外泌體是各種細胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。因外泌體內(nèi)含mRNA、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對相鄰細胞具有交換信息的功能。作為細胞間信號傳導的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標記話題比較熱門。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍,但是關(guān)于外泌體相關(guān)的實驗技術(shù),關(guān)于需要改進的課題存在很多。例如,外泌體提純方法中,超速離心法和聚合物沉淀法(市售試劑盒)混入多種雜質(zhì),給后續(xù)實驗產(chǎn)生了許多障礙??贵w親和法和密度梯度離心法,雖然可以提取到高純度的外泌體,但不能提取完整外泌體,無法分析外泌體具有的生理功能,也是兩種提取方法的問題所在。而免疫印跡法(WB)和Elisa檢測法作為被普遍應用的外泌體檢測的一般方法,又存在檢測時需使用大量外泌體和難以檢測到低表達水平的標記蛋白。外泌體其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。腹膜透析液外泌體label free
當外泌體在第1次被發(fā)現(xiàn)的時候,外泌體被認為是細胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細胞間信號的傳導以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、瘤侵襲等方方面面。有研究表明瘤來源的外泌體參與到瘤細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導致大量新生血管的生成,促進了瘤的生長與侵襲。外泌體分泌抑制劑在免疫系統(tǒng)中,據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉(zhuǎn)移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制。
姜黃素的臨床應用也存在著問題,比如其水溶性差,在體內(nèi)代謝快速以及易被快速清chu。利用鼠淋巴瘤細胞系(EL-4)的外泌體作為姜黃素的載體,可以提高姜黃素的溶解性、穩(wěn)定性以及生物利用度,將姜黃素和載有姜黃素的外泌體腹膜內(nèi)注射到脂多糖(LPS)誘發(fā)的敗血性休克的小鼠模型中,結(jié)果顯示經(jīng)外泌體運載的姜黃素可促進小鼠肺部抑制免疫反應的CD11b+Gr-1+細胞的凋亡而表現(xiàn)出抗yan癥的效果,而單純姜黃素的注射不能起到促進CD11b+Gr-1+細胞的凋亡效果(與注射PBS的對照組類似)。研究者還進行了目前常用的脂質(zhì)體負載姜黃素,與外泌體負載姜黃素對比。脂質(zhì)體和外泌體均具備作為姜黃素的載體的能力,但外泌體由于其更易被Gr-1+細胞吞噬,從而可以起到更好的zhiliao效果。
人體內(nèi)多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,包括干細胞、免疫細胞、內(nèi)皮細胞、血小板及平滑肌細胞等。外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中。雙層膜保護外泌體的內(nèi)容物,使外泌體能夠在組織中長距離移動。干細胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用,有望成為“無細胞的細胞治理”工具。干細胞來源的外泌體可通過囊泡,將干細胞的精華部分——mRNA、miRNA、IncRNA及蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì),打包運出干細胞體外。通過“細胞間高速公路”來“快遞”到人體各個組織內(nèi)。外泌體介導的細胞間交流可以改變瘤的生長、細胞遷移、抗病毒等生理過程。
外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,其主要來源于細胞內(nèi)多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60,HSP70和HSP90),本示蹤病毒使用CD9作為生物標記,通過將CD9與熒光蛋白偶聯(lián),帶熒光的膜蛋白會在表達至外泌體膜上,便于后續(xù)進行、觀察內(nèi)化或其他實驗。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒、細胞系的輔助下,經(jīng)過病毒包裝成為有g(shù)anran力的病毒顆粒,通過ganran細胞或組織,實現(xiàn)外源基因在細胞或組織中表達。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍。外泌體分泌抑制劑
外泌體中含有豐富的蛋白質(zhì)和遺傳物質(zhì)DNA以及RNA等。腹膜透析液外泌體label free
外泌體開始被認為是細胞排出代謝廢物的一種方式,能夠幫助缺乏高效降解能力或位于排泄系統(tǒng)的細胞排出不必要的蛋白質(zhì)和RNA。近年來,隨著人們對外泌體的深入了解,外泌體的多種生物功能先后被發(fā)現(xiàn)。如今外泌體作為一種細胞間交流、傳遞大量的生物功能分子的重要方式日益受到重視。外泌體與受體細胞的信息交流可能通過以下4種途徑實現(xiàn):(1)外泌體表面膜蛋白質(zhì)被目的細胞表面的受體識別,從而激huo靶細胞;(2)外泌體在蛋白酶作用下產(chǎn)生的表面膜蛋白質(zhì)碎片可作為目的細胞表面受體的配體;(3)外泌體脂膜可以與目的細胞膜融合,將蛋白質(zhì)和RNA等內(nèi)容物釋放進去,此類膜融合可能改變靶細胞的一些膜特性,例如脂質(zhì)和膜蛋白質(zhì)的密度及種類;(4)目的細胞通過胞吞的形式攝入外泌體。腹膜透析液外泌體label free
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