外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過(guò)濾離心,這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí),不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問(wèn)題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,耗時(shí),量少。超離法是較常用的外泌體純化手段。外泌體密度梯度超速離心法
外泌體與免疫反應(yīng)、病毒致病性、妊娠、心血管疾病、中樞的神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病和病癥進(jìn)展相關(guān)。由外泌體傳遞到受體細(xì)胞的蛋白質(zhì)、代謝物和核酸有效地改變了它們的生物反應(yīng)。這種外泌體介導(dǎo)的反應(yīng)可以促進(jìn)或阻止疾病。外泌體在調(diào)節(jié)復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)通路方面的固有特性使其在許多疾病的診療控制方面具有潛在的用途,包括神經(jīng)退行性疾病和病癥。外泌體可被設(shè)計(jì)用于遞送不同的診療有效載荷,包括短干擾、反義寡核苷酸、化療藥物和免疫調(diào)節(jié)劑,并具有將其遞送到預(yù)期目標(biāo)的能力。山東CD63外泌體慢病毒外泌體作為核酸的藥物遞送載體。
DLS使用由于粒子的布朗運(yùn)動(dòng)而產(chǎn)生的波動(dòng)散射光的強(qiáng)度來(lái)估計(jì)外泌體顆粒的大小分布及其zeta電位。DLS樣品制備方便,只需要簡(jiǎn)單的過(guò)濾,測(cè)量速度較快,需要的樣品體積較少。但由于動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)是基于光強(qiáng)測(cè)量,散射光的強(qiáng)度與粒徑的六次方成正比,使得當(dāng)測(cè)量多種粒徑的混合懸浮液時(shí),通常會(huì)偏向于檢測(cè)較大粒徑產(chǎn)生的散射光,比較難檢測(cè)到較小顆粒。所以DLS不適合對(duì)粒徑分布較寬的外泌體樣本的測(cè)量,只適合尺寸較為均一的外泌體樣本,并且無(wú)法測(cè)量樣品中外泌體的濃度。
外泌體與免疫反應(yīng)、病毒致病性、妊娠、心血管疾病、中樞的神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病和病癥進(jìn)展相關(guān)。由外泌體傳遞到受體細(xì)胞的蛋白質(zhì)、代謝物和核酸有效地改變了它們的生物反應(yīng)。這種外泌體介導(dǎo)的反應(yīng)可以促進(jìn)或阻止疾病。外泌體在調(diào)節(jié)復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)通路方面的固有特性使其在許多疾病的診療控制方面具有潛在的用途,包括神經(jīng)退行性疾病和病癥。外泌體可被設(shè)計(jì)用于遞送不同的診療有效載荷,包括短干擾rna、反義寡核苷酸、化療藥物和免疫調(diào)節(jié)劑,并具有將其遞送到預(yù)期目標(biāo)的能力。外泌體研究使用血漿樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)較好。
外泌體的來(lái)源與特征:外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成,其大小均一,直徑為40-100nm,密度為1.10-1.18g/mL。外泌體可由間充質(zhì)干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和肉瘤細(xì)胞等多種類型細(xì)胞主動(dòng)分泌釋放。外泌體內(nèi)主要含有核酸、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等,可作為疾病診斷標(biāo)記物、調(diào)控靶細(xì)胞功能、參與細(xì)胞生物學(xué)活動(dòng)等。例如:含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化促進(jìn)大鼠顱骨缺損的骨再生。外泌體的數(shù)量:人體中大約有1014個(gè),近乎于平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè)。血漿血清外泌體提取試劑盒步驟
度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高。外泌體密度梯度超速離心法
外泌體的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成可以影響它們的藥代動(dòng)力學(xué)特性,它們的天然成分可能在提高生物利用度和減少不良反應(yīng)方面發(fā)揮作用。除了它們的診療潛力,外泌體也有幫助疾病診斷的潛力。它們已經(jīng)在所有的生物液體中被報(bào)道,并且通過(guò)生物液體取樣(液體活組織檢查)可以比較容易地獲得外泌體的復(fù)雜貨物的組成?;谕饷隗w的液體活檢在病癥和其他疾病的診斷和確定預(yù)后方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。疾病的進(jìn)展和對(duì)診療的反應(yīng)也可以通過(guò)外泌體的多組分分析來(lái)確定的。外泌體密度梯度超速離心法
上海宇玫博生物科技有限公司是一家有著雄厚實(shí)力背景、信譽(yù)可靠、勵(lì)精圖治、展望未來(lái)、有夢(mèng)想有目標(biāo),有組織有體系的公司,堅(jiān)持于帶領(lǐng)員工在未來(lái)的道路上大放光明,攜手共畫(huà)藍(lán)圖,在上海市等地區(qū)的醫(yī)藥健康行業(yè)中積累了大批忠誠(chéng)的客戶粉絲源,也收獲了良好的用戶口碑,為公司的發(fā)展奠定的良好的行業(yè)基礎(chǔ),也希望未來(lái)公司能成為*****,努力為行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展奉獻(xiàn)出自己的一份力量,我們相信精益求精的工作態(tài)度和不斷的完善創(chuàng)新理念以及自強(qiáng)不息,斗志昂揚(yáng)的的企業(yè)精神將**上海宇玫博生物科技供應(yīng)和您一起攜手步入輝煌,共創(chuàng)佳績(jī),一直以來(lái),公司貫徹執(zhí)行科學(xué)管理、創(chuàng)新發(fā)展、誠(chéng)實(shí)守信的方針,員工精誠(chéng)努力,協(xié)同奮取,以品質(zhì)、服務(wù)來(lái)贏得市場(chǎng),我們一直在路上!