在血液和大多數體液(如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等)中均可檢測到外泌體。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿,miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統(tǒng)中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解,因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應用價值。相較于血清中相關miRNA的水平,腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質瘤診斷和預后的指標,特別對預測中流復發(fā)或轉移具有價值。唾液樣本在安靜狀態(tài)下主要來源于舌下腺和頜下腺,刺激狀態(tài)下則主要來源于腮腺。外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。外泌體芯片
液體活檢是一種非侵入性的血液檢測突破性技術,能早期快速地檢測中流及其病灶或者轉移過程中釋放到血液中的循環(huán)中流細胞(circulatingtumorcell,CTC)、循環(huán)中流DNA(circulatingtumorDNA,ctDNA)和中流外泌體等中流組分。中流外泌體作為液體活檢的一個重要組成,基于其內容物成分多樣和穩(wěn)定等優(yōu)勢,正成為中流標志物相關研究的熱點。中流來源納米大小的外泌體具有易通過血腦屏障、天然的歸巢特性、雙分子層脂質結構的穩(wěn)定性和高效的生物相容性等特征。因此,中流外泌體正成為中流靶向zhiliao理想的載體,尤其是工程化外泌體更表現(xiàn)出很好的中流靶向干預和增強藥物zhiliao的效果。乳液外泌體提取試劑盒產品標準在細胞外基質中,外泌體膜蛋白可被蛋白酶剪切,碎片作為配體與細胞膜上的受體結合,喚醒細胞內的信號通路。
外泌體有很多潛在優(yōu)勢,但是外泌體在藥物遞送中的應用研究才剛剛起步,尚有許多問題需解決:如何修飾外泌體的靶向性:缺氧瘤細胞來源的外泌體傾向于向缺氧瘤組織內募集;此外,還可通過在外泌體膜表面設計與靶細胞特異性結合的抗體、配體或受體來實現(xiàn)。如何提高藥物裝載效率:目前主要有①前裝載方法(首先將藥物加載到母細胞中,隨后外泌體形成并包裹藥物分泌到細胞外,常用的方法如轉染、共孵育等);②后裝載方法(直接將藥物加載到外泌體中,例如孵育、電穿孔、超聲、擠出、凍融循環(huán)等);③其他裝載方法(主要是通過生物工程修飾母細胞來實現(xiàn))。如何實現(xiàn)外泌體的大量生產:目前大規(guī)模生產外泌體的方法主要是自發(fā)生產和非自發(fā)生產。
干細胞外泌體可直接促進血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。因此,干細胞外泌體可用于中風的治理,改善神經預后,增加血管與神經生成。干細胞外泌體對多種類型的免疫細胞均具有免疫調節(jié)作用,包括樹突狀細胞、T細胞、B細胞和巨噬細胞。靜脈輸注干細胞外泌體可抑制CD4+T和CD8+T細胞的活化和浸潤,從而延長GVHD小鼠模型的存活時間,并減少多個組織的病理損傷。干細胞在人類健康領域所發(fā)揮出來的潛能,令人驚嘆。而干細胞外泌體,作為干細胞與其它組織細胞相互交流信息的載體,儼然會成為生物醫(yī)學研究的新風口之一。外泌體分析會引起何種生理作用,這是進一步研究的發(fā)展方向。
與干細胞不同的是:干細胞外泌體對受損的微環(huán)境不響應,但它可以通過改變細胞外基質,改變受體細胞的轉錄組和蛋白質組,來調節(jié)細胞凋亡,生長,增殖和分化途徑。因此,干細胞外泌體具有減少細胞凋亡、減輕炎癥反應、促進血管生成、抑制纖維化、提高組織修復潛力等重要生物學功能,在調控組織再生方面存在良好的臨床應用前景。干細胞外泌體的優(yōu)點,體積小:納米級粒子,大小約為細胞的1/200,因此能很好地被人體所利用。免疫反應程度低:外泌體不是細胞,只作為載具,外膜的表層上呈現(xiàn)較少的抗原,免疫系統(tǒng)難識別,對人體影響小??纱┩秆X障壁:體積小加上脂質外膜的特性,使其可以通過血腦障壁,抵達腦部組織。癥狀細胞來源的外泌體含有與癥狀進展相關的分子。外泌體芯片
外泌體大小不均的原因可能是由于MVB的限制膜不均勻內陷,導致流體和固體的總含量不同。外泌體芯片
前列腺ai患者尿液外泌體中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表達水平明顯上升,表明這些miRNAs可用于前列腺ai的早期篩查。膽管ai是惡性程度較高的消化系統(tǒng)中流,發(fā)展隱蔽且臨床癥狀及體征出現(xiàn)晚,故給早期診斷帶來困難。高通量小RNA測序篩查了來自膽管ai和膽囊ai患者外泌體中一系列差異表達的miRNA,小RNA長度在正常個體、膽管ai患者和膽囊ai患者之間的分布存在明顯差異,膽管ai患者的外泌體中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明顯升高,而膽囊ai患者的外泌體中miR-151a-5p略有升高,為膽管ai和膽囊ai提供了一套新的生物診斷標志物。外泌體芯片
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