無血清細(xì)胞凍存液相對于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢有：1.即用型，無需現(xiàn)配，直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型，適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞。3.無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存，操作簡單。4.不含血清，較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清，批次間差異小。6.無需液氮，-80℃冰箱長期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存，例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過程。無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分，含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5 ℃～-10℃/min。之前。開封無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)

細(xì)胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細(xì)胞凍存液，4℃預(yù)冷（新鮮配制的凍存液會(huì)產(chǎn)生大量的熱）；取對數(shù)生長期的細(xì)胞，用細(xì)胞消化酶將單層生長的細(xì)胞消化下來；懸浮細(xì)胞則直接將細(xì)胞收集到離心管中；離心1200rpm，6min；去除上清液，逐漸加入適量預(yù)冷的細(xì)胞凍存液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中的細(xì)胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml；將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1~1.5ml；在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱、凍存時(shí)間及操作人員姓名；凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min；到達(dá)-80℃時(shí)，則可迅速放入液氮中。徐州濟(jì)南無血清細(xì)胞凍存液無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：不含動(dòng)物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染。

細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的：當(dāng)溫度進(jìn)一步下降，細(xì)胞內(nèi)外都結(jié)冰，產(chǎn)生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑，則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。因?yàn)槔鋬霰Ｗo(hù)劑容易同溶液中的水分子結(jié)合，從而降低冰點(diǎn)，減少冰晶的形成，并且通過其摩爾濃度降低未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，使細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷，細(xì)胞得以在較低溫條件下保存。在復(fù)蘇時(shí)，一般以很快的速度升溫，1-2分鐘內(nèi)即恢復(fù)到常溫，細(xì)胞內(nèi)外不會(huì)重新形成較大的冰晶，也不會(huì)暴露在高濃度的電解質(zhì)溶液中過長的時(shí)間，從而無冰晶損傷和溶質(zhì)損傷產(chǎn)生，凍存的細(xì)胞經(jīng)復(fù)蘇后仍保持其正常的結(jié)構(gòu)和功能。

無血清細(xì)胞凍存液的操作規(guī)范：1、培養(yǎng)細(xì)胞至對數(shù)生長晚期，顯微鏡觀察其外觀、形態(tài)、有無污染等。選擇狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存操作(注：貼壁生長細(xì)胞，用胰蛋白酶消化并用完全培養(yǎng)基終止消化，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);懸浮生長細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù))。2、500～1000g離心5min，棄上清。3、加入適量的細(xì)胞凍存液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1～10×106/ml，置于凍存管中密閉。4、采取逐級降溫保存：4℃放置20min，-20℃放置30min，-70℃過夜，置于液氮罐中長期存儲。注意：務(wù)必超凈工作臺內(nèi)無菌操作，避免污染。雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)應(yīng)定期復(fù)蘇，以檢查細(xì)胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：通常細(xì)胞凍存液的配方是由胎牛血清加上DMSO組成。

復(fù)蘇方：法1）從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管，立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2）待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。3）離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4）清洗細(xì)胞，充分洗凈殘留凍存液。5）加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6）鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。無血清凍存液使用方法：儲存條件：2-8C保存，年有效：-20C保存，兩年有效。徐州濟(jì)南無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液，2-8℃保存即可，無需再進(jìn)行分裝。開封無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)

無血清細(xì)胞凍存液：解凍解凍后，應(yīng)該立即鋪板在預(yù)先包被好的培養(yǎng)皿中。上述凍存的一管細(xì)胞可以成功的鋪板到6孔板的1-2孔。1.開始之前，提前準(zhǔn)備好以下材料：試管，恢復(fù)至室溫的培養(yǎng)基，預(yù)先包被的培養(yǎng)板，確保整個(gè)解凍復(fù)蘇程序可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成。注意：不要在37°C水浴中加熱培養(yǎng)基。2.在37°C水浴中快速解凍，持續(xù)溫和的在水中晃動(dòng)凍存管，直到剩余少量細(xì)胞還處于凍存狀態(tài)。3.水浴中取出凍存管，用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。4.用2mL的血清移液管把細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到一個(gè)15mL的錐形試管。注意：用2mL的血清移液管代替1mL的頭可以減少細(xì)胞聚集體的分解。開封無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)