鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：不含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結），立即混勻。再加入100ul10×PBS或10×培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試)。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后，轉移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡。膠原的立體結構與一般的球狀蛋白質完全不同，每一條亞基形成一股左手旋轉的螺旋。深圳鼠尾膠原直銷廠家

鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察：果凍樣Ⅰ型膠原蛋白膠體初始浸泡在礦化液中時呈微白色；礦化2d后，膠體的顏色逐漸加深至乳白色；礦化6d后，隨著羥基磷灰石晶體礦化長入膠原纖維內(nèi)部，膠體顏色加深至純白色，并在膠體表面沉積了一層薄薄的羥基磷灰石鈣晶體，予鑷子夾起，其表層羥基磷灰石鈣晶體破碎散落。TEM表征顯示：礦化2d后，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔周期性條紋結構逐漸模糊，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維內(nèi)部，膠原纖維部分礦化，沿著膠原纖維生長，忖度變深；礦化6d后，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔D-Band結構完全消失，膠原纖維內(nèi)部可以看到黑色羥基磷灰石晶體，嵌入膠原纖維縱向生長。當鼠尾Ⅰ型膠原纖維完全礦化時，由于整條膠原纖維都被羥基磷灰石鈣晶體占據(jù)，膠原纖維呈現(xiàn)黑色，選區(qū)衍射斑圖符合羥基磷灰石表征。上海鼠尾膠原平均價格在以小鼠為模式生物進行科學研究的實驗室中。

實驗應用：鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用。目的：建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。結果：自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞，細胞角蛋白18表達陽性，免疫組織化學結果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征。結論：成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法，并且制作簡便,成本低廉。

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說明書中給出了原因：“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型，之前多從牛皮、豬皮、牛腱中提取，但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質，也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型；同時，這種畜牧業(yè)大量飼養(yǎng)的動物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒，如果用此開發(fā)醫(yī)用產(chǎn)品更加存在著品質的不穩(wěn)定及潛在的風險及危害。”至此，想必“耗子尾汁”在知識產(chǎn)權界的名聲又亮了一些。使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡。

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2．建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導致丟失蛋白。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結合數(shù)小時或者2-8度過夜。在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹。石家莊鼠尾膠原哪家好

可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細胞前用無菌的水漂洗。深圳鼠尾膠原直銷廠家

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)一些在普通細胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細胞。也可用于制備三維膠，模擬真實的生長環(huán)境，使細胞在三維環(huán)境中生長。1，在使用鼠膠原蛋白型包被的細胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細胞的貼壁和生長。1mg/ml濃度以上，pH左右時可形成具有一定強度的三維膠，檢查到NIH-3T3細胞在三維膠內(nèi)正常生長、PC-12細胞在三維膠表面正常生長。使用方法：1、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度：1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格體積加到相應的培養(yǎng)器皿中。深圳鼠尾膠原直銷廠家