泌體是細胞內源性的小囊泡,由大多數細胞分泌。在抗原呈遞細胞中的外泌體發(fā)揮作用的報道后,人們對外泌體的興趣增強,并且觀察到它們可以在體內刺激免疫應答。在過去幾年中,有幾個實驗室報道了各種細胞類型的外泌體分泌,并討論了其潛在的生物學功能。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質,總結了其生物學效應,特別是免疫系統,討論了分泌囊泡可能作為細胞間信使的潛在作用。細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡是內源性和質膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細胞外囊泡(EVs)表示了細胞間通訊的一個重要模式,作為膜和細胞溶質蛋白、脂質和RNA細胞之間傳遞的載體。然而,我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內生理相關性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機制。外泌體實際應用之前,需要使用大型動物模型進行進一步研究和臨床試驗。山東鼻腔灌洗液外泌體
在當代準確醫(yī)療的大趨勢下,外泌體的發(fā)現和研究為肺病的早期診斷和醫(yī)治提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現和早期診療提供可靠依據。根據種瘤來源的外泌體在肺病的發(fā)發(fā)展和侵襲轉移過程中的作用及相關機制的研究,臨床醫(yī)療人員可以針對不同的患者制定合適的醫(yī)治方案,以達到改善肺病患者生存率,延長肺病患者生存時間的目的。但是,針對外泌體的研究還存在諸多的問題有待廣大研究者解決,如:外泌體的純化及標記方法、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機制及信號通路等??偠灾?,外泌體的研究有著廣闊的前景,基于外泌體與肺病的研究,有望研發(fā)出能夠應用于肺病臨床診斷和醫(yī)治的有效措施,造福更多的患者。牛奶提取試劑盒價錢外泌體主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中 。
卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達譜有明顯差異,表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標志物。多項研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數ai癥的多種病理條件下過度表達。尿液外泌體來源于泌尿系統相關的各種細胞,包括腎小球足細胞、腎小管細胞和膀胱等,因此尿液外泌體數目、形態(tài)和生化性質的改變往往反映泌尿系統疾病。通過對前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進行轉錄組分析,鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3,前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG,跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因),表明尿液外泌體具有診斷和監(jiān)測ai癥患者狀態(tài)的潛力。
外泌體的提取、純化和鑒定:每一個外泌體研究者較初都要為外泌體的分離提取而煩惱。選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體,并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體。另外利用外泌體自身的物理化學性質所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達到分離效果。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過形態(tài)學(電子顯微鏡技術)、粒子大小以及標志蛋白等方式實現的。近來的研究發(fā)現外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用,如免疫中抗原呈遞、瘤子的生長與遷移、組織損傷的修復等。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體具有脂質雙層膜結構,能比較好的保護其包被的物質,且能靶向特定細胞或組織,因此是一種比較好靶向給藥系統。外泌體發(fā)揮功能:將細胞或組織中多余的或者有害的分子排除,這為研究生物標志物提供了可能。
NTA技術已被作為外泌體表征手段之一,相較于其他表征方式NTA技術的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快。大致方法是:將分離的外泌體樣本注入納米顆粒追蹤分析儀,用激光光束穿過樣本,激光在腔室內與顆粒相互作用時會發(fā)生散射,通過裝有攝像頭的顯微鏡收集散射光,捕捉外泌體的布朗運動,實現顆??梢暬?。然后使用Stokes-Einstein方程來測量粒子的平均速度,繼而估算粒子的大小。NTA能夠測量粒徑10-1000nm之間的顆粒,包含了外泌體50-150nm的徑粒范圍,但是NTA鑒定需要大于0.5毫升的樣品體積以及優(yōu)化的數據收集和分析參數,另外,NTA比較難區(qū)分與外泌體具有相似布朗運動的蛋白質聚集體,因此無法排除其他物質干擾。外泌體可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送。體液外泌體提取試劑盒步驟
從研究上來講并不太嚴格區(qū)分外泌體或微泡。山東鼻腔灌洗液外泌體
被特定部位的細胞獲取的瘤子外泌體可為肉瘤的轉移準備轉移前微環(huán)境。用肺轉傾向的肉瘤細胞來源的外泌體處理小鼠后可使骨轉傾向的肉瘤細胞重新定向。外泌體的蛋白質組學分析發(fā)現不同部位傾向性的肉瘤細胞來源的外泌體具有不同的整合素(integrin)表達譜,整合素α6β4和α6β1與肺轉有關,而整合素αvβ5與肝轉有關。敲低整合素α6β4和αvβ5可減少外泌體被靶部位細胞獲取,進而分別降低了肺和肝的轉移。進一步研究發(fā)現外泌體整合素被細胞獲取后活躍了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表達。通過臨床數據分析顯示外泌體整合素可作為預測肉瘤轉移的部位傾向性的診斷指標。山東鼻腔灌洗液外泌體
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