RNA提取試劑注意事項(xiàng)：1、需自備氯仿，異丙醇，DEPC，75%乙醇(DEPC水配制)，和DEPC水。2、所有離心管，泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時(shí)以去除RNA酶，其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜，然后滅菌，烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中，處理過夜，滅菌即成DEPC水。3、使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些。因?yàn)樵诩?xì)胞或組織凍融過程中一些細(xì)胞或組織內(nèi)的RNase會被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時(shí)抽提RNA，推薦先加入適量TRIReagent，并裂解樣品后凍存。與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。石家莊RNA提取試劑哪家好

RNA提取醇沉淀不是越多就越好。有些實(shí)驗(yàn)方案會推薦，在異丙醇沉淀后，用乙醇沉淀兩次。實(shí)際上，任何提取實(shí)驗(yàn)，都會在純度和得率這一對矛盾中取舍。醇沉淀會將脂溶性雜質(zhì)去掉，但部分非脂溶性的雜質(zhì)依然會連同RNA一起被沉淀下來。因此，多整幾次，并不會讓RNA的純度翻倍，反而還會有降低得率的風(fēng)險(xiǎn)。一般情況下，異丙醇和乙醇各沉淀一次即可。但是，倘若預(yù)計(jì)RNA濃度很低，那就只能放棄純度，在低溫沉淀數(shù)小時(shí)，以換來較高的得率。圍繞DEPC的玄學(xué)。許多實(shí)驗(yàn)方案會推薦使用0.1%DEPC處理RNA相關(guān)用水，以滅活RNase。這一點(diǎn)是要肯定的。不過，在使用DEPC的過程中，又充斥著一些玄學(xué)。高壓滅菌后的DEPC水，會有一股“香甜”的味道。許多人會以為那是殘留的DEPC而不敢用。實(shí)際上，這只是DEPC分解成CO2和乙醇后，產(chǎn)生的一些揮發(fā)性酯類副產(chǎn)物。廈門RNA提取試劑服務(wù)電話rRNA是組成核糖體的組分，是蛋白質(zhì)合成的工作場所。

RNA提取濃度不高或質(zhì)量不佳原因及解決辦法：1、得率過低：提取樣本過低總量不足或者提取樣本過多裂解不徹底；應(yīng)當(dāng)使用適當(dāng)質(zhì)量的組織或細(xì)胞進(jìn)行提取，樣本前處理一定要做好，裂解應(yīng)充分。2、基因組殘留：Trizol法提取時(shí)，分層后吸取上清時(shí)吸到中間層會帶來嚴(yán)重的基因組污染；分層吸取時(shí)應(yīng)當(dāng)格外小心，不要吸取到中間層。如果是采用柱式法提取，可選擇含有DNaseI的試劑盒進(jìn)行提取，吸附在膜上的核酸直接用DNaseI進(jìn)行消化，可極大限度的降低DNA殘留。

RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細(xì)胞時(shí)能保持RNA的完整性。無論是人、動物、植物還是細(xì)菌組織，該方法對少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時(shí)處理多個(gè)樣品，所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染，故而能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆等。和進(jìn)口品牌實(shí)驗(yàn)對照顯示，公司的產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)達(dá)到甚至超過了進(jìn)口產(chǎn)品的質(zhì)量~較佳方法是保證樣品完全裂解，但相同的裂解方案換了一個(gè)樣本可能就沒轍了。

細(xì)胞RNA提取的方法：異丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以見到側(cè)壁沉淀，輕輕吸棄上清。向EP管中加入75%酒精洗滌沉淀，幫助分離剩余的有機(jī)試劑（剩余有機(jī)試劑過多會影響OD值和PCR反應(yīng)），輕彈沉淀，使其浮在酒精，靜置1-2min，讓酒精充分接觸沉淀，充分溶解有機(jī)試劑，然后4度離心5min。輕輕吸棄上清。將EP管再次放于離心機(jī)中瞬時(shí)離心，棄掉管壁殘余液體。然后將EP管置于超凈臺中干燥5-10min.。注意RNA樣品不要過于干燥，否則很難溶解。加入50ulDEPC處理水，震蕩充分溶解沉淀。測量RNA濃度。將RNA保存于-80度。RNA定量方法與DNA定量相似。武漢RNA提取試劑服務(wù)電話

加入氯仿離心后，裂解液分層成水相和有機(jī)相。石家莊RNA提取試劑哪家好

通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒：1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術(shù)，已成功用于葡萄，中草藥等多糖含量高的樣品，成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑，PCR壓制物清理劑，核酸提取優(yōu)化劑，樣品核酸穩(wěn)定劑，RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品。2、適用材料普遍：尤其適合解決多醣多酚，色素等次級代謝物豐富的植物樣本難題。昆蟲RNA柱式提取試劑盒特點(diǎn)：操作簡單快速，處理一個(gè)樣品只需要約十分鐘。RNA純度高，平均OD260/280一般都在2.0左右，能夠有效去除大多數(shù)昆蟲中的多糖污染。適用于各種昆蟲組織，每100mg組織能提取到20～30μg總RNA。得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA合成等實(shí)驗(yàn)。一站式，提供RNase-free的樣品收集管。石家莊RNA提取試劑哪家好