與干細(xì)胞不同的是:干細(xì)胞外泌體對受損的微環(huán)境不響應(yīng),但它可以通過改變細(xì)胞外基質(zhì),改變受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組,來調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡,生長,增殖和分化途徑。因此,干細(xì)胞外泌體具有減少細(xì)胞凋亡、減輕炎癥反應(yīng)、促進(jìn)血管生成、抑制纖維化、提高組織修復(fù)潛力等重要生物學(xué)功能,在調(diào)控組織再生方面存在良好的臨床應(yīng)用前景。干細(xì)胞外泌體的優(yōu)點,體積小:納米級粒子,大小約為細(xì)胞的1/200,因此能很好地被人體所利用。免疫反應(yīng)程度低:外泌體不是細(xì)胞,只作為載具,外膜的表層上呈現(xiàn)較少的抗原,免疫系統(tǒng)難識別,對人體影響小??纱┩秆X障壁:體積小加上脂質(zhì)外膜的特性,使其可以通過血腦障壁,抵達(dá)腦部組織。外泌體提純方法中,超速離心法和聚合物沉淀法(市售試劑盒)混入多種雜質(zhì)。北京CD63外泌體慢病毒
外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤血管的形成和轉(zhuǎn)移。外泌體(Exosome)能將自身的細(xì)胞因子IL-8和VEGF釋放到細(xì)胞外,作用于內(nèi)皮細(xì)胞膜表面受體,導(dǎo)致瘤血管快速形成并較終通過發(fā)生EMT過程促進(jìn)瘤的遷移。瘤細(xì)胞來源的外泌體(Exosome)中含有血管生長素、血管內(nèi)皮生長因子等,這些細(xì)胞因子以不同的作用方式促進(jìn)瘤血管的形成,如VEGF通過喚醒磷酸酯酶C和第二信使的形成,誘導(dǎo)纖維蛋白溶解酶原活化物的表達(dá),使得基底膜降解,從而促進(jìn)瘤細(xì)胞的遷移。北京CD63外泌體慢病毒外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙,快速直達(dá)基底層起效。
外泌體介導(dǎo)中流耐藥性:中流細(xì)胞來源的外泌體中某些miRNAs和non-codingRNAs(lncRNA)的變化在中流化療抗藥性的發(fā)生中起重要作用。Qu等研究發(fā)現(xiàn)lncRNA可以通過競爭性結(jié)合miR-34/miR-449,促進(jìn)晚期腎細(xì)胞ai細(xì)胞中的跨膜受體酪氨酸激酶anexelekto(AXL)和tyrosine[1]proteinkinaseMet(c-MET)表達(dá),引發(fā)舒尼替尼耐藥。而外泌體能夠?qū)⑦@一lncRNA運輸至舒尼替尼敏感的ai細(xì)胞,從而傳播舒尼替尼的抗性。外泌體中的miR21能夠抑制卵巢ai細(xì)胞凋亡,并通過結(jié)合肌動蛋白絲相關(guān)蛋白凋亡酶激huo因子(apoptoticproteaseactivatingfactor1,APAF1)使得卵巢ai細(xì)胞產(chǎn)生對紫杉醇的抗藥性。
外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時發(fā)現(xiàn),外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,還有研究表明,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn),NY-ESO-1是單獨對低生存率有顯著影響的標(biāo)志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào),進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者,高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān)。目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法。
外泌體能攜帶多種生物活性分子循環(huán)于血液/體液中并介導(dǎo)長距離的細(xì)胞間通訊,中流來源外泌體富含的蛋白質(zhì)、核苷酸、脂質(zhì)等分子能夠反映其來源細(xì)胞的生理及病理狀態(tài),外泌體特殊的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)能保護(hù)其內(nèi)RNA等分子免于降解,因此,檢測中流外泌體成為液體活檢一個明顯優(yōu)勢。臨床試驗研究表明,外泌體在多種疾病的早期診斷、療效和預(yù)后監(jiān)測等方面都具備較好的應(yīng)用價值,正逐漸成為臨床診療中新的、理想的生物標(biāo)志物和可能的靶向藥物載體。隨著技術(shù)的進(jìn)步,組學(xué)時代的到來,大規(guī)模蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)被聯(lián)合應(yīng)用于篩選和揭示多種ai癥細(xì)胞外囊泡的標(biāo)志物。外泌體被認(rèn)為是疾病的生物標(biāo)志物和預(yù)后因子,具有重要的臨床診斷和治理意義。廣州外泌體脂質(zhì)組學(xué)
建立記錄各論文實驗條件的數(shù)據(jù)庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一。北京CD63外泌體慢病毒
妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng),參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控,在正常妊娠過程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥,如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生,很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括:多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過濾離心等方法。其中,多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法,該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來,然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體,還包括許多其他種類細(xì)胞釋放的外泌體,如樹突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等,且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中,這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化。北京CD63外泌體慢病毒