芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品是什么?怎么做到單分子技術(shù)的低成本實(shí)現(xiàn)?參考原理:
分子水平的疾病檢測(cè)正在推動(dòng)早期診斷和治病的新興變革。該領(lǐng)域面臨的一個(gè)挑戰(zhàn)是,用于早期診斷的蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物可能存在于非常低的豐度中。傳統(tǒng)免疫分析技術(shù)的檢測(cè)下限為飛摩爾范圍(10?13M)。數(shù)字免疫分析技術(shù)將檢測(cè)靈敏度提高了三個(gè)數(shù)量級(jí),達(dá)到了飛摩爾范圍(10?16M)。這一能力有可能在診斷和治病領(lǐng)域開(kāi)辟新的進(jìn)展,但這些技術(shù)已被限制為不適合高效常規(guī)使用的手動(dòng)程序。我們描述了一種新的實(shí)驗(yàn)室儀器,該儀器能夠完全自動(dòng)化單分子陣列(Simoa)技術(shù)進(jìn)行數(shù)字免疫分析。該儀器具有單分子靈敏度和多重檢測(cè),具有快速周轉(zhuǎn)時(shí)間和每小時(shí)處理66個(gè)樣本的能力。針對(duì)心血管、腫標(biāo)、傳染病、神經(jīng)學(xué)和炎癥研究中的16種感興趣的蛋白質(zhì),開(kāi)發(fā)了單分子和多重?cái)?shù)字免疫分析方法。與傳統(tǒng)方法相比,Simoa免疫分析方法的平均靈敏度提高了lELISAwas>1200倍,變異系數(shù)為<10%。數(shù)字免疫分析在推進(jìn)人類診斷方面具有潛力,這在兩個(gè)臨床領(lǐng)域得到了體現(xiàn):創(chuàng)傷性腦損傷和傳染病的早期檢測(cè) 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,極速檢測(cè),快15min就能完成的單分子免疫檢測(cè)!芯棄疾單分子數(shù)字ELISA極速檢測(cè)
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)
人類形式的蛋白質(zhì)被加入到25%牛血清中以代替臨床測(cè)試樣本;通常使用四倍稀釋因子以減少免疫測(cè)定中的基質(zhì)效應(yīng)4。使用數(shù)字ELISA檢測(cè)25%血清中的PSA,從該實(shí)驗(yàn)中確定了LOD為~50aM(1.5fg/mL),相當(dāng)于整個(gè)血清中的LOD為~200aM(6fg/mL)。檢測(cè)到的比較低濃度為250aM,相當(dāng)于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通過(guò)外推背景濃度來(lái)確定的加上背景的三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差,不同運(yùn)行的LOD取決于背景的CV。在具有典型背景方差的幾個(gè)實(shí)驗(yàn)中,全血清PSA的亞飛摩爾LOD得以保持。相比之下,一種前列的商業(yè)PSA檢測(cè)方法(ADVIACentaur,西門子)報(bào)告在人血清中的LOD為3pM(0.1ng/mL),并且已經(jīng)報(bào)道了LOD在10-30fM17,26。 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室數(shù)字ELISA芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測(cè)產(chǎn)品,每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都能用的單分子檢測(cè);
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA高敏檢測(cè)產(chǎn)品;具有以下特點(diǎn):多重、超敏微量、極速靈活、開(kāi)放;
只有少量分泌蛋白可測(cè)量的可能性突顯了蛋白質(zhì)測(cè)量領(lǐng)域面臨的挑戰(zhàn):醫(yī)學(xué)上相關(guān)的生物標(biāo)志物可能存在于非常低的豐度中。免疫測(cè)定仍然是是蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物敏感和特異性測(cè)量的基礎(chǔ)。然而,傳統(tǒng)的免疫分析技術(shù)在檢測(cè)不可測(cè)量的生物標(biāo)志物時(shí)靈敏度不足,這些生物標(biāo)志物肯定位于當(dāng)前可檢測(cè)范圍之下。主流的傳統(tǒng)免疫分析方法——包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、化學(xué)發(fā)光和電化學(xué)發(fā)光——的靈敏度下限約為10^-13M(~<0.1pM)。許多降低靈敏度的方法已被描述,包括拉曼增強(qiáng)信號(hào)檢測(cè)、電感耦合等離子體質(zhì)譜,但這些方法的數(shù)據(jù)表明其成功有限。非常規(guī)方法如亞飛摩爾級(jí)檢測(cè)具有明顯的權(quán)衡,例如程序較長(zhǎng)或無(wú)法提供定量答案。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測(cè)SiMoA通過(guò)將單個(gè)酶產(chǎn)生的熒光團(tuán)限制在極小范圍內(nèi),從而能夠檢測(cè)到非常低濃度的酶標(biāo)記物體積(~50fL),導(dǎo)致熒光產(chǎn)物分子的局部高濃度。為了在免疫測(cè)定中實(shí)現(xiàn)這種定位,在第二步中,將珠子加載到一個(gè)陣列為離散的微升大小的孔(圖1C)。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個(gè)孔,孔徑為μm,孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下,用橡膠密封圈密封。Rissin等人,第3頁(yè)將每個(gè)微球隔離在飛升反應(yīng)室中。具有單一酶的微球標(biāo)記的免疫復(fù)合物在50飛升的反應(yīng)室中產(chǎn)生局部高濃度的熒光產(chǎn)物(圖1D)。