建立記錄各論文實(shí)驗(yàn)條件的數(shù)據(jù)庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一。一方面,隨著EV研究倍受世界矚目,各國啟動(dòng)了大型研究項(xiàng)目。美國啟動(dòng)NIH戰(zhàn)略性大型項(xiàng)目(ExtracellularRNACommunication),國際厲害性學(xué)會(huì)——Gordon和KeystoneSymposia也從2016開始成立會(huì)議小組。受到歐洲藥物研究開發(fā)公司“創(chuàng)新藥物倡議組織(IMI)”的支持推進(jìn)的CANCER-ID項(xiàng)目,也包含EV研究在內(nèi)。2017年日本選定了EV研究為文部科學(xué)省研究開發(fā)戰(zhàn)略的目標(biāo)之一,期待會(huì)加速今后的研究發(fā)展。無論如何,今后EV研究的根本就是必須有強(qiáng)有力的研究方法和技術(shù),而PS親和法有望成為其中之一。從外泌體中篩選的生物標(biāo)志物,可用于疾病的診斷、預(yù)后及治理。外泌體可以一年打幾次
妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng),參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動(dòng)脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控,在正常妊娠過程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥,如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生,很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括:多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過濾離心等方法。其中,多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法,該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來,然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體,還包括許多其他種類細(xì)胞釋放的外泌體,如樹突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等,且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中,這些因素都會(huì)影響胎盤來源外泌體的分離純化。眼部外泌體實(shí)際上,用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體。
外泌體是新型治理劑,瘤轉(zhuǎn)移是一個(gè)包括病細(xì)胞侵入、血管中存活和殖民化等多步驟的復(fù)雜過程。外泌體能夠影響這個(gè)級(jí)聯(lián)反應(yīng)的每一步,因此可作為瘤治理的靶點(diǎn)。瘤細(xì)胞在轉(zhuǎn)移到其他組織時(shí)需要在間質(zhì)細(xì)胞間移動(dòng)并到達(dá)血管中,在這個(gè)過程中,瘤細(xì)胞外泌體通過纖維連接蛋白促進(jìn)瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)性,再通過蛋白酶促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的分解、血管生成,進(jìn)而促進(jìn)瘤轉(zhuǎn)移。多數(shù)瘤細(xì)胞對轉(zhuǎn)移的組織具有指向性,而外泌體表面的整合素就是決定其指向性的因子,如外泌體αvβ5整合素決定了對肝臟的指向性,而外泌體α6β4?α6β1整合素決定了對肺部的指向性。
胃病作為一種常見的惡性瘤,在亞洲具有較高的發(fā)病率.胃病的臨床診斷方法與結(jié)腸病相同,主要依靠內(nèi)窺鏡,早期胃病的癥狀并不明顯,且臨床常用的瘤標(biāo)志物對胃病患者特異性與敏感性均較差,因此,胃病往往發(fā)現(xiàn)于晚期,并伴有不同程度的轉(zhuǎn)移。研究者發(fā)現(xiàn)胃病細(xì)胞高表達(dá)CD97并可經(jīng)外泌體分泌的方式調(diào)節(jié)瘤細(xì)胞的MAPK信號(hào)通路,促進(jìn)瘤細(xì)胞的增殖與侵襲。外泌體中CD97的檢測成或許能成為一種有潛在價(jià)值的胃病診療工具。胃病細(xì)胞能選擇性地將let-7包裝到外泌體中,并釋放至周圍環(huán)境中,促進(jìn)胃病的惡性進(jìn)展。胃病細(xì)胞外泌體可作用于抗瘤的T細(xì)胞,抑制AKT的活性。外泌體與免疫細(xì)胞之間的相互作用揭示了瘤抑制免疫功能的潛在機(jī)制。在另一項(xiàng)被認(rèn)為有潛在胃病診斷價(jià)值的lnRNA的研究中,通過對胃病患者、胃上皮異型增生與健康人的比較發(fā)現(xiàn),LINC00152在胃病患者的血液中可被檢測到高表達(dá),且手術(shù)前后有明顯變化。血清LINC00152主要存在于外泌體中,在外泌體的保護(hù)下,可以穩(wěn)定保存,血清外泌體LINC00152具有胃病標(biāo)志物的潛能。外泌體無法分析外泌體具有的生理功能,也是兩種提取方法的問題所在。
外泌體中存在著某些特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和多糖,基于抗原–抗體特異性識(shí)別和結(jié)合作用原理,可將外泌體從其他組分中分離出來。四次跨膜蛋白家族、脂膜、膜聯(lián)蛋白、上皮細(xì)胞黏附分子或肝素等都可以作為抗原,而捕獲外泌體的抗體可以附著在平板、磁珠、二氧化硅、樹脂、膜親和過濾器、纖維素濾膜、聚酰氨基胺樹狀聚合物表面和微流控器件上。常用方法有酶聯(lián)免疫吸附法和磁珠法等。酶聯(lián)免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作為抗體附著介質(zhì),其結(jié)果用吸光度值表示,該方法可以快速分析已知表面生物標(biāo)志物的表達(dá),也可以瞬時(shí)讀出外泌體的產(chǎn)量和特異性。磁珠法多使用共價(jià)包覆鏈霉親和素的磁珠,與樣品一起孵育后可通過磁泳將被結(jié)合的外泌體從樣品組分中分離出來。鑒于微米級(jí)磁珠可賦予更大的接觸面積,該方法不jin具有高度特異性,還具有比超速離心更高的外泌體產(chǎn)率。外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標(biāo)記物。脂肪細(xì)胞外泌體是什么
外泌體可以作為藥物治理的遞送系統(tǒng)。外泌體可以一年打幾次
外泌體在各種疾病的診斷和治理中的應(yīng)用研究火熱。外泌體的復(fù)雜性,為疾病檢測和監(jiān)測提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。此外,能夠向病變細(xì)胞輸送功能性物質(zhì)的特性使外泌體有潛力作為基因和藥物遞送的載體。有研究總結(jié)了從外泌體中篩選的生物標(biāo)志物,可用于疾病的診斷、預(yù)后及治理。外泌體在生物液體中寬泛分布,包括血液、尿液、唾液、胸腹水、腦脊液、膽汁、乳汁以及淚液等,其復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物,具有檢測包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力,可以用于對心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測。外泌體可以一年打幾次