糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面:Schiff氏染液的配制是關(guān)鍵,尤其是偏重亞硫酸鈉的質(zhì)量,打開應(yīng)是粉劑,且?guī)в辛虻臍馕?,若成團(tuán)或沒(méi)有氣味,則不能用,配制時(shí)使用的容器、藥勺、稱藥天平與稱藥紙等必須潔凈、無(wú)污染。新配制好的Schiff劑為無(wú)色透明液體[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用時(shí)取一份恢復(fù)到室溫即可。沈洪武等通過(guò)對(duì)比染色發(fā)現(xiàn),冷凍保存1年的Schiff液的染色結(jié)果與新鮮配制的染色結(jié)果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之間),環(huán)境溫度以不高于20℃為宜,室溫高時(shí)氧化時(shí)間適當(dāng)縮短;如果染色時(shí)環(huán)境溫度較高且高碘酸作用時(shí)間長(zhǎng),可使某些物質(zhì)成分發(fā)生非特異反應(yīng),使染色結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。因此,室溫較高時(shí)可適當(dāng)縮短反應(yīng)時(shí)間。糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷。上海糖原染色試劑盒單價(jià)
染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測(cè)出來(lái)。由于絕大多數(shù)植物沒(méi)有檢測(cè)到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個(gè)基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測(cè)所用的底物不同,可以選擇三種檢測(cè)方法:組織化學(xué)法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測(cè)法較高)。其中較為常用的是組織化學(xué)法。浙江品牌糖原染色試劑盒推薦廠家對(duì)某種鹽基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺藍(lán)有異染性。
糖原染色正常值:正常情況下,紅細(xì)胞系統(tǒng)的原、幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞;粒細(xì)胞系統(tǒng)的原粒細(xì)胞、原單核細(xì)胞和大多數(shù)淋巴細(xì)胞為陰性反應(yīng)。自早幼粒階段以后的粒細(xì)胞和幼單核細(xì)胞可呈弱陽(yáng)性反應(yīng)。糖原染色臨床意義:(1)急性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病、戈謝病的原始細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)或陽(yáng)性反應(yīng);缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽(yáng)性反應(yīng);急性粒細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病、良性淋巴細(xì)胞增多癥、尼曼-皮克細(xì)胞呈陰性反應(yīng)或弱陽(yáng)性反應(yīng)。巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血等,幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng)。偶有個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)。(2)幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞,巨核細(xì)胞呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng);霍奇金細(xì)胞呈弱陽(yáng)性或陰性反應(yīng)。(3)幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,腺細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)。
糖原染色的參考值及臨床意義:1.慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴肉瘤等惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病,其淋巴細(xì)胞的PSA染色積分值增高;等淋巴細(xì)胞良性增生時(shí),淋巴細(xì)胞積分值正常。醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理故該試驗(yàn)可用于鑒別良性與惡性淋巴細(xì)胞增生性疾病。2.紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞的PAS染色呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),積分值增高;溶血性貧血及巨幼細(xì)胞性貧血時(shí),幼紅細(xì)胞的PAS染色積分值在正常范圍內(nèi),故該試驗(yàn)也可用于紅白血病的診斷及鑒別幼紅細(xì)胞增多的性質(zhì)。3.急性粒細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚粒細(xì)胞PAS染色常呈陰性反應(yīng);急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚淋巴細(xì)胞常呈陽(yáng)性反應(yīng);急性單核細(xì)胞白血病時(shí),原始及幼稚單核細(xì)胞多呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)。故PAS染色有助于三種急性白血病類型的鑒別。主要用來(lái)顯示糖原和其他多糖物質(zhì),因此也稱作糖原染色。
糖類染色:糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來(lái)分,可分為多糖、中性粘液物質(zhì)、酸性粘液物質(zhì)、粘蛋白及粘脂質(zhì)。多糖主要指糖原,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞、骨骼肌、心肌等處。因糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變,故糖原的染色在臨床病理診斷上具有重要意義。(1)肝及心肌糖原沉著癥的診斷:糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。(2)糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷。(3)高雪氏病與尼曼——匹克氏病的鑒別:前者為陽(yáng)性、后者為陰性,做此染色較易鑒別。(4)骨內(nèi)骨外尤文氏肉瘤的診斷:此瘤80%細(xì)胞內(nèi)有較多糖原,糖原染色為陽(yáng)性,所以糖原染色為陽(yáng)性(大多數(shù)細(xì)胞)可以協(xié)助診斷。(5)腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽(yáng)性。遇醋酸發(fā)生沉淀,胃粘蛋白則除外。浙江品牌糖原染色試劑盒推薦廠家
如用無(wú)水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病。上海糖原染色試劑盒單價(jià)
糖原pas染色液配制及使用方法:1、常規(guī)固定,常采用10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。3、自來(lái)水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2次。4、入過(guò)碘酸溶液,室溫放置,一般不宜超過(guò)10min。5、自來(lái)水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室溫陰暗處浸染。7、自來(lái)水沖洗10min。8、入蘇木素染色液,染細(xì)胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x000c_10、自來(lái)水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗,使其返藍(lán)。11、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。上海糖原染色試劑盒單價(jià)
網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,大量堆積時(shí)則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),血管周圍以及造血部位,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維。網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過(guò)程,對(duì)疾病的診斷有極大意義。網(wǎng)狀纖維的多少、粗細(xì)緊密、疏松或斷裂,都是病理檢驗(yàn)的重要指標(biāo),尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來(lái)鑒別與肉瘤。而在HE染色標(biāo)本上,網(wǎng)狀纖維不易顯色。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置亞硫酸鈉須有濃厚氣味,器皿必須潔...