目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法，但這些方法混有非常多的雜質，必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩(wěn)定，不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機、無法進行多樣品分析等問題。因此外泌體研究相對困難，需要盡快開發(fā)操作簡單、可提取高純度外泌體的技術。因此，日本和光著眼于巨噬細胞的外泌體受體Tim4蛋白，制備Tim4細胞外域與磁珠結合的“Tim4磁珠”。Tim4通過磷酯酰絲氨酸（PS）法特異性結合Tim4蛋白和磁珠，再經(jīng)過含有EDTA的洗脫緩沖液進行分離，提取高純度的完整外泌體。外泌體被認為是疾病的生物標志物和預后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義。外泌體的標志蛋白

中流細胞分泌的外泌體可以通過體液進入特定qi官，建立有利于ai細胞生長的微環(huán)境，包括促進受體細胞上皮細胞-間充質轉化、引發(fā)炎癥、促進血管生成，為ai細胞的擴散形成有利條件。進一步研究發(fā)現(xiàn)中流細胞外泌體能夠引導ai癥轉移至特定qi官，在膜表面特異性整合素的作用下，中流細胞外泌體首先在特定的qi官累積，引起受體qi官產(chǎn)生炎癥、生成血管，形成有利于中流轉移的微環(huán)境，使得中流細胞更容易轉移至該qi官。Maji等揭示了惡性中流細胞外泌體中的AnnexinⅡ蛋白能夠促進血管生成，為中流轉移創(chuàng)造有利的微環(huán)境。鼻腔灌洗液外泌體iTRAQ外泌體觀察到它們可以在體內刺激免疫應答。

外泌體即細胞分泌的直徑約40-100nm的微小膜泡，多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。一開始被當做細胞排泄物，但是近幾年，研究發(fā)現(xiàn)外泌體可謂是小身體大作用。種瘤發(fā)生轉移后，如何靶向呈遞藥物一直是種瘤醫(yī)治中的一個巨大挑戰(zhàn)。發(fā)表于NanoLett的一項研究中，研究人員利用外泌體制備藥物的遞送系統(tǒng)（LD-MDS），并取得成功。在這項研究中，研究人員將相關藥物錨定在活巨噬細胞膜上，細胞自身相關蛋白酶響應開啟并將藥物轉載進入外泌體，順利遞送至肺轉移灶并且轉化為納米囊泡和次級納米囊泡，促進轉移性4T1病細胞的有效內化和細胞死亡。之后，受損的4T1病細胞可以釋放次級納米囊泡和游離藥物分子，再破壞鄰近的病細胞。研究顯示，LD-MDS對體內直徑小于100μm的肺轉移病灶顯示出優(yōu)異的靶向效率，并顯著壓制肺轉移。

外泌體可以由體內或體外培養(yǎng)的幾乎所有類型的細胞分泌,并廣fan存在于血漿、膽汁、尿液、母乳、唾液、胸腔積液、淋巴、胃酸、支氣管肺泡灌洗液、腦脊液、眼淚、滑膜液、羊水、腹水、鼻分泌物和子宮抽吸物液體等體液中。目前,基于不同的分離原理,研究者建立了五種主要的提取純化技術,分別為基于質量密度的超速離心技術、基于粒徑大小的分離技術、基于溶解性質的聚合物沉淀技術、基于免疫親和原理的分離技術和基于流體性質的微流控技術。泌體是細胞內源性的小囊泡，由大多數(shù)細胞分泌。

外泌體基礎醫(yī)學和臨床應用的探索和深入研究對如何準確及高純度提取外泌體,并完整保存提出了更高的技術要求。外泌體可通過差速超速離心在不同離心力下沉淀樣品中不同的雜質組分,并在100000×g~200000×g的轉速下獲取較純的外泌體。差速超速離心技術被認為是外泌體分離的“金標準”,也是目前常用的外泌體分離和濃縮方法。該方法可通過結合0.22μm或0.45μm孔徑濾膜進行超濾來提高產(chǎn)物純度減少外泌體的聚集,其分離效率容易受到加速度、轉子類型、旋轉半徑、沉降路徑長度以及樣品黏度等多種因素影響。突狀細胞釋放的外泌體可以強化殺傷性T細胞對癥狀細胞的特異性反應。腦脊液外泌體脂質組學

關于外泌體相關的實驗技術，關于需要改進的課題存在很多。外泌體的標志蛋白

利用抗ai癥藥物進行中流zhiliao是抑制中流的一個重要方法，不過目前抗ai癥藥物的運載存在著種種挑戰(zhàn)，主要體現(xiàn)在以下幾點:(1)抗ai癥藥物的疏水性;(2)抗ai癥藥物的毒性以及非靶向性;(3)易被人體清chu，體內循環(huán)的半衰期很短等。采用外泌體運輸抗ai癥藥物，可以提高藥物體系的水溶性，降低藥物對人體的毒性以及避免被網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)捕捉從而延長其循環(huán)時間。近期，兩種抗ai癥藥物———紫杉醇(PTX)和阿霉素(DOX)已經(jīng)成功被載入外泌體中，并對其抗中流作用進行了研究。外泌體的標志蛋白