數(shù)字PCR也叫DigitalPCR（dPCR），是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說，數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值，不受擴(kuò)增效率的影響，能夠直接讀出DNA的分子個數(shù)，能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個樣本分成幾十到幾萬份，然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中，使每個微滴單元包含一個或多個拷貝的核酸分子（即DNA模板），每個單元都會對目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增，然后再對每個單元進(jìn)行熒光信號的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對而言，傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中，這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。數(shù)字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，用戶的信賴之選，歡迎您的來電哦！北京流式數(shù)字PCR

二代測序輔助建庫目前靶向測序建庫方法包括擴(kuò)增子方法，在均相溶液中，當(dāng)擴(kuò)增引物增加時，由于擴(kuò)增引物之間的相互作用，從而影響擴(kuò)增的效率;如果將其分散到大量微液滴中擴(kuò)增，將可降低引物間相互作用，提高擴(kuò)增效率。同時還可以實(shí)現(xiàn)對于少量模板的有效擴(kuò)增，得到更多的有效測序數(shù)據(jù)。CRISPR-Cas9基因編輯結(jié)果驗(yàn)證CRISPR-Cas9技術(shù)的發(fā)明，是基因編輯技術(shù)的一大突破，但如何驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)是否成功，仍需要高靈敏度的檢測方法，數(shù)字PCR技術(shù)可以滿足這一需求。Broad研究所張鋒團(tuán)隊(duì)發(fā)明了以CRISPR為基礎(chǔ)的SHERLOCK技術(shù)可以對核酸進(jìn)行高靈敏度的定性檢測，但精確定量評估時仍采取了數(shù)字PCR進(jìn)行確認(rèn)。北京流式數(shù)字PCR報價數(shù)字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，讓您滿意，歡迎您的來電！

我國***擁有完全自主知識產(chǎn)權(quán)的微滴式數(shù)字PCR儀MiniDrop?研發(fā)成功并投入生產(chǎn)。這是國內(nèi)***微滴式數(shù)字PCR檢測系統(tǒng)，能廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、環(huán)境等領(lǐng)域，未來，采用外周血、唾液、尿液、腦脊液等樣本進(jìn)行低成本、高靈敏、快速的無創(chuàng)檢測成為可能。MiniDrop?數(shù)字PCR儀由Creator微滴生成儀、Detector微滴檢測儀、MDMicrochip微流控芯片及MDPlotter數(shù)據(jù)分析軟件組成，該系統(tǒng)的**為微 流控微滴生成技術(shù)，采用原創(chuàng)性的油液，在40um微管道中利用氣壓驅(qū)動在2分鐘內(nèi)生成50萬微滴，單次運(yùn)行生成400萬微滴，微滴體積達(dá)皮升級，檢測線性范圍達(dá)到5個數(shù)量級，各項(xiàng)指標(biāo)均超越國內(nèi)外主流產(chǎn)品。

目前數(shù)字PCR技術(shù)在臨床領(lǐng)域已經(jīng)有著非常***且***地應(yīng)用，例如在病原微生物檢測中的應(yīng)用：HBV檢測、HIV檢測、甲型流感病毒檢測等；在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用：13/18/21號染色體三倍體檢測、遺傳性耳聾檢測、地中海貧血檢測及優(yōu)生五項(xiàng)的病毒檢測等；在**靶向***相關(guān)基因檢 測中的應(yīng)用：肺*EGFR基因突變、ALK基因融合檢測、結(jié)直腸*KRAS、BRAF基因突變檢測、乳腺*HER2基因擴(kuò)增檢測、神經(jīng)膠質(zhì)瘤IDH基因突變檢測等。以**靶向***相關(guān)基因檢測為例，在**形成的超早期,會出現(xiàn)**細(xì)胞的壞死和凋亡,這些凋亡或壞死的**細(xì)胞會釋放其DNA進(jìn)入外周血,因此通過分析循環(huán)血液中是否含有**特異的游離DNA就可以達(dá)到**早期篩查的目的。然而此時DNA含量極低,對檢測的靈敏度和精確性要求極高，目前只有數(shù)字PCR技術(shù)可以檢測出來。另外進(jìn)行個體化***時,需要對基因組樣本進(jìn)行分析,此時利用數(shù)字PCR技術(shù)也能**提高結(jié)果的可信性,進(jìn)而建立合理***方案。數(shù)字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，用戶的信賴之選，歡迎新老客戶來電！

同時，從公式也可以看出，隨著反應(yīng)陽性體系數(shù)（X）的增加，體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)相對于X會有較大的差距，隨著X的持續(xù)增加，數(shù)字PCR結(jié)果的不確定度也隨著提高，總體來說，數(shù)字PCR陽性體系的數(shù)量不得超過總體系數(shù)量的80%。另一個方面，N的增加會使整個數(shù)字PCR體系具有較大的線性范圍，并可以提高反應(yīng)的靈敏度、穩(wěn)定性以及可重復(fù)性。因此，目前dPCR都需要在成本可控的情況下，增加分配的腔室數(shù)和液滴數(shù)。商業(yè)化dPCR平臺及其特點(diǎn)發(fā)展到現(xiàn)在，市面上常見的dPCR主要有兩種：微滴式dPCR（dropletdPCR，ddPCR）和芯片式dPCR（chipdPCR，cdPCR）技術(shù)。由于芯片式dPCR制造芯片的成本較高，目前微滴式dPCR正越來越受到企業(yè)的認(rèn)可。數(shù)字PCR ，就選浚和(上海)儀器科技有限公司，有需求可以來電咨詢！北京流式數(shù)字PCR

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數(shù)字PCR檢測及分析原理在上世紀(jì)90年代就被提出來了，但是無奈受限于當(dāng)時的技術(shù)條件，樣本稀釋及分配都是靠手工來完成的，受到很多因素的干擾和限制；并且結(jié)果分析對于研究者來說也十分枯燥與繁瑣，因此在很長一段時間dPCR發(fā)展停滯不前。后來由于微流控技術(shù)與微納集成制造工藝的發(fā)展解決了dPCR過程中的幾個關(guān)鍵技術(shù)問題，推動了dPCR的研究與商業(yè)化的發(fā)展。目前根據(jù)dPCR樣本稀釋分配的方式，基本可分為三大類，一種是基于大規(guī)模集成微流控芯片；第二種是使用微反應(yīng)室/孔板；第三種是微滴式。但不論是走芯片式還是微滴式，其基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或者微滴當(dāng)中，每個反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于1或者等于1。經(jīng)過PCR擴(kuò)增之后，有一個核酸分子的模板的反應(yīng)器就會給出熒光信號，沒有模板的反應(yīng)器沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應(yīng)器的體積，可以推算出原始溶液的核酸濃度。北京流式數(shù)字PCR