RNA提取關鍵點病菌RNA在提取后也仍然具有傳染性，在提取時，實驗人員需要佩戴口罩和手套等各種防護裝備，以防實驗室污染。而有種「自動滅活」的方法，在更加便利的同時，也能更好的保護實驗人員的安全。許多樣品中含有高水平的RNase，這種酶也會加速RNA的降解。為了使這種酶對降解的影響較小化，較好在采集時就穩(wěn)定好樣本中的RNA。這種情況下，可以在裂解緩沖液中立即進行溶解。比如可以通過TRIzol?、RNA裂解緩沖液等使RNase失活，然后再處理樣本。另外，再采集樣本之后馬上加入DNA/RNAShield，可以快速降解掉RNase等蛋白物質。當然，DNA/RNAShield也會保證取樣時微生物基因多樣性不會發(fā)生改變。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質膜材料。昆明正規(guī)RNA提取試劑供應商

RNA提取：預備工作（1）塑料制品：盡量使用一次性無菌塑料制品。已標明RNase-free的塑料制品，如沒有開封使用過，通常不必再處理。處理的步驟如下：O在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強的劇毒物，須在通風櫥中小心使用）O將待處理的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通風柜中37℃或室溫下處理過夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中，將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口，高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥，置潔凈處備用。（2）玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時以上。合肥正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦好的試劑盒價格比較貴，在實驗室可以根據自己的實驗需要來定奪試劑盒的使用。

RNA指的是核糖核酸。真核生物體的遺傳物質存在于細胞核內，多數的真核生物使用DNA也就是脫氧核糖核酸來作為遺傳的中心物質，但是少量的病菌遺傳物質可以是RNA。正因為病菌的遺傳物質是RNA，所以可以通過檢測病菌的RNA是否存在，或者其濃度和含量來判斷是否存在相應的病菌傳染，傳染的程度及病菌是否仍在大量復制。一個核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種，即A腺嘌呤、G鳥嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶，其中，U（尿嘧啶）取代了DNA中的T。RNA是核糖核酸的縮寫。存在于生物細胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。

DNA稱脫氧核糖核酸，是一種分子，雙鏈結構，由脫氧核糖核苷酸（成分為：脫氧核糖、磷酸及四種含氮堿基）組成。可組成遺傳指令，引導生物發(fā)育與生命機能運作。主要功能是長期性的資訊儲存，可比喻為“藍圖”或“食譜”。RNA稱核糖核酸，是以DNA的一條鏈為模板，以堿基互補配對原則，轉錄而形成的一條單鏈，主要功能是實現遺傳信息在蛋白質上的表達，是遺傳信息傳遞過程中的橋梁。RNA的堿基主要有4種，即A腺嘌呤，G鳥嘌呤，C胞嘧啶，U尿嘧啶。其中，U尿嘧啶取代了DNA中的T胸腺嘧啶而成為RNA的特征堿基。RNA是核糖核酸，DNA是脫氧核酸。區(qū)別：1.兩性解離：DNA無，bai只有酸解離，堿基被屏蔽（在分子內部形成了H鍵）。RNA有，有PI。2.粘度大：DNA;RNA，粘度由分子長度/直徑決定，DNA為線狀分子，RNA為線團。3.堿的作用：DNA耐堿RNA易被堿水解。4.顯色反應：鑒別DNA和RNA+濃HClRNA------→綠色化合物DNA------→藍紫色化合物苔黑酚。二苯胺啡啶溴紅（熒光染料）和溴嘧啶都可對DNA染色，原理是卡在分子中，DNA的離心和電泳顯色可用它們。RNA提取試劑注意事項：為防止濺入眼睛，請戴防護眼鏡或使用透明保護屏。

RNA提取濃度不高或質量不佳原因及解決辦法：1、RNA降解：可能是提取樣本本身降解，或者是在提取過程中導致的降級；應當盡可能使用新鮮樣本進行RNA提取，采集的樣本應當及時置于液氮或者-80℃冰箱凍存，并減少反復凍融。在RNA提取過程中應當使用RNase/DNasefree的吸頭、離心管及其他材料，提取過程盡可能的快，提取后的RNA應置于冰盒上并及時放于-80凍存。如提取后的RNA需要進行凝膠電泳檢測，則應提取好后立刻進行電泳，電泳緩沖液應更換新配制的。2、鹽及有機溶劑殘留：提取試劑中含有酚及胍鹽，洗滌液中含有乙醇，在提取過程中裂解液吸棄不徹底，洗液沒有充分晾干導致的，殘留的鹽及有機溶劑對后續(xù)的逆轉錄和PCR均存在不同程度的壓制作用，因此在提取過程中應充分去除組織裂解液，洗滌時應充分，使管壁四周均能被洗滌到，另外管子空離和吹風是必須的步驟，會進一步降低有機物殘留。RNA提取試劑注意事項：盡量不要對著RNA樣品說話，以防RNA酶污染。合肥正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦

為了提高裂解效果，可以將裂解緩沖液與機械裂解步驟（研磨珠破碎）匹配。昆明正規(guī)RNA提取試劑供應商

新型土壤總RNA快速提取試劑盒：獨特裂解劑/裂解液迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶，然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶，然后將粗純化的玻璃奶轉移到離心柱，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細胞代謝物、蛋白等雜質去除，較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質膜上洗脫。試劑盒特點:離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口世界有名公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異極小，可重復性好?？朔藝a試劑盒膜質量不穩(wěn)定的弊端。兼容性強，適用于各種不同的土壤、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。快速，簡捷，單個樣品操作一般可在1小時內完成。多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達1.9以上，可直接用于PCR，Northern-blot和各種酶切反應~昆明正規(guī)RNA提取試劑供應商