實驗應(yīng)用：鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式，為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片，以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細胞，培養(yǎng)7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)，應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻，平均厚度約為1mm；HE染色可見上皮細胞呈單層向周圍爬開；掃描電鏡下見纖毛上皮細胞呈不規(guī)則多角形，纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細胞間為緊密連接；同一細胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的；同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的.結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立，為今后研究鼻內(nèi)用藥對纖毛清理功能的影響提供了良好的方法和途徑。鼠尾膠原蛋白的用途很普遍，可用于化妝品，工業(yè)和食品生產(chǎn)等領(lǐng)域。寧波鼠尾膠原產(chǎn)品介紹

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10PBS，使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。B．含細胞的三維膠原的制備（以配制200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入23ul10PBS10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項型在室溫下pH中性時可迅速成膠，在操作過程中要盡量保持低溫。鼠尾肌腱膠原蛋白I（rattailtendoncollagentypeI）根據(jù)Birkedal-Hansen方法，經(jīng)過醋酸（HAc）抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備所得。北京正規(guī)鼠尾膠原廠家鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH 7左右時可形成具有一定強度三維膠。

膠原蛋白的提取方法：酶法提?。好阜ㄌ崛∈抢玫鞍酌甘鼓z原溶解，水解條件溫和，反應(yīng)速率快，提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結(jié)構(gòu)，蛋白純度高，理化性質(zhì)穩(wěn)定，且無環(huán)境污染。酶法提取常用的蛋白酶有：胃蛋白酶、胰蛋白酶或者復(fù)合酶。工藝可選擇一步法，即利用酶液直接提??；二步法，即先用酸或者堿進行初步提取，然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO預(yù)處理革屑，然后用堿性蛋白酶提取膠原的水解產(chǎn)物。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶，再用堿性蛋白酶提取了2種不同的膠原水解產(chǎn)物。趙蒼碧等[2]采用胃蛋白酶和無花果蛋白酶消化法從牛腱中提取膠原蛋白，探討了酶和酶的加入量對提取結(jié)果的影響，給出了酶對膠原提取較佳工藝配比，酶與牛腱的質(zhì)量比為0.1時效果較佳，而使用無花果蛋白酶時，0.01的配比較佳。

含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果。

以鼠尾膠原為支架的類似物的建立：探尋建立類似物的培養(yǎng)方法。方法：原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細胞，制備鼠尾膠原，將鼠尾膠原溶液、濃縮培養(yǎng)基、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細胞溶液在適當?shù)谋壤禄旌虾笮纬赡z構(gòu)建類似物。結(jié)果：形成的類似物中成纖維細胞生長狀態(tài)良好，并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力。結(jié)論：①利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物，該模型是進行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ)；②成纖維細胞膠原凝膠復(fù)合物有著良好的生物學(xué)特性，它是研究成纖維細胞與細胞外基質(zhì)之間以及細胞之間相互作用的良好模型。鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基，它具有促進體外培養(yǎng)細胞（特別是上皮細胞）貼壁的作用。武漢鼠尾膠原哪家便宜

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對于生物科研汪們來說，大白鼠、小白鼠們簡直渾身是寶，從毛發(fā)、皮膚，到心肝脾肺，甚至各種排泄物，都是我們重要的研究對象。尾巴，自然也是。所以耗子尾汁不僅存在，甚至是我們生物實驗中必不可少的實驗材料和實驗對象。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊。沒有「耗子尾汁」，很多課題可能都沒辦法開展。在以小鼠為模式生物進行科學(xué)研究的實驗室中，日常和基本的一個實驗就是提取它們的遺傳物質(zhì)—DNA（脫氧核糖核酸）進行基因型鑒定，檢測這些小動物的基因組中是否含有特定的DNA。可以理解為給小動物做核酸檢測。寧波鼠尾膠原產(chǎn)品介紹