外泌體及其攜帶的組分參與肝臟細(xì)胞的增殖、再生和遷移等生理過程,在肝臟疾病和肝損傷中起著重要作用,如肝病、肝硬化、肝纖維化、酒精性脂肪肝等。抑制或阻止外泌體的分泌,或許是治理肝臟疾病的一種新型策略。此外,外泌體具有穩(wěn)定性和生物安全性,也可以用作載體攜帶改造的基因或藥物,或用作疫苗誘導(dǎo)免疫反應(yīng)殺死瘤細(xì)胞。外泌體會起到一定的保護(hù)作用,抵抗病毒的作用。與HCV類似,HBV患者的血清中分離到的外泌體同樣攜帶HBV核酸分子和蛋白質(zhì)。HBV陽性的外泌體會主動轉(zhuǎn)移HBV到肝細(xì)胞中。外泌體中HBV核酸分子還會抑制RIG-1和下游信號通路,導(dǎo)致NK細(xì)胞功能紊亂。外泌體是一種由活細(xì)胞分泌的,直徑約為40~160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。外泌體rna測序
瘤釋放的外泌體可以通過削弱免疫效應(yīng)細(xì)胞的反應(yīng)和激發(fā)免疫抑制細(xì)胞的擴(kuò)增,來營造一個免疫抑制的環(huán)境。瘤釋放的外泌體可以替代瘤細(xì)胞接受免疫系統(tǒng)的攻擊,從而幫助瘤細(xì)胞逃過免疫系統(tǒng)的識別。瘤釋放的外泌體可以引發(fā)炎癥,利用基質(zhì)浸潤細(xì)胞的反應(yīng)營造出利于瘤生長的微環(huán)境。研究表明,在過去短短的5年里,對外泌體的研究已經(jīng)取得了比較好的的進(jìn)展。如今,收集并分析瘤釋放的外泌體已經(jīng)成為液體活檢的一個重要研發(fā)方向。靶向瘤釋放外泌體的治理策略將對改善病癥患者的命運發(fā)揮出舉足輕重的影響。工程化 外泌體來源利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運輸?shù)侥繕?biāo)細(xì)胞中。
外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,其主要來源于細(xì)胞內(nèi)多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60,HSP70和HSP90),本示蹤病毒使用CD9作為生物標(biāo)記,通過將CD9與熒光蛋白偶聯(lián),帶熒光的膜蛋白會在表達(dá)至外泌體膜上,便于后續(xù)進(jìn)行、觀察內(nèi)化或其他實驗。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒、細(xì)胞系的輔助下,經(jīng)過病毒包裝成為有g(shù)anran力的病毒顆粒,通過ganran細(xì)胞或組織,實現(xiàn)外源基因在細(xì)胞或組織中表達(dá)。
干細(xì)胞外泌體可直接促進(jìn)血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。因此,干細(xì)胞外泌體可用于中風(fēng)的治理,改善神經(jīng)預(yù)后,增加血管與神經(jīng)生成。干細(xì)胞外泌體對多種類型的免疫細(xì)胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用,包括樹突狀細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。靜脈輸注干細(xì)胞外泌體可抑制CD4+T和CD8+T細(xì)胞的活化和浸潤,從而延長GVHD小鼠模型的存活時間,并減少多個組織的病理損傷。干細(xì)胞在人類健康領(lǐng)域所發(fā)揮出來的潛能,令人驚嘆。而干細(xì)胞外泌體,作為干細(xì)胞與其它組織細(xì)胞相互交流信息的載體,儼然會成為生物醫(yī)學(xué)研究的新風(fēng)口之一。實際上,用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體。
外泌體(Exosome),是細(xì)胞外囊泡(EV)的一種主要類型,是直徑為30至150nm的納米大小的膜結(jié)構(gòu),大多數(shù)細(xì)胞都會分泌外泌體。外泌體存在于各種生物體液中,通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)和代謝物等來發(fā)揮細(xì)胞間通訊功能,參與免疫應(yīng)答、代謝和心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病以及病癥進(jìn)展等多種生理和病理過程。在內(nèi)體轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒於嗄遗輧?nèi)體(MVE)的過程中,內(nèi)體膜向腔內(nèi)出芽形成腔內(nèi)囊泡(ILV),MVE與細(xì)胞膜融合釋放ILV到細(xì)胞外,即形成外泌體。外泌體在化療藥物的促轉(zhuǎn)移過程中具有重要的作用。工程化 外泌體來源
外泌體提純方法中,超速離心法和聚合物沉淀法(市售試劑盒)混入多種雜質(zhì)。外泌體rna測序
通過改變外泌體的溶解性或者分散性,可以將它們從體液或細(xì)胞培養(yǎng)液中沉淀出來。常見的方法是使用聚乙二醇或凝集素來沉淀樣品中的外泌體。聚乙二醇是一種水溶性非離子化合物,不含水的聚乙二醇可以通過“劫持”水分子增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力,從而迫使其脫離溶液,進(jìn)而在低速離心條件下發(fā)生沉降。凝集素是一種具有高度特異性的碳水化合物結(jié)合蛋白,可通過與外泌體質(zhì)膜糖蛋白上的糖鏈結(jié)合來改變外泌體的溶解性。此外,還可使用魚精蛋白、醋酸鈉、有機(jī)溶劑沉淀等方法進(jìn)行沉淀分離。外泌體rna測序