雖然外泌體在疾病的診斷上有天然優(yōu)勢(shì)，但在臨床應(yīng)用上仍有一些限制：外泌體的提取方法金標(biāo)準(zhǔn)仍然是差速離心法，但這種方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力且提取效率較低，難以進(jìn)行臨床推廣和應(yīng)用；而商業(yè)化的試劑盒質(zhì)量參差不齊，往往導(dǎo)致提取物雜質(zhì)過多，且其售價(jià)較高。外泌體的定量是采用顆粒濃度定量，蛋白濃度定量，亦或是核酸濃度定量，目前仍存有爭(zhēng)議。由于傳統(tǒng)的內(nèi)參并不適用于外泌體，在實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)靶分子含量時(shí)內(nèi)參的選擇尚沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。外泌體分子標(biāo)志物的研究還處于初級(jí)階段。目前外泌體研究的整個(gè)流程中成本都很高。在從體液中提取外泌體后，體液可長(zhǎng)期穩(wěn)定保存。廣州外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)

研究者利用電穿孔法對(duì)外泌體進(jìn)行DOX的負(fù)載，進(jìn)行體內(nèi)抗中流效果的研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，負(fù)載DOX的iRGD肽靶向性外泌體對(duì)中流的抑制效果遠(yuǎn)優(yōu)于單純的DOX。直接靜脈注射DOX，其不僅水溶性低，而且容易使DOX與血液中的蛋白結(jié)合，從而被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識(shí)別捕獲，起不到理想的抗中流效果。而用iRGD肽靶向性的外泌體保護(hù)DOX，可以提高DOX水溶性，避免被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉，提高靶向性，從而降低由于用藥過量和非靶向性引起的毒性，起到更好的抗中流效果。外泌體是胞內(nèi)還是胞外外泌體復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物。

外泌體的提取方法：免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不寬泛。

外泌體能攜帶多種生物活性分子循環(huán)于血液／體液中并介導(dǎo)長(zhǎng)距離的細(xì)胞間通訊，中流來源外泌體富含的蛋白質(zhì)、核苷酸、脂質(zhì)等分子能夠反映其來源細(xì)胞的生理及病理狀態(tài)，外泌體特殊的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)能保護(hù)其內(nèi)RNA等分子免于降解，因此，檢測(cè)中流外泌體成為液體活檢一個(gè)明顯優(yōu)勢(shì)。臨床試驗(yàn)研究表明，外泌體在多種疾病的早期診斷、療效和預(yù)后監(jiān)測(cè)等方面都具備較好的應(yīng)用價(jià)值，正逐漸成為臨床診療中新的、理想的生物標(biāo)志物和可能的靶向藥物載體。隨著技術(shù)的進(jìn)步，組學(xué)時(shí)代的到來，大規(guī)模蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)被聯(lián)合應(yīng)用于篩選和揭示多種ai癥細(xì)胞外囊泡的標(biāo)志物。外泌體在組織修復(fù)領(lǐng)域均起著重要的作用，并且可以作為很好靶向給藥系統(tǒng)。

由于卵巢中流細(xì)胞質(zhì)膜上的磷脂酰絲氨酸（phosphati[1]dylserine，PS）可以外泌體形式分泌入血，惡性卵巢ai患者血漿外泌體中的PS水平明顯高于卵巢良xing病變患者和健康對(duì)照者，因此外泌體中的PS可用于協(xié)助早期卵巢惡性中流的篩查和診斷。外泌體可穿透血-腦脊液屏障的特點(diǎn)也為腦中流患者提供了早期診斷的重要工具。血漿微囊泡EGFRvIIImRNA已被證明可作為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者診斷的支持證據(jù)。2020年，DavidLyden和WilliamR.Jarnagin教授團(tuán)隊(duì)合作，通過探究來自不同ai種組織、血漿和其他體液的426個(gè)人類樣品中細(xì)胞外囊泡和顆粒（extracellularvesicleandparticle，EVP）的蛋白質(zhì)組學(xué)特征，鑒定出一批中流特異性血漿EVP蛋白（特異度和靈敏度分別為95%和90%），并可區(qū)分患者的中流類型，使基于外泌體的中流診斷和鑒別診斷向前邁進(jìn)了一步。各種細(xì)胞粘著分子在外泌體膜表面表達(dá)，由其決定外泌體被運(yùn)輸往哪一種細(xì)胞。成都外泌體western blot

隨著今后的研究發(fā)展，外泌體功能逐步清晰，并擴(kuò)大臨床應(yīng)用。廣州外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)

臨床上，干細(xì)胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍、再生健康皮膚。在護(hù)膚方面，主要是對(duì)外傷受損、衰老進(jìn)行修復(fù)，比較全的調(diào)理皮膚、改善膚質(zhì)，令肌膚恢復(fù)年輕、健康的狀態(tài)。干細(xì)胞外泌體可以再生皮膚和強(qiáng)化皮膚屏障，具有比較好的再生效果，且沒有其它副作用。干細(xì)胞外泌體或?qū)⒊蔀橹?、特異性皮炎等寬泛炎癥性皮膚疾病的一種有效且安全可靠的治理方法。如今，干細(xì)胞外泌體已在幾種不同類型的疾病中顯示出令人鼓舞的治理效果，包括腎損傷、心臟損傷、腦損傷和肝肺損傷等。主要機(jī)制可能是外泌體介導(dǎo)了MSC的旁分泌/自分泌機(jī)制。廣州外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)