細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡是內源性和質膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細胞外囊泡(EVs)表示了細胞間通訊的一個重要模式,作為膜和細胞溶質蛋白、脂質和RNA細胞之間傳遞的載體。然而,我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內生理相關性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機制。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質,總結了其生物學效應,特別是免疫系統(tǒng),討論了分泌囊泡可能作為細胞間信使的潛在作用。所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體。外周血外泌體提取試劑盒成分
流式細胞技術針對外泌體的表面抗原標記物進行檢測,能夠實現(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低,所以采用常規(guī)的流式細胞儀進行檢測時往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強反射,操作耗時又費力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細胞儀(HSFCM),將可檢測的外泌體粒徑降至40nm,能夠在不連接beads的情況下實現(xiàn)每分鐘10000個外泌體的檢測,并且能夠結合免疫熒光的方法進行外泌體標志蛋白質的定量檢測,目前該儀器已商品化。細胞上清外泌體circRNA測序外泌體介導的細胞間交流可以改變瘤的生長、細胞遷移、抗病毒等生理過程。
幾乎所有的細胞都可以在自發(fā)或在一定刺激條件下產生外泌體,不同的細胞產生的外泌體具有不同的功能,這些外泌體參與了一系列生理和病理過程,如ai癥發(fā)生與發(fā)展、抗原呈遞、免疫調節(jié)、組織愈合等。來自血細胞(包括血小板、白細胞和紅細胞)的外泌體具有參與凝血、提供促血管生成因子、誘導血管生成等生理功能;妊娠期外泌體能夠影響局部血管生成、調節(jié)分化、激huo免疫、促進胚胎發(fā)育;肝臟細胞產生的外泌體有利于維護肝臟內穩(wěn)態(tài)。由此可見,正常細胞產生的外泌體對維持機體的正常生命活動起重要作用。
一方面,外泌體可以通過調控細胞的惡性轉化如細胞增殖、遷移和侵襲,促進HCC的發(fā)生和發(fā)展。另一方面,惡性瘤細胞分泌的外泌體可以協(xié)同其他瘤細胞一起,調控瘤微環(huán)境,以利于HCC發(fā)展。人HCC細胞外泌體中含有的一系列miRNAs,會減弱其他HCC細胞中TGF-β通路上的蛋白表達,促進HCC細胞的生長。HCC細胞外泌體還會誘導非致瘤性肝細胞發(fā)生細胞遷移和侵襲,具有運動能力的HCC通過釋放外泌體誘導肝細胞分泌MMP-2和MMP-9,增強HCC細胞的侵襲能力。經HCC中分離到的CD90+外泌體處理的內皮細胞會表達更多的VEGF和VEGFR1,促進血管生成;同時誘導ICAM-1表達促進細胞轉移。還有研究表明外泌體參與HCC缺氧脅迫和藥物耐受的調控。細胞表面受體表達不同,外泌體對受體細胞的影響可能不同,可能誘導細胞存活,也可能誘導凋亡或免疫調節(jié)等。
有研究表明外泌體通過喚醒瘤相關信號通路、誘導免疫耐受、重塑細胞外基質、增強瘤細胞侵襲性和調控瘤微環(huán)境促進瘤的發(fā)生和發(fā)展,外泌體在瘤的診斷上有諸多優(yōu)勢:外泌體可保護其中的核酸類物質,防止其迅速降解;外泌體的形成與親源細胞的狀態(tài)密切相關;針對外泌體內容物的檢測比傳統(tǒng)的瘤標志物更具有特異性;外泌體寬泛存在于多種體液樣本中,以其為基礎的瘤診斷可在病情發(fā)展過程中及時監(jiān)測分子標志物的變化,這種檢測更易監(jiān)控且樣本更易收集。外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結合,從而活躍細胞內的信號通路。牛奶提取試劑盒成分
外泌體可由間充質干細胞、淋巴細胞和瘤子細胞等多種類型細胞主動分泌釋放。外周血外泌體提取試劑盒成分
Knepper等通過對透射電鏡得到的200個囊泡進行粒徑分析,結果表明尿液中外泌體的粒徑分布約為35~40nm,磷脂雙分子層厚度約為直徑的1/5~1/10。透射電鏡結合免疫金標記法能夠得到外泌體表面特征分子的信息,有助于揭示外泌體的產生機制與來源。動態(tài)光散射(dynamiclightscattering,DLS)和納米顆粒跟蹤分析(nanoparticletrackinganaly[1]sis,NTA)都是利用光學手段獲得囊泡粒徑分布的方法。兩者的不同之處在于動態(tài)光散射通過檢測散射光的強度計算得到顆粒粒徑,而納米顆粒跟蹤分析通過追蹤單個粒子的運動軌跡計算得到樣品濃度、粒徑分布等信息。外周血外泌體提取試劑盒成分
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