外泌體的提取方法：超速離心法，這是外泌體提取比較常用的方法。超速離心法得到的外泌的體量比較多，但是純度不足，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡而不是外泌體。過(guò)濾離心法，這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí)，不會(huì)影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問(wèn)題。密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期的準(zhǔn)備工作繁雜，比較耗時(shí)，量少。癥狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與癥狀進(jìn)展相關(guān)的分子。外泌體中的mirna提取

液體活檢是一種非侵入性的血液檢測(cè)突破性技術(shù)，能早期快速地檢測(cè)中流及其病灶或者轉(zhuǎn)移過(guò)程中釋放到血液中的循環(huán)中流細(xì)胞（circulatingtumorcell，CTC）、循環(huán)中流DNA（circulatingtumorDNA，ctDNA）和中流外泌體等中流組分。中流外泌體作為液體活檢的一個(gè)重要組成，基于其內(nèi)容物成分多樣和穩(wěn)定等優(yōu)勢(shì)，正成為中流標(biāo)志物相關(guān)研究的熱點(diǎn)。中流來(lái)源納米大小的外泌體具有易通過(guò)血腦屏障、天然的歸巢特性、雙分子層脂質(zhì)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和高效的生物相容性等特征。因此，中流外泌體正成為中流靶向zhiliao理想的載體，尤其是工程化外泌體更表現(xiàn)出很好的中流靶向干預(yù)和增強(qiáng)藥物zhiliao的效果。外泌體上表達(dá)有多少抗原抗體外泌體的檢測(cè)和提取還遇到一個(gè)困難即：對(duì)各種外泌體的分類。

外泌體是各種細(xì)胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。因外泌體內(nèi)含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對(duì)相鄰細(xì)胞具有交換信息的功能。作為細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標(biāo)記話題比較熱門。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍，但是關(guān)于外泌體相關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，關(guān)于需要改進(jìn)的課題存在很多。例如，外泌體提純方法中，超速離心法和聚合物沉淀法（市售試劑盒）混入多種雜質(zhì)，給后續(xù)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生了許多障礙?？贵w親和法和密度梯度離心法，雖然可以提取到高純度的外泌體，但不能提取完整外泌體，無(wú)法分析外泌體具有的生理功能，也是兩種提取方法的問(wèn)題所在。而免疫印跡法（WB）和Elisa檢測(cè)法作為被普遍應(yīng)用的外泌體檢測(cè)的一般方法，又存在檢測(cè)時(shí)需使用大量外泌體和難以檢測(cè)到低表達(dá)水平的標(biāo)記蛋白。

細(xì)胞分泌到細(xì)胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細(xì)胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細(xì)胞外囊泡（EVs）表示了細(xì)胞間通訊的一個(gè)重要模式，作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體。然而，我們對(duì)于EV形成的分子機(jī)制知識(shí)的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機(jī)制。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質(zhì)，總結(jié)了其生物學(xué)效應(yīng)，特別是免疫系統(tǒng)，討論了分泌囊泡可能作為細(xì)胞間信使的潛在作用。干細(xì)胞外泌體對(duì)多種類型的免疫細(xì)胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用。

外泌體的miRNA或蛋白質(zhì)等遺傳分子與肝臟病理息息相關(guān)，在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點(diǎn)或分子標(biāo)志物。對(duì)外泌體的研究，將有利于闡述肝臟及其疾病的發(fā)生和發(fā)展機(jī)制，為尋求臨床可用的biomarkers和開(kāi)發(fā)新的治理方法提供支持。外泌體可以通過(guò)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和miRNAs進(jìn)行細(xì)胞間交流，從而作用于周圍的細(xì)胞并改變肝臟的微環(huán)境。細(xì)胞內(nèi)多泡體（MVBs）與細(xì)胞膜融合，釋放內(nèi)部的外泌體到細(xì)胞外，被其他細(xì)胞攝取，通過(guò)細(xì)胞膜融合或內(nèi)吞作用釋放攜帶的內(nèi)含物，在受體細(xì)胞中調(diào)控生理活動(dòng)。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間交流可以改變瘤的生長(zhǎng)、細(xì)胞遷移、抗病毒等生理過(guò)程。干細(xì)胞外泌體通過(guò)改變細(xì)胞外基質(zhì)，改變受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組，調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，生長(zhǎng)，增殖和分化途徑。外泌體lncRNA芯片

外泌體是一種由活細(xì)胞分泌的，直徑約為40～160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。外泌體中的mirna提取

外泌體富含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸分子，這些分子具有來(lái)源細(xì)胞的特異性，所以通過(guò)分析中流細(xì)胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來(lái)源細(xì)胞表型及其生物學(xué)作用?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種中流外泌體來(lái)源的蛋白類分子標(biāo)志物。例如，乳腺ai、結(jié)腸ai和胰腺ai中均可檢測(cè)到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1（glypican1，GPC1）的表達(dá)，且與乳腺ai和結(jié)腸ai相比，GPC1對(duì)胰腺ai的早期診斷尤具價(jià)值。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達(dá)增高則提示與中流進(jìn)展相關(guān)。隨著蛋白組學(xué)技術(shù)的發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)中流患者血液外泌體來(lái)源的蛋白標(biāo)志物其診斷特異性和敏感性分別可達(dá)到95％和90％。外泌體中的mirna提取

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