細胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項:1、液氮內(nèi)的細胞凍存較長時間不要超過半年,凍存在液氮中的細胞應(yīng)一段時間內(nèi)進行更替。一個細胞系在培養(yǎng)一個月后,可復(fù)蘇一管新的細胞確保其質(zhì)量沒有發(fā)生太大變化,傳代幾次后,再凍存留種。2、細胞復(fù)蘇時,為保證獲得較高的存活率和接種率,應(yīng)盡可能的快速完成復(fù)蘇,以避免在升溫過程中細胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生。書面介紹的復(fù)蘇溫度是37℃-42℃,但是本人在實際操作中發(fā)現(xiàn)40℃環(huán)境下復(fù)蘇效果較好。3.復(fù)蘇時使用的培養(yǎng)基和凍存時使用的培養(yǎng)基中的血清盡量保證同一批次??焖賰龃婧喕藘龃娌襟E,同時不需要使用梯度凍存盒。上海太原無血清細胞凍存液
細胞凍存是將細胞放在低溫環(huán)境,減少細胞代謝,以便長期儲存的一種技術(shù)。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,起到了細胞保種的作用。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,利用凍存技術(shù)可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。目前現(xiàn)有技術(shù)中,細胞凍存液中的主要成分有10%二甲基亞砜(DMSO)、20%~90%胎牛血清(FBS)、剩余組分為完全培養(yǎng)基。培養(yǎng)基以及FBS可為細胞提供必要的營養(yǎng)物質(zhì)。DMSO是一種滲透性保護劑,能夠降低細胞冰點,減少冰晶的形成,從而達到降低細胞損傷的保護效果。但FBS屬于動物源性物質(zhì),成分比較復(fù)雜,在臨床應(yīng)用上存在潛在的風(fēng)險,也增加了污染的幾率,并且由于凍存液中含有動物血清,會導(dǎo)致凍存液的成分存在不穩(wěn)定的因素。寧波無血清細胞凍存液廠家供應(yīng)無血清細胞凍存液,2-8℃保存即可,無需再進行分裝。
無血清細胞凍存液:采用patent的凍存配方,用包括重組人血白蛋白等多種蛋白組分替代了血清的用途。用包括DMSO在內(nèi)的復(fù)合凍存保護劑替代了單一的DMSO的保護作用。復(fù)合保護劑的內(nèi)部保護劑,易于穿透細胞膜,避免在細胞凍存過程中細胞內(nèi)部的水分子形成冰晶損傷細胞;外部保護劑,可在溶液形成冰晶之前,在細胞膜外部競爭性的結(jié)合細胞膜表面的水分子,從而降低細胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進入細胞的數(shù)量。在細胞內(nèi)部與外部的協(xié)同保護作用下,明顯降低了溫度迅速下降與溫度上升對細胞的損害,因此大幅度提高了細胞經(jīng)過凍存后的復(fù)蘇存活率。
無血清快速細胞凍存液保存條件:儲存于4℃以下。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期2年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。無血清快速細胞凍存液細胞冷凍保存方法:選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復(fù)蘇細胞存活率。1、按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2、按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。3、取相當(dāng)于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去離心管中的上清液。4、加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。6、直接將含細胞混合液的凍存管放入-70℃以下冰箱,長期冷凍保存。7、若研究者需要液氮保存時,可將完全凍結(jié)的凍存管(放入-70℃以下冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐。無血清凍存液用途:為確保產(chǎn)品質(zhì)量,請避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。
無血清細胞凍存液的用途:用途:1.無血清細胞凍存液用于造血干細胞、間充質(zhì)干細胞等干細胞的儲存。2.無血清細胞凍存液用于T淋巴細胞、NK細胞等免疫細胞的存儲。3.無血清細胞凍存液用于其他類型哺乳動物細胞的儲存。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:1.不含牛血清,無動物源組分。傳統(tǒng)的凍存液,一般由胎牛血清、DMSO等組分組成。胎牛血清取自牛,因此,難以應(yīng)用到需要避免接觸動物源的應(yīng)用領(lǐng)域。用包括人白蛋白等蛋白組分替代血清的用途,無動物源組分。2.2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,即取即用。為了避免反復(fù)凍融,傳統(tǒng)的細胞凍存液,需要分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存。無血清細胞凍存液,2-8℃保存即可,無需再進行分裝。無血清凍存液用途:本產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超過保質(zhì)期,必須放棄使用。青島正規(guī)無血清細胞凍存液直銷廠家
無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色:不含動物源成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低。上海太原無血清細胞凍存液
無血清凍存液通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規(guī)細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5年)。配方成分明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分,提高細胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。該產(chǎn)品添加了細胞沉降穩(wěn)定劑,可延緩細胞在凍存過程中的沉降速率,防止細胞互相擠壓,影響細胞凍存效果。另外,添加了細胞膜保護劑、滲透性細胞膜內(nèi)保護劑、非滲透性細胞保護劑等多種冷凍保護劑,這些成分在溶液中同水分子結(jié)合,發(fā)生水合作用,弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而少冰晶的形成,能較大降低細胞在凍存過程中冰晶對于細胞的損傷,有效提高細胞復(fù)蘇存活率。該產(chǎn)品配方成分明確,不含血清、不含動物源性蛋白,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全;不光適用于常規(guī)細胞系、原代細胞,同時亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。上海太原無血清細胞凍存液
細胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現(xiàn)用現(xiàn)配。除了這個方式,還可選擇20%的DMSO機上80%的小牛血清,配成兩倍的儲存液,在使用時細胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存。使用細胞凍存液需要注意以下幾點:1、在使用凍存液前,需要確保細胞凍存液已經(jīng)完全融化,并要輕輕的混勻。對融化后的細胞凍存液要置于4℃的環(huán)境中保存。2、使用凍存液之前應(yīng)該確保凍存前的細胞生長情況比較良好,比如說細胞需要處于對數(shù)生長期,并且凍存的時候存活率大于90%。3、在使用細胞凍存液期間,為了保證可以發(fā)揮較佳的效果,建議將細胞凍存在液氮之中,這...