為了使本領(lǐng)域技術(shù)領(lǐng)域人員更好地理解本申請(qǐng)中的技術(shù)方案。這款口腔拭子主要用于提取采集人體口腔黏膜DNA用的,采集和釋放都比較好。江西海綿口腔拭子供應(yīng)商家
口腔拭子如果在使用的過程中出現(xiàn)過敏現(xiàn)象,請(qǐng)立即停止使用,嚴(yán)重時(shí)請(qǐng)及時(shí)就醫(yī)。遼寧海綿口腔拭子供應(yīng)商家
口腔拭子DNA提取介紹所述iCleanhcy的DNA口腔細(xì)胞的試劑盒允許從人口腔拭子的基因組DNA的快速和有效的純化。
DNA樣本準(zhǔn)備裂解液后,您可以在使用iCleanhcy不到15分鐘純化DNA技術(shù)。根據(jù)所使用的DNA純化試劑盒,可以使用液體處理機(jī)器人單獨(dú)或在自動(dòng)化系統(tǒng)中處理樣品。對(duì)于套件預(yù)期用途的iCleanhcy設(shè)計(jì)DNA口腔細(xì)胞試劑盒以允許從人頰細(xì)胞拭子或來自漱口水/或者唾液采集器手機(jī)人體唾液的沉淀細(xì)胞中分離以下量的基因組DNA。在加工前,樣品可以在4°C下儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)2周,而DNA產(chǎn)量或質(zhì)量沒有明顯損失,不會(huì)降解。純化的基因組DNA適用于下游應(yīng)用,例如PCR,芯片.iCleanhcy?的DNA歸口腔細(xì)胞培養(yǎng)基:在150微升的總體積在1-3毫微克/微升的濃度制作的基因組DNA的歸一化產(chǎn)率。
iCleanhcy的DNA口腔細(xì)胞培養(yǎng)基:純化的基因組DNA的6微克。重要提示:DNA產(chǎn)量各不相同,取決于幾個(gè)因素,包括服用拭子的人的技術(shù),供體是高還是低的脫落劑,以及使用的拭子類型。優(yōu)點(diǎn)使用iCleanhcy的DNA口腔細(xì)胞的試劑盒,分離基因組DNA提供了以下優(yōu)點(diǎn):使用基于磁珠的技術(shù)分離基因組DNA,無需使用危險(xiǎn)化學(xué)品,離心或真空歧管在樣品制備和裂解后不到15分鐘內(nèi)。 遼寧海綿口腔拭子供應(yīng)商家
深圳市華晨陽科技有限公司是一家有著雄厚實(shí)力背景、信譽(yù)可靠、勵(lì)精圖治、展望未來、有夢(mèng)想有目標(biāo),有組織有體系的公司,堅(jiān)持于帶領(lǐng)員工在未來的道路上大放光明,攜手共畫藍(lán)圖,在廣東省等地區(qū)的醫(yī)藥健康行業(yè)中積累了大批忠誠(chéng)的客戶粉絲源,也收獲了良好的用戶口碑,為公司的發(fā)展奠定的良好的行業(yè)基礎(chǔ),也希望未來公司能成為*****,努力為行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展奉獻(xiàn)出自己的一份力量,我們相信精益求精的工作態(tài)度和不斷的完善創(chuàng)新理念以及自強(qiáng)不息,斗志昂揚(yáng)的的企業(yè)精神將**深圳市華晨陽科技供應(yīng)和您一起攜手步入輝煌,共創(chuàng)佳績(jī),一直以來,公司貫徹執(zhí)行科學(xué)管理、創(chuàng)新發(fā)展、誠(chéng)實(shí)守信的方針,員工精誠(chéng)努力,協(xié)同奮取,以品質(zhì)、服務(wù)來贏得市場(chǎng),我們一直在路上!