外泌體較有用的特性之一是它們穿過屏障(如細胞質(zhì)膜和血/腦屏障)的能力。這使它們成為理想的診療傳遞分子。外泌體由于其天然的材料運輸特性,固有的長期循環(huán)能力和出色的生物相容性而具有比較大的潛力成為藥物遞送載體,其適合于遞送各種化學物質(zhì),蛋白質(zhì),核酸和基因診療劑。(1)外泌體作為小分子的藥物傳遞載體:關(guān)于外泌體遞送姜黃素,多巴胺,PTX和DOX等化學診療藥物的報道已有充分文獻記載。(2)外泌體作為蛋白質(zhì)的藥物遞送載體:已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì),例如酶,細胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì)。(3)外泌體作為核酸的藥物遞送載體:研究表明,外泌體天然的可以攜帶遺傳(例如miRNA,siRNA)到靶細胞中,從而在生物學和致病過程中誘導遺傳修飾。外泌體的這些特征已成為涉及遺傳療法和使用外泌體進行研究的主要策略。外泌體的數(shù)量:人體中大約有1014個,近乎于平均每個細胞產(chǎn)生1000-10000個。上清液提取試劑盒廠家
AFC自動收集器是將qEV分離法這一過程自動化的儀器,將用來收集外泌體樣本的微量離心管放置在AFC的中間轉(zhuǎn)盤內(nèi),根據(jù)稱重精確測量流體體積,可精確的測量到樣品中每一個液滴的重量并精確測量總重量。將在空隙體積之前從qEV柱洗脫的流體收集到AFC轉(zhuǎn)盤的單獨中心孔中并送至廢液桶,避免將不需要的空隙部分收集到微量離心管中。在提取期間,當達到設(shè)定的提取體積后,轉(zhuǎn)盤會自動旋轉(zhuǎn)到下一個微量離心管繼續(xù)收集,到收集完成后自動停止。微滴式數(shù)字PCR技術(shù)不佳有效提高了核酸分子的擴增效率,而且由于采用微滴計數(shù)的方法進行定量,可以不依賴與RT-PCR的熒光信號和Ct值,對所測樣品中的核酸分子進行一定定量。從研究上來講并不太嚴格區(qū)分外泌體或微泡。上海外泌體NTA外泌體是具有生物活性的脂雙層囊泡。
外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9))、熱休克蛋白家族((HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素(不成熟的樹突狀細胞)。外泌體發(fā)揮功能:將細胞或組織中多余的或者有害的分子排除,這為研究生物標志物提供了可能。
DLS使用由于粒子的布朗運動而產(chǎn)生的波動散射光的強度來估計外泌體顆粒的大小分布及其zeta電位。DLS樣品制備方便,只需要簡單的過濾,測量速度較快,需要的樣品體積較少。但由于動態(tài)光散射技術(shù)是基于光強測量,散射光的強度與粒徑的六次方成正比,使得當測量多種粒徑的混合懸浮液時,通常會偏向于檢測較大粒徑產(chǎn)生的散射光,比較難檢測到較小顆粒。所以DLS不適合對粒徑分布較寬的外泌體樣本的測量,只適合尺寸較為均一的外泌體樣本,并且無法測量樣品中外泌體的濃度。電子顯微鏡下外泌體大小不一,通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。
細胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中,外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,由多種細胞分泌,內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、細胞因子或遺傳物質(zhì)。來源于不同的組織的外泌體不只具有其特異性蛋白分子,而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子。近年來,隨著外泌體研究的不斷深入,它的應用已經(jīng)涉及瘤子診療領(lǐng)域、醫(yī)學基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域;臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等。外泌體屬于胞外囊泡類,除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡。成都外泌體WB
外泌體作為小分子的藥物傳遞載體。上清液提取試劑盒廠家
外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成。它也由各種類型的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,這些脂質(zhì)和蛋白質(zhì)衍生自形成外泌體的親代細胞。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫ExoCarta的資料,目前已知約有8000種蛋白質(zhì)和194種脂質(zhì)與外泌體相關(guān)。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細胞分泌,包括滑膜液,母乳,血液,尿液,唾液,羊水和血液中的血清,這表明它們在細胞間通訊和觸發(fā)生理反應中起著重要的作用。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì)。簡而言之,它們是天然膜囊泡,將蛋白質(zhì),RNA,DNA和脂質(zhì)從一個細胞攜帶到另一個細胞,調(diào)節(jié)受體細胞的生物功能。上清液提取試劑盒廠家
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