與PC-3細(xì)胞相比,PC-3細(xì)胞外泌體中含有較高豐度的鞘糖脂、鞘磷脂、膽固醇和磷脂酰絲氨酸。外泌體常見的表面蛋白質(zhì)包括四跨膜蛋白(如CD63、CD9、CD81)、黏附蛋白(如L1CAM、LAMP2)、整合素和糖蛋白(如纖連蛋白)等,而外泌體囊泡內(nèi)蛋白質(zhì)則與來源細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)密切相關(guān),包含例如熱休克蛋白(HSP70、HSP90)和細(xì)胞骨架蛋白(actin、tubulin、cofilin)等。除此之外,外泌體中還攜帶有來源細(xì)胞的miRNAs、mRNAs、non-codingRNAs、circularRNAs和DNA等遺傳物質(zhì)。外泌體的完整囊泡結(jié)構(gòu)能夠保護(hù)其內(nèi)部生物分子不受體液中各種酶的影響從而保持其完整性和生物活性。不同肝臟疾病中,細(xì)胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。腹膜透析液外泌體質(zhì)譜
外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組織特異性,為其能成為瘤早期診斷的生物標(biāo)志物提供了重要保障。但目前對于外泌體miRNA、LnkRNA等的檢測方法還不成熟,限制了外泌體用于疾病診斷中的應(yīng)用?;谕饷隗w的診斷產(chǎn)品獲得FDA批準(zhǔn)上市,很大程度的增加了研發(fā)企業(yè)的信心。外泌體的異質(zhì)性又決定了外泌體藥物遞送系統(tǒng)不能提供一個普適的遞藥策略,必須根據(jù)所傳遞治理物質(zhì)的類型、目標(biāo)組織的特點(diǎn)等進(jìn)行針對性的進(jìn)行策略調(diào)整。良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等使外泌體在藥物遞送方向大有潛力。吉林外泌體芯片確認(rèn)外泌體生理作用的單獨(dú)方法就是明確外泌體的釋放機(jī)制,通過促進(jìn)或壓制釋放機(jī)制。
在20世紀(jì)80年代,外泌體被描述為從網(wǎng)織紅細(xì)胞分泌的內(nèi)體來源的囊泡。人們對這些細(xì)胞外囊泡的興趣逐漸增加,因為它們似乎參與了很多細(xì)胞過程。外泌體攜帶蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和RNAs,介導(dǎo)體內(nèi)不同細(xì)胞類型之間的細(xì)胞間通訊,從而影響正常和病理狀態(tài)。只有近,科學(xué)家才認(rèn)識到將外泌體與其他類型的細(xì)胞外囊泡分開的困難,這排除了特定功能對不同類型分泌的囊泡的明確歸因。為了闡明這個復(fù)雜但正在發(fā)展的科學(xué)領(lǐng)域,該綜述著重于外泌體和其他分泌的細(xì)胞外囊泡的定義。討論了它們的生物發(fā)生,分泌及其后續(xù)的命運(yùn),因為它們的功能依賴于這些重要過程。
由于特殊的結(jié)構(gòu)和循環(huán)方式,外泌體作為藥物運(yùn)輸?shù)妮d體具有獨(dú)特的優(yōu)勢。例如外泌體的尺寸分布能夠增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng),從而有選擇性地深入中流組織;其外層磷脂雙分子層可以保護(hù)內(nèi)容物不受各種生物酶的影響,維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中,其體積小,結(jié)構(gòu)、組成與細(xì)胞膜類似,導(dǎo)致外泌體可以在避開免疫系統(tǒng)監(jiān)督的同時深入組織內(nèi)部,有較好的生物相容性;當(dāng)采用內(nèi)源外泌體時,能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應(yīng);除此之外,某些細(xì)胞來源或經(jīng)特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性,可以與特定的qi官或組織結(jié)合。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來源來區(qū)分。
卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達(dá)譜有明顯差異,表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標(biāo)志物。多項研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數(shù)ai癥的多種病理條件下過度表達(dá)。尿液外泌體來源于泌尿系統(tǒng)相關(guān)的各種細(xì)胞,包括腎小球足細(xì)胞、腎小管細(xì)胞和膀胱等,因此尿液外泌體數(shù)目、形態(tài)和生化性質(zhì)的改變往往反映泌尿系統(tǒng)疾病。通過對前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標(biāo)志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3,前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG,跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因),表明尿液外泌體具有診斷和監(jiān)測ai癥患者狀態(tài)的潛力。外泌體不只可作為疾病診斷的生物標(biāo)志,而且可作為天然的藥物傳遞載體。江蘇外泌體熒光標(biāo)記
通過壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發(fā)生。腹膜透析液外泌體質(zhì)譜
外泌體基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床應(yīng)用的探索和深入研究對如何準(zhǔn)確及高純度提取外泌體,并完整保存提出了更高的技術(shù)要求。外泌體可通過差速超速離心在不同離心力下沉淀樣品中不同的雜質(zhì)組分,并在100000×g~200000×g的轉(zhuǎn)速下獲取較純的外泌體。差速超速離心技術(shù)被認(rèn)為是外泌體分離的“金標(biāo)準(zhǔn)”,也是目前常用的外泌體分離和濃縮方法。該方法可通過結(jié)合0.22μm或0.45μm孔徑濾膜進(jìn)行超濾來提高產(chǎn)物純度減少外泌體的聚集,其分離效率容易受到加速度、轉(zhuǎn)子類型、旋轉(zhuǎn)半徑、沉降路徑長度以及樣品黏度等多種因素影響。腹膜透析液外泌體質(zhì)譜