通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒1、高純度:試劑盒的進(jìn)口吸附柱具有的專一吸附特性和強(qiáng)吸附力。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度,前期得到的高質(zhì)量RNA才能保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)成功,尤其是對熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)等。2、無DNA污染可直接用于熒光定量PCR:目前市面上的試劑盒大多提出的RNA會出現(xiàn)DNA污染其結(jié)果嚴(yán)重影響后續(xù)實(shí)驗(yàn),特別是非常靈敏的熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn)。一些市面上單獨(dú)賣的去DNA污染的試劑,效果不穩(wěn)定,去除DNA污染不徹底。本產(chǎn)品操作簡單,去除DNA徹底,得到的RNA樣品可直接用于熒光定量PCR,反轉(zhuǎn)錄等各種后續(xù)實(shí)驗(yàn)。RNA提取試劑注意事項(xiàng):其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,滅菌,烘干。寧波正規(guī)RNA提取試劑推薦廠家
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:RNA完整性的電泳檢測:如果需要做Northern雜交,強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳,因?yàn)榉亲冃阅z不能分離所有的RNA分子。注意:大部分昆蟲的28SRNA被切割成兩個小的片段,彼此用氫鍵相連,所以在甲醛變性膠中,沒有28S帶出現(xiàn)。RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定:將5~10μLRNA溶于TE緩沖液中(pH7.5~8.2之間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1OD260的RNA=40μg/mL),進(jìn)而計(jì)算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。RNA純度測定:無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8~2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。石家莊RNA提取試劑推薦廠家快速程序在25-40分鐘內(nèi)提供高質(zhì)量的總RNA。
細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn):1.有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA,與細(xì)胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式。3.提取的RNA,品質(zhì)高,產(chǎn)量多。4.試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA(含MicroRNA)。5.純化的RNA可用于任何應(yīng)用,包括RT-PCR,qRT-PCR,RNA-Seq,陣列等。6.細(xì)胞質(zhì)RNA不含DNA,可直接用于RT-PCR/qRT-PCR。7.試劑盒可用于哺乳動物細(xì)胞或者組織樣品的提取。在某些情況下,研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA,而不是總RNA。例如,在一些表達(dá)譜研究中,較好能夠提取成熟的細(xì)胞質(zhì)(Cytoplasmic)RNA?;蛘?,在研究分析未剪接的RNA前體時,提取細(xì)胞核(Nuclear)RNA會是一個更好的選擇。然而,市面上絕大多數(shù)廠家只能為您分別提供2種試劑盒來提取細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核的RNA,不僅費(fèi)用高昂,而且浪費(fèi)大量的材料與時間。
RNA試劑盒:用于各種植物、動物、微生物的RNA提取,在每個試劑盒里都有一份說明使用說明書。實(shí)驗(yàn)者只需要按照說明書上的步驟操作即可。使用時無需配制其它試劑,非常方便,適合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好、純度高,可用于分子生物學(xué)后實(shí)驗(yàn)。但較好的試劑盒價格比較貴,在實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要來定奪試劑盒的使用。注意事項(xiàng)所有相關(guān)器皿耗材都應(yīng)為RNase-free產(chǎn)品,操作過程要小心,帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之間,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測。RNA提取試劑:能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇。
RNA提取注意事項(xiàng):1、組織樣本要盡可能的新鮮,避免反復(fù)凍融。2、提取時組織要充分研磨,組織量不宜過少,更不宜過多。3、加入裂解液后應(yīng)給予充分的孵育時間,使樣本充分裂解。4、在用Trizol法提取時,分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸,不能多吸”,千萬不能提取到中間層,否則會導(dǎo)致嚴(yán)重的基因組DNA污染。5、洗滌時洗滌液應(yīng)充分浸潤到管壁的四周,確保洗滌徹底。6、柱式提取法,洗滌完后除了對柱子進(jìn)行空離后,還應(yīng)當(dāng)將吸附柱置于超凈臺內(nèi)吹風(fēng)5~10min,使有機(jī)溶劑充分揮發(fā)干。7、柱式法較后洗脫時候,當(dāng)加入DEPC水后還應(yīng)孵育3~5min,或者提前將DEPC水加熱至60℃,可提高洗脫得率。傳統(tǒng)的Trizol裂解異丙醇沉淀法較后RNA是用DEPC水溶解沉淀,則應(yīng)當(dāng)給予適當(dāng)溶解時間,并用泵頭不斷吹吸離心管底部。實(shí)驗(yàn)者只需要按照說明書上的步驟操作即可。使用時無需配制其它試劑,非常方便,適合于RNA的快速提取。廣州RNA提取試劑哪里買
血漿/血清RNA提取試劑盒:對RNA尤其是smallRNA(<200nt)具有結(jié)合能力。寧波正規(guī)RNA提取試劑推薦廠家
植物RNA快速提取試劑盒:1.固體組織破碎設(shè)備。可用下列裝置之一:1)玻璃勻漿器。泡酸清潔,用高壓滅菌蒸餾水洗滌數(shù)次。2)研缽。適用于液氮凍存組織的研磨,清洗方法同玻璃勻漿器。3)高速機(jī)械勻漿器(Polytron,Tekmar或類似產(chǎn)品),打開開關(guān),在蒸餾水中清洗分散器頭數(shù)次。2.高壓蒸汽30分鐘消毒一次性吸頭離心管。RNA沉淀溶解之后,應(yīng)嚴(yán)格使用高壓消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染環(huán)境下工作,在裂解步驟可使用未高壓但潔凈的一次性吸頭和離心管,但光推薦在緊急情況下這樣做。3.普通雙蒸水,高壓消毒20分鐘。用于沖洗器皿,配制瓊脂糖凝膠和電泳用緩沖液。DEPC處理的雙蒸水。加DEPC到水中至終濃度為0.01%v/v,室溫過夜,高壓消毒30分鐘。用于溶解RNA,配制TE緩沖液和75%乙醇。4.濕冰。在冰上進(jìn)行操作有助于減少RNA降解。5.其它用品。電泳槽,雙蒸水沖洗。離心機(jī)和加樣器,無需處理。6.戴手套。注意某些實(shí)驗(yàn)如提取質(zhì)粒DNA如使用極大量RNA酶,為防污染,須較全仔細(xì)清洗實(shí)驗(yàn)器具和實(shí)驗(yàn)區(qū)域。寧波正規(guī)RNA提取試劑推薦廠家
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...