無血清凍存液通用于各種動物細胞株（tumour細胞和常規(guī)細胞），凍存細胞可在-80℃長期保存（>5年）。配方成分明確，不含動物來源性蛋白，不含血清，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分，提高細胞存活率和活力，亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。該產(chǎn)品添加了細胞沉降穩(wěn)定劑，可延緩細胞在凍存過程中的沉降速率，防止細胞互相擠壓，影響細胞凍存效果。另外，添加了細胞膜保護劑、滲透性細胞膜內(nèi)保護劑、非滲透性細胞保護劑等多種冷凍保護劑，這些成分在溶液中同水分子結(jié)合，發(fā)生水合作用，弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而少冰晶的形成，能較大降低細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷，有效提高細胞復(fù)蘇存活率。該產(chǎn)品配方成分明確，不含血清、不含動物源性蛋白，可減少各類細菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細胞的安全；不光適用于常規(guī)細胞系、原代細胞，同時亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。一些保護劑，易于穿透細胞，避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞。重慶無血清細胞凍存液進貨價

無血清細胞凍存：在細胞培養(yǎng)中，細胞凍存是較關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，尤其在細胞治好、細胞存儲中對細胞凍存更有特殊要求，下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細胞凍存做詳細介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分，細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程序降溫法）與快速凍存（非程序降溫法）。程序降溫凍存技術(shù)要點是慢凍，標準的凍存程序為降溫速率-1～-2/℃min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min。之前，常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--20℃60分鐘--80℃過夜-液氮罐。不過，由于步驟較多，間隔時間又長，很容易遺忘。之后，人們也開始使用程序降溫盒。將凍存管放入程序降溫盒中，再將程序降溫盒放入-80℃冰箱。以1℃/min的速度進行降溫。南京正規(guī)無血清細胞凍存液銷售廠家細胞存儲中對細胞凍存更有特殊要求。

無血清快速細胞凍存液凍存細胞復(fù)蘇方法：1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4.清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。6.鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。

無血清細胞凍存液與含血清細胞凍存液對比：傳統(tǒng)的細胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，統(tǒng)稱為含血清細胞凍存液。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時（或隔夜），較后才移至液氮罐中進行長期的儲存?？梢?，含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題：1.凍存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液，此步可省略)。2.需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮），步驟繁瑣，耗時耗力。3.含血清，細胞污染(病毒、霉菌和支原體等)的風險更高。4.血清批次、品質(zhì)間差異導致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存，且不能原位（如孔板）凍存?？梢苑乐够驕p少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。

細胞凍存液的操作步驟：1.配置含10%DMSO或凡士林、10～20%小牛血清的凍存細胞培養(yǎng)液;2.取對數(shù)成長期的體細胞，除去舊細胞培養(yǎng)液，用PBS清理。3.除去PBS，添加適量蛋白酶(遮蓋細胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長發(fā)育的體細胞消化吸收出來;4.抽濾1000rpm，5min;5.除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細胞培養(yǎng)液，用塑料吸管輕輕地吹打使體細胞勻稱，記數(shù)，調(diào)整凍存液中體細胞的較后相對密度為5牙周106/ml～1牙周107/ml;6.將體細胞分裝進凍存管中，每管1～1.5ml;7.在凍存管上標出體細胞的名字，凍存時間及作業(yè)者;8.凍存：標準的凍存程序流程為減溫速度-1～-2℃/min;當溫度達-25℃下列時，可升至-5℃～-10℃/min;到-100℃時，則可快速滲入液態(tài)氮中。凍存細胞可直接存放于-80℃冰箱，穩(wěn)定保存數(shù)年。唐山正規(guī)無血清細胞凍存液進貨價

無血清凍存液特性：適合無血清培養(yǎng)細胞與含血清培養(yǎng)細胞。重慶無血清細胞凍存液進貨價

無血清細胞凍存液與含血清細胞凍存液對比：細胞凍存是細胞培養(yǎng)技術(shù)中細胞進行保種并長期保存的常用方法，其中細胞凍存液，作為細胞凍存時必須使用的一種溶液，不光光是說只是用來進行細胞的保存，在細胞的購買、寄贈、交換和運送過程中也起著關(guān)鍵作用，因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細胞，細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等，從而引起細胞死亡。而細胞凍存液就相當于細胞的保護劑，在凍存細胞時將細胞懸浮于凍存液中，可使冰點降低，提高細胞膜對水的通透性，在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細胞，可以防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。這樣就使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，在需要時直接復(fù)蘇就可恢復(fù)細胞活性。重慶無血清細胞凍存液進貨價