細(xì)胞RNA提取的方法:異丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以見到側(cè)壁沉淀,輕輕吸棄上清。向EP管中加入75%酒精洗滌沉淀,幫助分離剩余的有機(jī)試劑(剩余有機(jī)試劑過多會(huì)影響OD值和PCR反應(yīng)),輕彈沉淀,使其浮在酒精,靜置1-2min,讓酒精充分接觸沉淀,充分溶解有機(jī)試劑,然后4度離心5min。輕輕吸棄上清。將EP管再次放于離心機(jī)中瞬時(shí)離心,棄掉管壁殘余液體。然后將EP管置于超凈臺(tái)中干燥5-10min.。注意RNA樣品不要過于干燥,否則很難溶解。加入50ulDEPC處理水,震蕩充分溶解沉淀。測量RNA濃度。將RNA保存于-80度。RNA提取試劑注意事項(xiàng):為防止濺入眼睛,請戴防護(hù)眼鏡或使用透明保護(hù)屏。寧波太原RNA提取試劑
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒:無DNA污染,可直接反轉(zhuǎn)錄,熒光定量,不會(huì)出現(xiàn)洗脫液含絡(luò)合Mg離子成分,壓制后續(xù)PCR反應(yīng)的情況。本試劑盒提取的RNA可直接用于對前期RNA提取質(zhì)量非常高的后續(xù)實(shí)驗(yàn),如轉(zhuǎn)錄組RNA測序,制作基因芯片,熒光定量PCR,核酸雜交,反轉(zhuǎn)錄等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)。一個(gè)樣十多分鐘搞定!具有多糖多酚植物RNA提取試劑盒已普及到全國各大農(nóng)業(yè)大學(xué),農(nóng)科院,植物所等相關(guān)院校單位,包括中國農(nóng)業(yè)大學(xué),中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)所,作物所,蔬菜所,多糖多酚植物RNA提取試劑盒由華越洋自主研發(fā)生產(chǎn),博取眾家之長,根據(jù)多年來市場反饋不斷進(jìn)行技術(shù)升級和改良得來。具有操作步驟少,實(shí)驗(yàn)快捷,RNA產(chǎn)量純度高,充分滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的需要,適用提取樣品普遍等特點(diǎn)。產(chǎn)量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上。得到的RNA無DNA污染,可直接用于反轉(zhuǎn)錄,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(尤其對RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn)珠海正規(guī)RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨RNA提取試劑注意事項(xiàng):使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些。
RNA指的是核糖核酸。真核生物體的遺傳物質(zhì)存在于細(xì)胞核內(nèi),多數(shù)的真核生物使用DNA也就是脫氧核糖核酸來作為遺傳的中心物質(zhì),但是少量的病菌遺傳物質(zhì)可以是RNA。正因?yàn)椴【倪z傳物質(zhì)是RNA,所以可以通過檢測病菌的RNA是否存在,或者其濃度和含量來判斷是否存在相應(yīng)的病菌傳染,傳染的程度及病菌是否仍在大量復(fù)制。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤、G鳥嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。RNA是核糖核酸的縮寫。存在于生物細(xì)胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團(tuán)結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上,同時(shí)使污染物通過柱被有效地洗去。
Trizol法是一種新型總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶。雖然Trizol里面含有RNA酶壓制劑的,1ml的Trizol一般較多只能裂解100mg的組織。但是如果組織過量,Trizol無法完全浸潤組織無法完全裂解組織,多余組織內(nèi)的RNA酶等物質(zhì)會(huì)導(dǎo)致RNA的降解。這是RNA降解的很重要的原因。同時(shí),由于RNA容易降解,在實(shí)驗(yàn)過程中一般都要求口罩的,避免組織的污染。同時(shí)選用的無RNA酶的進(jìn)口泵頭、EP管以及DEPC水,在提取過程中,一定要時(shí)刻提醒自已RNaseFree-RNaseFree-RNaseFree,實(shí)驗(yàn)就成功一半啦~RNA提取試劑注意事項(xiàng):有機(jī)相用異丙醇沉淀可回收蛋白。
植物RNA快速提取試劑盒:1.固體組織破碎設(shè)備??捎孟铝醒b置之一:1)玻璃勻漿器。泡酸清潔,用高壓滅菌蒸餾水洗滌數(shù)次。2)研缽。適用于液氮凍存組織的研磨,清洗方法同玻璃勻漿器。3)高速機(jī)械勻漿器(Polytron,Tekmar或類似產(chǎn)品),打開開關(guān),在蒸餾水中清洗分散器頭數(shù)次。2.高壓蒸汽30分鐘消毒一次性吸頭離心管。RNA沉淀溶解之后,應(yīng)嚴(yán)格使用高壓消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染環(huán)境下工作,在裂解步驟可使用未高壓但潔凈的一次性吸頭和離心管,但光推薦在緊急情況下這樣做。3.普通雙蒸水,高壓消毒20分鐘。用于沖洗器皿,配制瓊脂糖凝膠和電泳用緩沖液。DEPC處理的雙蒸水。加DEPC到水中至終濃度為0.01%v/v,室溫過夜,高壓消毒30分鐘。用于溶解RNA,配制TE緩沖液和75%乙醇。4.濕冰。在冰上進(jìn)行操作有助于減少RNA降解。5.其它用品。電泳槽,雙蒸水沖洗。離心機(jī)和加樣器,無需處理。6.戴手套。注意某些實(shí)驗(yàn)如提取質(zhì)粒DNA如使用極大量RNA酶,為防污染,須較全仔細(xì)清洗實(shí)驗(yàn)器具和實(shí)驗(yàn)區(qū)域。細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA。貴陽正規(guī)RNA提取試劑產(chǎn)品介紹
RNA提取試劑注意事項(xiàng):盡量不要對著RNA樣品說話,以防RNA酶污染。寧波太原RNA提取試劑
植物花總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,配合特殊的提取緩沖液,可以從多糖多酚植物的根、莖、葉以及花組織中快速提取總RNA,40~60分鐘內(nèi)即可完成提取過程,提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn)。特殊的提取緩沖液保證特殊植物材料中的總RNA充分溶解??俁NA提取速度快,提取效率高。有效去除植物花組織中的多糖、多酚類等雜質(zhì),提取純度高。細(xì)菌總RNA提取試劑盒:本試劑盒可以快速從細(xì)菌體內(nèi)提取總RNA,提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn)。吸附柱特異吸附總RNA,提取速度快。提取效率高。有效去除蛋白質(zhì)、鹽類、脂類等雜質(zhì),提取純度高。寧波太原RNA提取試劑
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上。保存在7...