常用總RNA提取試劑:異硫氰酸胍法和Trizol法是動物組織及動物細胞總RNA提取較常用的方法,異硫氰酸胍法操作簡單快捷,適用于樣本足夠大的常規(guī)動物組織;Trizol法裂解能力較強,尤其適合小樣本及特別難提取的組織,如兔子皮膚,動物結締組織等總RNA的提??;另外Trizol作為一種通用型的裂解試劑,還可以用于植物組織、細菌、菌類等組織的提取。對于含多糖多酚的植物組織如油茶、茶葉、油菜等還可以使用CTAB法進行總RNA的提取。提取RNA時我們經常遇到的問題是:(1)RNA產量較低;(2)RNA有嚴重的鹽類污染;(3)RNA有嚴重的有機溶劑污染;(4)樣品降解等問題。即用型RNA,可在絕大多數(shù)下游應用。太原RNA提取試劑進貨價
與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補配對原則,轉錄而形成的一條單鏈,主要功能是實現(xiàn)遺傳信息在蛋白質上的表達,是遺傳信息向表型轉化過程中的橋梁。在此過程中,轉運RNA是攜帶與三聯(lián)體密碼子對應的氨基酸殘基與正在進行翻譯的mRNA結合,而后核糖體RNA將各個氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進而構成蛋白質分子。有些生物,例如一些病菌,也直接使用RNA作為遺傳信息的載體,而不是DNA。青島RNA提取試劑推薦廠家RNA提取試劑注意事項:TRIReagent抽提總RNA的同時,理論上也可抽提蛋白和DNA。
植物RNA快速提取試劑盒:是一種單相RNA快速提取試劑盒,可高效裂解堅固的植物細胞并強烈壓制RNA酶活性。細胞破碎之后,植物多糖立即被PlantRNAtrip獨特的成分結合。離心抽提步驟將RNA與滅活的RNA酶、蛋白、基因組DNA污染分離,并清理植物多糖多酚以及次生代謝產物。在RNA沉淀之前加入PlantRNAAid清理植物多酚,并清理殘余的多糖。提取可在60分鐘內完成,所提取的RNA純度極高,不含DNA和多糖和多酚污染,可用于構建cDNA文庫、RT-PCR、Northern轉印分析、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯、和RNA酶保護實驗。適于各種植物組織RNA提取,也特別適合富含糖原的動物肝臟和肌肉組織提取高純度RNA。如果植物組織富含多酚和次生代謝產物,推薦使用PlantRNAExtractionkit(R1050)。
RNA組成結構:RNA和DNA一樣,也是由各種核苷酸通過3′,5′-磷酸二酯鍵連接構成的多核苷酸鏈,但與DNA有一系列差異。1.在化學組成方面,RNA含核糖而不含脫氧核糖。含尿嘧啶而不含胸腺密啶。例外的是,每個tNA分子含有一個胸腺嘧啶,這是在RNA鏈合成后由尿嘧啶甲基化生的,此外,前面已提到,少數(shù)DNA含有少量核糖,但這些個別的例外并不能以此否定兩類核酸組成上的差異。2.RNA一級結構的概念雖與DNA相同.但其基本結構單位是核糖核苷酸而不是脫氧核糖核苷酸。此外,部分RNA5′端或3′端有特殊的核苷酸序列,而且RNA一級結構中沒有DNA那樣復雜的順序組織。3.絕大多數(shù)RNA為單鏈分子,單鏈可自身折迭形成發(fā)夾(hairpin)樣結構而有局部雙螺旋結構的特征,這是各種RAN空間結構的共同特征。RNA局部雙螺旋結構中堿基互補配對規(guī)律是A對U和G對C。由于RNA分子內部不能較全形成堿基配對,故其堿基克分子比A不等于U,G不等于C,不存在DNA堿基比例的Chargaff規(guī)律。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。
石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒(離心柱型):原理簡介:改進的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將細胞代謝物、蛋白等雜質去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA(RNA)從硅基質膜上洗脫。試劑盒特點:1、離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復性好??朔藝a試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。2、結合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨有的MRL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程,提取RNA純度更高。RNA提取試劑注意事項:使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些。廣州正規(guī)RNA提取試劑哪家便宜
根據(jù)它們在不同的PH值和不同極性溶劑的溶解度不同而使得分開。太原RNA提取試劑進貨價
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的,利用吸附柱法從血清、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質膜材料,對RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結合能力,與常用的抗凝劑(包括肝素、EDTA、檸檬酸鈉、草酸鈉)兼容,得到的miRNA可直接用于RT-PCR和Northern雜交等后續(xù)分子生物學實驗操作。普通植物總RNA提取試劑盒:采用進口硅基質膜制作的總RNA吸附柱,可以從普通植物的根、莖、葉中快速提取總RNA,30~40分鐘內即可完成提取過程,提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質的污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實驗??俁NA吸附柱保證RNA提取速度快,提取效率高。高效去除植物組織中的色素、酚類等雜質,提取RNA的純度高,產量大。太原RNA提取試劑進貨價
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...