通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)獲取陣列的時(shí)間變化熒光圖像,可以區(qū)分與單一酶分子相關(guān)的微球(“開(kāi)啟”孔)和不與酶相關(guān)的微球(“關(guān)閉”孔);補(bǔ)充圖1顯示了“開(kāi)啟”和“關(guān)閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬(wàn)的單個(gè)免疫復(fù)合物同時(shí)檢測(cè)。通過(guò)測(cè)定供試品中的蛋白質(zhì)濃度來(lái)確定計(jì)算含有珠子和熒光產(chǎn)物的孔數(shù)相對(duì)于含有珠子的孔數(shù)(圖1D)。使用SiMoA,濃度是因此,我們稱SiMoA應(yīng)用于檢測(cè)單個(gè)免疫復(fù)合物為數(shù)字ELISA。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,微量多重檢測(cè),微量樣本就能同時(shí)測(cè)試4項(xiàng)指標(biāo);
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA
我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測(cè)產(chǎn)品應(yīng)用場(chǎng)景:適合生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、科研市場(chǎng)、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開(kāi)發(fā)、ELISA檢測(cè)、動(dòng)物病情檢測(cè)等各種應(yīng)用場(chǎng)景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測(cè),可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。
光纖束購(gòu)自SchottNorthAmericaouthbri,非增強(qiáng)型光澤硅片購(gòu)自SpecialtyManufacturing(Saginaw,NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人,第7頁(yè)鹽酸、無(wú)水乙醇和分子生物學(xué)級(jí)別的吐溫-20均購(gòu)自西格瑪-奧德里奇(圣路易斯,密蘇里州)。2.7-μm-二羧基磁珠購(gòu)自瓦里安公司(加利福尼亞州萊克福斯特)。單克隆抗人TNF-α捕獲抗體、多克隆抗人TNF-α檢測(cè)試劑和重組人TNF-α均購(gòu)自R&DSystems(Minneapolis,MN)。單克隆抗PSA捕獲抗體、單克隆抗PSA檢測(cè)試劑和純化的PSA購(gòu)自BiosPacific(埃默里維爾,加利福尼亞州);使用標(biāo)準(zhǔn)方法將檢測(cè)試劑抗體生物素化。1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基磺基琥珀酰亞胺(NHS)和SuperBlock®T-20封閉緩沖液購(gòu)自ThermoScientific(Rockford,IL)。純化DNA購(gòu)自綜合DNA技術(shù)公司(Coralville,IA)。 芯棄疾JX-8B簡(jiǎn)易版單分子ELISA檢測(cè)產(chǎn)品, 極速檢測(cè),快至15min能完成 的ELISA檢測(cè)!飛克級(jí)數(shù)字ELISA芯片
芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測(cè)產(chǎn)品,10ul樣本可同時(shí)測(cè)2-4個(gè)指標(biāo)!芯棄疾單分子數(shù)字ELISA極速檢測(cè)
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測(cè),可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測(cè)產(chǎn)品。蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物在區(qū)分健康和疾病狀態(tài)方面的臨床應(yīng)用,而監(jiān)測(cè)疾病進(jìn)展則需要測(cè)量復(fù)雜樣品中的低濃度蛋白質(zhì)。目前的免疫測(cè)定方法測(cè)量的是蛋白質(zhì)的濃度高于10?12M,6而大多數(shù)在病癥7、神經(jīng)疾病8,9和接觸早期階段10中重要的蛋白質(zhì)的濃度被認(rèn)為在10?16到10?12M之間。需要提高靈敏度的例子包括:一個(gè)由一百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞組成的1毫米3疾病,每個(gè)細(xì)胞分泌5000種蛋白質(zhì)到5升液體中。Simoa®由現(xiàn)任于哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院的DavidWalt教授作為科學(xué)創(chuàng)始人于2007年創(chuàng)立。DavidWalt是美國(guó)的工程院,藝術(shù)院和醫(yī)學(xué)院三院院士。2010年,DavidWalt將Simoa®技術(shù)以封面文章的形式發(fā)表在《NatureBiotechnology》上,此技術(shù)開(kāi)始為大眾所知并引起業(yè)界轟動(dòng)。Simoa技術(shù)(Single-moleculeArray,Quanterix公司)特點(diǎn)是通用陣列化檢測(cè),實(shí)現(xiàn)超高的靈敏度,較傳統(tǒng)ELISA方法能夠高出3個(gè)數(shù)量級(jí),達(dá)到飛克級(jí)別(fg/ml)甚至更低。已拿阿茲海默癥的兩個(gè)FDAbreakthroughdevice;通常用于各種科研方向:神經(jīng)因子、蛋白組學(xué)、細(xì)胞因子等。 芯棄疾單分子數(shù)字ELISA極速檢測(cè)