血清血液成分(加入抗凝劑)血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng),血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過(guò)程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無(wú)纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿比較大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。無(wú)血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):無(wú)需液氮,-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存。珠海無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
無(wú)血清細(xì)胞凍存液相對(duì)于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)有:1.即用型,無(wú)需現(xiàn)配,直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型,適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞。3.無(wú)需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡(jiǎn)單。4.不含血清,較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清,批次間差異小。6.無(wú)需液氮,-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過(guò)程。無(wú)血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。鄭州無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家無(wú)血清凍存液使用方法:將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。
細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):1、凍存細(xì)胞是為了留種,所以要選擇高濃度的細(xì)胞量進(jìn)行凍存。正常情況下,當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到1*105/ml時(shí)即可凍存,具體是多少量主要根據(jù)個(gè)人觀察。2、二甲基亞砜(DMSO)因?yàn)榇┩讣?xì)胞的能力較強(qiáng),因此作為常用的凍存劑,也可以叫做細(xì)胞保護(hù)劑加入到細(xì)胞懸液中。網(wǎng)上有些分享說(shuō)道,如果選用DMSO,整個(gè)細(xì)胞懸液的制作過(guò)程都要在4℃環(huán)境下進(jìn)行。本人采用過(guò)這種方法凍存過(guò)A549和某一原代細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)A549復(fù)蘇存活率和正常凍存的過(guò)程相比并沒(méi)有明顯區(qū)別,而原代細(xì)胞的接種率確實(shí)有所上升,可能是因?yàn)槭茿549細(xì)胞比較皮實(shí),這種方法更適用于比較脆弱的細(xì)胞吧。
凍存細(xì)胞注意事項(xiàng):凍存細(xì)胞系以備將來(lái)之用時(shí),必須遵守以下原則。我們建議您嚴(yán)格遵守您所用細(xì)胞系附帶的操作說(shuō)明,以便獲得較佳結(jié)果。在細(xì)胞處于生長(zhǎng)期密度達(dá)到70-90%的情況下進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,并且細(xì)胞傳代盡可能靠前。確保凍存前活細(xì)胞百分比至少為90%。請(qǐng)注意較佳凍存條件取決于所用細(xì)胞系。細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器,使溫度每分鐘大約降低1°C。必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO或者甘油等冷凍保護(hù)劑無(wú)血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過(guò)程。
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是“慢凍快融”,這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多用二甲基亞砜(DMSO)作為保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性;緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的物理?yè)p傷。復(fù)蘇細(xì)胞采用快速融化的方法可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。血清完全細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株。特別配方有效提高細(xì)胞存活率和活力。不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等污染,確保凍存細(xì)胞安全。適合用于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。無(wú)血清細(xì)胞凍存液:降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽(yáng)離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量。石家莊無(wú)血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家
無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用方法:直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱,長(zhǎng)期冷凍保存。珠海無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液,可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動(dòng)物來(lái)源的血清成分,能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求。注意事項(xiàng):請(qǐng)選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行凍存;凍存液加入細(xì)胞后,請(qǐng)盡快放入-80C冰箱凍存;3.本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上;4.若需長(zhǎng)期凍存細(xì)胞,請(qǐng)轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存;凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。珠海無(wú)血清細(xì)胞凍存液推薦廠家
細(xì)胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現(xiàn)用現(xiàn)配。除了這個(gè)方式,還可選擇20%的DMSO機(jī)上80%的小牛血清,配成兩倍的儲(chǔ)存液,在使用時(shí)細(xì)胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存。使用細(xì)胞凍存液需要注意以下幾點(diǎn):1、在使用凍存液前,需要確保細(xì)胞凍存液已經(jīng)完全融化,并要輕輕的混勻。對(duì)融化后的細(xì)胞凍存液要置于4℃的環(huán)境中保存。2、使用凍存液之前應(yīng)該確保凍存前的細(xì)胞生長(zhǎng)情況比較良好,比如說(shuō)細(xì)胞需要處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,并且凍存的時(shí)候存活率大于90%。3、在使用細(xì)胞凍存液期間,為了保證可以發(fā)揮較佳的效果,建議將細(xì)胞凍存在液氮之中,這...