創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物在區(qū)分健康和疾病狀態(tài)方面的臨床應(yīng)用,而監(jiān)測疾病進(jìn)展則需要測量復(fù)雜樣品中的低濃度蛋白質(zhì)。目前的免疫測定方法測量的是蛋白質(zhì)的濃度高于10?12M,6而大多數(shù)在病癥7、神經(jīng)疾病8,9和接觸早期階段10中重要的蛋白質(zhì)的濃度被認(rèn)為在10?16到10?12M之間。需要提高靈敏度的例子包括:一個由一百萬個細(xì)胞組成的1毫米3疾病,每個細(xì)胞分泌5000種蛋白質(zhì)到5升液體中。Simoa®由現(xiàn)任于哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院的DavidWalt教授作為科學(xué)創(chuàng)始人于2007年創(chuàng)立。DavidWalt是美國的工程院,藝術(shù)院和醫(yī)學(xué)院三院院士。2010年,DavidWalt將Simoa®技術(shù)以封面文章的形式發(fā)表在《NatureBiotechnology》上,此技術(shù)開始為大眾所知并引起業(yè)界轟動。Simoa技術(shù)(Single-moleculeArray,Quanterix公司)特點(diǎn)是通用陣列化檢測,實(shí)現(xiàn)超高的靈敏度,較傳統(tǒng)ELISA方法能夠高出3個數(shù)量級,達(dá)到飛克級別(fg/ml)甚至更低。已拿阿茲海默癥的兩個FDAbreakthroughdevice;通常用于各種科研方向:神經(jīng)因子、蛋白組學(xué)、細(xì)胞因子等。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,每個生物實(shí)驗(yàn)室都能用的單分子檢測;POCT數(shù)字ELISA快速檢測
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測
從TNF-α數(shù)字ELISA測定的檢測限為~150aM(2.5fg/mL),相當(dāng)于全血中的~600aM(10fg/mL);市場上可用的ELISA對TNF-α的比較高靈敏度在血清中的LOD為21fM(0.34pg/mL)(補(bǔ)充圖3)。兩種方法的目標(biāo)蛋白零濃度尖峰均為為這些實(shí)驗(yàn)提供有用的陰性對照:25%的血清含有多種蛋白質(zhì)的微摩爾濃度,在這些高蛋白質(zhì)背景之上可以檢測到非常低濃度的目標(biāo)蛋白。我們還開發(fā)了一個證明用于顯示低濃度核酸可以檢測到的DNA的主要數(shù)字分析方法,而無需復(fù)制目標(biāo)
POCT數(shù)字ELISA快速檢測芯棄疾單分子ELISA檢測盒,微量極速檢測,微量檢測15min就完成檢測!
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每個生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測
珠子以兩種不同的方式讀出。首先,在與100μMresorufin-阝-D孵育1小時后,用熒光板讀出器以100μL方式讀出珠子結(jié)合-半乳糖苷(RGP),一種熒光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板閱讀器上,檢測限為15fMofS阝G(圖2)。其次,將珠子加載然后將RGP溶液密封到陣列的孔中,單個酶的信號被允許在反應(yīng)室中積累,并每30秒獲取一次熒光圖像。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時獲取陣列的白光圖像以識別含有珠子的孔(含有珠子的孔散射光與空井不同)。熒光圖像用于確定哪些微球具有相關(guān)的結(jié)合酶(從時間變化的熒光圖像中強(qiáng)度增加)。圖2顯示了微球中含酶的比例與總體S阝G濃度的關(guān)系的對數(shù)-對數(shù)圖。檢測到的比較低酶偶聯(lián)物濃度為350飛摩爾(zM),并通過外推信號等于的酶濃度計(jì)算得出的檢測限(LOD)。
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,應(yīng)用場景:適合生物實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物疫病檢測等各種應(yīng)用場景;參考原理:血液中單個蛋白質(zhì)分子的檢測有助于識別許多新的診斷性蛋白質(zhì)標(biāo)記物。我們報告了一種同時檢測數(shù)百至數(shù)千個單獨(dú)蛋白質(zhì)分子的方法,該方法能夠檢測到非常低濃度的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)被捕獲在顯微珠上,并用酶標(biāo)記,每個顯微珠上有一個或零個酶標(biāo)記的蛋白質(zhì)。通過將這些顯微珠分離成50飛米的陣列反應(yīng)室,單個蛋白質(zhì)可以通過熒光想象檢測到。通過單化這些陣列中的分子,~10-20種酶可以在100μL(~10?19M)中檢測到。單個基于酶標(biāo)記的分子酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(數(shù)字ELISA)能夠檢測血清中臨床相關(guān)的蛋白質(zhì),其濃度(<10?15M)遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)ELISA3-5。數(shù)字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除術(shù)的患者血清中檢測到前列腺特異性抗原,比較低至14fmol/mL(0.4fmol)。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,超敏檢測,低可測試到亞皮克級;
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每個生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測
為了證明檢測極低濃度的可能診斷價值使用數(shù)字ELISA檢測血液中的蛋白質(zhì),對接受治理性前列腺切除術(shù)(RP)的患者血清樣本中的PSA進(jìn)行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標(biāo)志物病癥既用作篩查工具,也用于監(jiān)測住院患者的復(fù)發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后,絕大多數(shù)PSA被消除,水平低于標(biāo)準(zhǔn)商用檢測方法的檢測限(3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測這些患者的PSA恢復(fù)情況可以檢測前列腺病的復(fù)發(fā),但術(shù)后幾年內(nèi)生化復(fù)發(fā)可能不會被發(fā)現(xiàn)。 芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品,每個醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都能用的單分子檢測;哪些是數(shù)字ELISA超敏檢測
數(shù)字化高敏ELISA芯片,可以進(jìn)行8孔、4孔的靈活檢測。POCT數(shù)字ELISA快速檢測
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品
每個生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測
人類形式的蛋白質(zhì)被加入到25%牛血清中以代替臨床測試樣本;通常使用四倍稀釋因子以減少免疫測定中的基質(zhì)效應(yīng)4。使用數(shù)字ELISA檢測25%血清中的PSA,從該實(shí)驗(yàn)中確定了LOD為~50aM(1.5fg/mL),相當(dāng)于整個血清中的LOD為~200aM(6fg/mL)。檢測到的比較低濃度為250aM,相當(dāng)于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通過外推背景濃度來確定的加上背景的三個標(biāo)準(zhǔn)差,不同運(yùn)行的LOD取決于背景的CV。在具有典型背景方差的幾個實(shí)驗(yàn)中,全血清PSA的亞飛摩爾LOD得以保持。相比之下,一種前列的商業(yè)PSA檢測方法(ADVIACentaur,西門子)報告在人血清中的LOD為3pM(0.1ng/mL),并且已經(jīng)報道了LOD在10-30fM17,26。 POCT數(shù)字ELISA快速檢測