對RNA的科學(xué)研究,首先要從植物或者動物等組織中提取出合格的RNA。在實際RNA提取中,有幾個提取原則:1、保證RNA一級結(jié)構(gòu)的完整性;2、提取的RNA樣品中不應(yīng)存在對酶存在壓制作用的有機溶劑及過高濃度的金屬離子;3、其他生物大分子如蛋白質(zhì)、多糖和脂類分子的污染應(yīng)降低到較低程度;4、排除其它核酸分子(DNA)的污染。常用RNA提取方法有:1TRIzol法;2TRIzol+過柱法;3CTAB+過柱法;4試劑盒法。RNA提取試劑盒BiomarkerPlantTotalRNAIsolationKit(Polysaccharides&Polyphenolics–rich),能從植物組織,特別是富含多糖多酚或淀粉的植物組織(如成熟水稻葉片,棉花葉片,擬南芥種子,香蕉,馬鈴薯塊莖,蘋果,西瓜果肉,獼猴桃,梨,月季等)中快速提取總RNA,同時可以處理大量不同樣品。細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點:試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA。蘇州正規(guī)RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨
總RNA快速提取試劑盒背景資料;EpiQuik?總RNA分離快速試劑盒為從哺乳動物細(xì)胞和組織中分離總RNA提供了一種快速、簡單和經(jīng)濟有效的方法。洗滌劑用于溶解細(xì)胞和滅活核糖核酸酶。特殊的高鹽緩沖系統(tǒng)允許蛋白質(zhì)/DNA被去除,RNA結(jié)合到自旋柱的玻璃纖維基質(zhì)上,同時污染物通過柱。雜質(zhì)被有效地沖洗掉,純凈的RNA被洗脫。該試劑盒純化的RNA適用于多種常規(guī)應(yīng)用,包括RT-PCR、cDNA合成、northernblotting、差異顯示、引物延伸和mRNA選擇。總RNA快速提取試劑盒描述:本試劑盒包含了直接從培養(yǎng)細(xì)胞或組織中成功分離RNA所需的所有試劑。經(jīng)過裂解、結(jié)合和洗滌后,使用特殊設(shè)計的柱可以很容易地回收高達(dá)10個氧化格的RNA。然后,總RNA準(zhǔn)備用于各種下游應(yīng)用。上海深圳RNA提取試劑RNA提取試劑:在破碎和溶解細(xì)胞時能保持RNA的完整性。
總RNA提取試劑是一種快速從組織細(xì)胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保護、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實驗。是一種快速從組織細(xì)胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質(zhì)分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續(xù)提取DNA和蛋白質(zhì)。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保護、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實驗
RNA提取試劑的選擇:對于富含多糖多酚的植物類組織提取是個難點,Takara精心研發(fā)的柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以輕松解決這個問題。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地從各種簡單的植物組織材料(葉片、莖、幼苗等)、富含多糖多酚的植物組織材料(果實、種子等)、菌類提取高純度的TotalRNA,適用范圍普遍。按照標(biāo)準(zhǔn)流程,本試劑盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可選步驟提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA。試劑盒中包含了RNA提取所需的全部試劑,無需額外購買其它試劑~在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶 K、溶菌酶等)。
RNA穩(wěn)定方法:1.在裂解緩沖液中立即溶解,使RNase失活。然后樣品可以立即處理或冷凍保存。2.浸泡在穩(wěn)定試劑中(如DNA/RNAShield),使核酸酶失活,并在環(huán)境溫度下長時間保護核酸。這對正在實地收集樣本或處理珍貴的病人樣本(例如組織活檢、全血等)的研究人員特別有幫助。確保樣品完全溶解:在RNA提取過程中,較大限度地提高RNA產(chǎn)量和質(zhì)量的較佳方法是保證樣品的完全裂解。然而,并不是所有的樣本都對相同的裂解方案敏感。例如,血細(xì)胞(如淋巴細(xì)胞、PBMCs等)和微生物細(xì)胞往往更難以有效地溶解。光光添加基于洗滌劑的裂解緩沖液可能并不總是足夠的。為了提高裂解效果,可以將裂解緩沖液與機械裂解步驟(研磨珠破碎)匹配,或者在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶K、溶菌酶等)??梢杂?60nm波長分光測定RNA濃度,OD值為1相當(dāng)于大約40μg/ml的單鏈RNA。南昌正規(guī)RNA提取試劑廠家
RNA 提取關(guān)鍵點病菌 RNA 在提取后也仍然具有傳染性。蘇州正規(guī)RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨
植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點:1.針對植物材料獨特配置,操作更簡單、流程更優(yōu)化。2.配有高效的DNaseⅠ,可有效去除DNA污染。3.配有CS過濾柱,可有效去除其它雜質(zhì)。4.RNA純度更高,無雜質(zhì)殘留,特別適合于對純度要求很高的下游實驗。5.操作安全可靠,無需酚抽提,無需氯化銫梯度離心,無需氯化鋰或乙醇沉淀。用途植物RNA提取試劑可從植物Chemicalbook組織,特別是富含多酚或淀粉的植物組織中(如馬鈴薯塊莖、白松松針或嫩苗和西紅柿葉等),提取高純度的總RNA。操作步驟先將RNaseFree離心管置于干冰中再放入研磨好的冷凍的組織樣品。準(zhǔn)備新鮮植物組織,在液氮中研磨成粉狀,如果是干種子,可在室溫研磨。處理過的植物材料應(yīng)一直保持置于-70℃冷凍保存,直至加入提取試劑并懸浮。蘇州正規(guī)RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...