數(shù)字PCR(dPCR)是近年來引起重視并迅速發(fā)展起來的一種突破性的核酸定量分析技術。該技術先將核酸模板進行稀釋,分配到大量 的反應單元中,使每個反應單元中只有單個模板分子,然后進行PCR擴增反應,擴增結束后對每個反應室的熒光信號進行統(tǒng)計學分析,來定量DNA拷貝數(shù)。數(shù)字PCR采用先擴增后定量,因此不依賴擴增曲線的循環(huán)閾值(Ct),也無需采用內(nèi)參基因和標準曲線,準確度高、重現(xiàn)性好,可以實現(xiàn)***定量分析。由于其獨特的技術優(yōu)勢,已經(jīng)在臨床診斷、轉基因成分定量、單細胞基因表達分析、環(huán)境微生物檢測和下一代測序等研究領域顯示出巨大的優(yōu)勢和應用前景。單張芯片一次可處理8個樣本。天津分析數(shù)字PCR定制

研究方向甲基化含量鑒定作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析，現(xiàn)階段有不同的方法或技術來進行研究：如傳統(tǒng)的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序統(tǒng)計法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等。這些方法皆因方法學的問題而不能獲得精確的定量，而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過對樣品的微滴化處理及目標因子的***拷貝數(shù)定量，為甲基化程度的精確定量檢測提供了一種全新 的技術。*****的伴隨診斷常用體液來源(如血液，胸腹水，唾液及尿液等)的待檢標本中的DNA，有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源，前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾，實現(xiàn)**標記物的有效檢測，如EGFR，ALK，ROS1，KRAS、BRAF等基因的突變檢測、乳腺*/胃*的HER2基因擴增檢測等，應用于**精細醫(yī)學的伴隨診斷。陜西重量輕數(shù)字PCR價格國內(nèi)擁有完全自主知識產(chǎn)權的微滴式數(shù)字PCR儀。

個體化診療通過檢測T790M位點突變情況，可以更好地評估一代TKI***的療效及耐藥情況并指導第三代TKI靶向藥Osimertinib的使用。然而，由于qPCR平臺ARMS檢測技術的靈敏度有限，沒有辦法在含大量EGFR基因野生型背景核酸中高效準確的檢測到T790M突變。這個時候dPCR技 術展現(xiàn)出了 的檢測精度，此外，dPCR***定量的優(yōu)勢也能充分發(fā)揮出來了，可以監(jiān)控突變含量變化，做到及早發(fā)現(xiàn)耐藥。2.）基因表達分析伊馬替尼（Imatinib）可以有效幫助很多慢性髓細胞白血?。–ML）患者延長生存期，但是臨床上發(fā)現(xiàn)，伊馬替尼的療效與BCR-ABL1融合基因的轉錄產(chǎn)物表達量有很大的關系。研究人員采用dPCR對CML患者的BCR-ABL1融合基因轉錄產(chǎn)物進行測定，結果檢測下限可以達到0.001%，顯示出dPCR在痕量核酸檢測方面比qPCR具有無可比擬的優(yōu)勢

數(shù)字PCR為juedui定量，qPCR為相對定量，數(shù)字PCR較qPCR更精細、更靈敏。所以說，未來數(shù)字PCR將成為qPCR的重要補充，在部分領域逐步替代熒光定量PCR。未來這些領域將廣泛應用到數(shù)字PCR：科研：高校（生命科學學院、環(huán)境學院、醫(yī)學院、藥學院）等。醫(yī)院：病理科、血液科、婦產(chǎn)科、心血管科、檢驗科、轉化醫(yī)學中心：研究院單位、疾控中心、海關（出入境檢驗檢疫）、質監(jiān)局、環(huán)境/環(huán)保局等。企業(yè)：第三方檢測機構、IVD(分子體外診斷試劑)、生物制藥等。浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR，期待為您服務！

數(shù)字PCR檢測及分析原理在上世紀90年代就被提出來了，但是無奈受限于當時的技術條件，樣本稀釋及分配都是靠手工來完成的，受到很多因素的干擾和限制；并且結果分析對于研究者來說也十分枯燥與繁瑣，因此在很長一段時間dPCR發(fā)展停滯不前。后來由于微流控技術與微納集成制造工藝的發(fā)展解決了dPCR過程中的幾個關鍵技術問題，推動了dPCR的研究與商業(yè)化的發(fā)展。目前根據(jù)dPCR樣本稀釋分配的方式，基本可分為三大類，一種是基于大規(guī)模集成微流控芯片；第二種是使用微反應室/孔板；第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式，其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或者微滴當中，每個反應器的核酸模板數(shù)少于1或者等于1。經(jīng)過PCR擴增之后，有一個核酸分子的模板的反應器就會給出熒光信號，沒有模板的反應器沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應器的體積，可以推算出原始溶液的核酸濃度。浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR，有需求可以來電數(shù)字PCR！天津分析數(shù)字PCR定制

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CNV（CopyNumberVariations，拷貝數(shù)變異）研究需要極高的定量精度以區(qū)別不同拷貝數(shù)之間的微小差異，測序方法適用于高于30%的變異率檢測，而qPCR的比較**辨在1.5倍左右，數(shù)字PCR通過直接計數(shù)目標基因與參照基因(拷貝數(shù)為1的基因，例如RNaseP)的數(shù)目， 計算比值，直接得到目標基因的拷貝數(shù)可以達到極高的拷貝數(shù)分辨精度。除此之外，dPCR在病原微生物檢測、microRNA研究、基因表達研究、NGS測序文庫的***定量、表觀遺傳學直接相關的DNA甲基化定量檢測、ChIP定量鑒定等領域的應用都令人極為期待，而在轉基因成分鑒定、分子標準品精確定量、環(huán)境樣本檢測等具體的應用方向上，已經(jīng)有大量實驗數(shù)據(jù)和結果證明了dPCR技術的優(yōu)良性能。天津分析數(shù)字PCR定制

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