RNA提取試劑盒原理：該EpiQuik?總RNA提取試劑盒提供了一種快速，簡單，經(jīng)濟(jì)有效的方法，可從全血，哺乳動物細(xì)胞，細(xì)菌細(xì)胞和菌類細(xì)胞中分離總RNA。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細(xì)胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團(tuán)結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上，同時使污染物通過柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫，不用酚提取或醇沉淀。RNA提取試劑盒特點(diǎn)：1、快速程序在25-40分鐘內(nèi)提供高質(zhì)量的總RNA。2、即用型RNA，可在絕大多數(shù)下游應(yīng)用，例如RT-PCR，cDNA合成，NorthernBlotting，Differentialdisplay，PrimerExtension，mRNAselection。3、適用樣品：全血，哺乳動物細(xì)胞，細(xì)菌細(xì)胞和菌類細(xì)胞（樣品起始量：300μl全血，10^7個哺乳動物細(xì)胞，10^9個細(xì)菌細(xì)胞和10^8個菌類細(xì)胞。總共可以使用該試劑盒進(jìn)行50次標(biāo)準(zhǔn)提取?？俁NA的產(chǎn)量可達(dá)30μg。產(chǎn)量可能因樣品類型而異。）RNA提取試劑：能夠作RNA印跡分析、斑點(diǎn)雜交、poly(A)+選擇。鄭州正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商

與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，但是很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學(xué)功能。RNA的堿基配對規(guī)則基本和DNA相同，不過除了A-U、G-C配對外，G-U也可以配對。在細(xì)胞中，根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同，RNA主要分三類，即tRNA（轉(zhuǎn)運(yùn)RNA），rRNA（核糖體RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板，內(nèi)容按照細(xì)胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄；tRNA是mRNA上堿基序列（即遺傳密碼子）的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者；rRNA是組成核糖體的組分，是蛋白質(zhì)合成的工作場所。南京北京RNA提取試劑RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。

RNA提取注意事項：1、組織樣本要盡可能的新鮮，避免反復(fù)凍融。2、提取時組織要充分研磨，組織量不宜過少，更不宜過多。3、加入裂解液后應(yīng)給予充分的孵育時間，使樣本充分裂解。4、在用Trizol法提取時，分層后吸取上清的原則是“寧愿少吸，不能多吸”，千萬不能提取到中間層，否則會導(dǎo)致嚴(yán)重的基因組DNA污染。5、洗滌時洗滌液應(yīng)充分浸潤到管壁的四周，確保洗滌徹底。6、柱式提取法，洗滌完后除了對柱子進(jìn)行空離后，還應(yīng)當(dāng)將吸附柱置于超凈臺內(nèi)吹風(fēng)5~10min，使有機(jī)溶劑充分揮發(fā)干。7、柱式法較后洗脫時候，當(dāng)加入DEPC水后還應(yīng)孵育3~5min，或者提前將DEPC水加熱至60℃，可提高洗脫得率。傳統(tǒng)的Trizol裂解異丙醇沉淀法較后RNA是用DEPC水溶解沉淀，則應(yīng)當(dāng)給予適當(dāng)溶解時間，并用泵頭不斷吹吸離心管底部。

酵母RNA的提取方法：稀堿法是屬化學(xué)破壁法，其方法是在一定堿濃度下，使構(gòu)成細(xì)胞壁的蛋白質(zhì)、脂肪及糖的化合物得到水解，從而破壞細(xì)胞壁，此法對堿的濃度及提取溫度要求比較嚴(yán)格，堿的濃度不可過濃，應(yīng)控制在1％，并且對提取溫度也有一定的要求，提取時間短。因?yàn)樵谶^分劇烈的條件下，容易使核糖核酸分子內(nèi)的酯鍵斷裂，使核糖核酸降解而影響收得率。酵母菌作為重要的模式生物，是遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究材料。由于酵母菌的細(xì)胞壁成分復(fù)雜，且較原核生物厚，難于破碎，因此酵母菌總RNA的抽提純化要比原核生物總RNA的抽提純化困難的多。如何有效地破碎細(xì)胞壁并保證RNA的完整性，是獲得高質(zhì)量酵母菌總RNA的關(guān)鍵問題?？俁NA的提取方法還有很多，如Trizol法、異硫氰酸胍法、十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)法、尿素法、十二烷基硫酸鈉(SDS)法、熱硼酸鹽法等，這些方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，不同的方法適用于不同類型的材料。根據(jù)它們在不同的PH值和不同極性溶劑的溶解度不同而使得分開。

病毒RNA提取試劑盒可以快速從全血、血清、血漿、口腔拭子等生物液體中提取病毒RNA。在此試劑盒中，使用了核酸助沉劑--carrierRNA。核酸助沉劑不光有利于微量RNA的沉淀，同時也可以減少RNA的降解。本試劑盒操作簡捷方便。30-40min就可以完成一個樣品的提取，得到純凈的RNA。RNA可以使用RT-PCR,real-timeqPCR,Northernblot,Dotblot,poly(A)+selection,體外翻譯，和分子克隆等實(shí)驗(yàn)。此外，裂解液VLS也是病毒RNA樣品的一個很好的保存液。儲存在裂解液中的病毒RNA（在病毒樣品中加入3倍體積裂解液后劇烈渦旋裂解樣品）可以在-20℃情況下穩(wěn)定至2個月；在-80℃情況穩(wěn)定半年;同時，儲存在裂解液中的樣品在運(yùn)輸過程中，也可以在4℃穩(wěn)定一日；-20℃穩(wěn)定一周。RNA提取試劑注意事項：硫氰酸胍/苯酚法的一種即用的從細(xì)胞和組織中提取總RNA的試劑。溫州RNA提取試劑廠家現(xiàn)貨

RNase主要來自樣品的細(xì)胞。鄭州正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法：將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中，12000rmp室溫離心半分鐘，棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液，室溫12000rmp離心半分鐘，棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中，加入50～100μLRNA洗脫液，室溫放置1～2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用~鄭州正規(guī)RNA提取試劑供應(yīng)商