鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基，它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞（特別是上皮細(xì)胞）貼壁的作用，同時(shí)它也是一種天然的黏附劑，當(dāng)我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片，制備細(xì)胞爬片時(shí)，可在瓶底涂一層膠原，再放上小玻片，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。通過本實(shí)驗(yàn)可掌握鼠尾膠原的制備方法，以及如何切割小玻片，并利用鼠尾膠原將其固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀、鑷子、止血鉗、彎頭吸管、平皿、三角燒瓶、燒杯、量筒、天平、生理鹽水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、蓋玻片、培養(yǎng)瓶、鉆石筆、鼠尾膠原。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1、制備鼠尾膠原。2、切割小玻片。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便，成本低廉。鼠尾膠原醋酸溶解：稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。唐山正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家

一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，調(diào)節(jié)pH=6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中，不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出，4°C沉淀10小時(shí)，去除上清液，去除上清液，絮狀溶液高速冷凍離心處理，收集沉淀；2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液，冰水浴中，調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進(jìn)行脫鹽處理；(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液，-40至-20°C預(yù)凍2?4小時(shí)，然后真空冷凍干燥，凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉，滅菌、包裝，得到成品膠原蛋白粉末。貴陽鼠尾膠原平均價(jià)格布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄。

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞需要貼附在培養(yǎng)皿表面（懸浮培養(yǎng)細(xì)胞除外）才能完成生長(zhǎng)過程，而有一些細(xì)胞卻總是不太給力，自己完成不了貼壁過程或者貼壁困難，這個(gè)時(shí)候鼠尾膠原蛋白就能承擔(dān)起讓細(xì)胞更容易貼壁的作用。這一步也被稱作涂層（coating），給培養(yǎng)皿涂上了一層膠原蛋白后，細(xì)胞就能更好地貼附上去，除了培養(yǎng)皿，一些需要使用海藻碳酸鈣微球培養(yǎng)得細(xì)胞，同樣也可以用鼠尾膠原蛋白協(xié)助細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)。耗子尾汁還能變得更加，一種被稱作鼠尾膠原蛋白的“珍貴”液體就來自大鼠的尾巴，制作過程需要經(jīng)歷醋酸抽提

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：兩組培養(yǎng)皿中，隨著過氧化氫濃度的增高，均可見細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯加重，細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)過氧化氫活力明顯下降，細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高，Bcl-2/Bax比值明顯降低，呈劑量依賴性。而在相同濃度過氧化氫誘導(dǎo)下，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯減弱，細(xì)胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高，細(xì)胞凋亡率和丙二醛水平明顯減低。表明鼠尾膠原對(duì)過氧化氫所致的心肌細(xì)胞氧化損傷具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與提高超氧化物歧化酶活力，減少丙二醛產(chǎn)生及提高Bcl-2的表達(dá)有關(guān)。鼠尾膠原醋酸溶解：在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜。

膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一，不論來源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。膠原蛋白可分為20幾個(gè)亞型，但為常見的為I、II、III型膠原蛋白，即間質(zhì)膠原蛋白。其中I型為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。劃重點(diǎn)：任何動(dòng)物的膠原都有許多共性，I型膠原蛋白為豐富且品質(zhì)優(yōu)良，鼠尾膠原蛋白是I型膠原蛋白。于是，動(dòng)物中心就進(jìn)行了有關(guān)“耗子尾汁”的發(fā)明：一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說明書中給出了原因：“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型，之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取，但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質(zhì)，制備鼠尾膠原：吸取上清，分裝成小瓶，4℃保存。開封鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨

鼠尾膠原醋酸溶解：不建議用過濾的方法無菌化。唐山正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家

三維膠原的制備：鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水A．不含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。唐山正規(guī)鼠尾膠原生產(chǎn)廠家

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