動物細胞RNA提?。?、懸浮細胞:可直接離心后棄掉培養(yǎng)基,用無菌PBS清洗1~2遍后,再用適量PBS懸浮起來,然后再加入裂解液進行裂解。千萬不要完全棄掉液體后,往沉淀細胞里直接加入裂解液,這樣會使外表層的細胞裂解后釋放的組蛋白包裹粘附在沉淀細胞外側(cè),從而限制沉淀內(nèi)部的細胞與裂解液的接觸,從而導致細胞裂解不徹底,降低RNA得率。2、半貼壁或貼壁不緊的細胞:棄掉培養(yǎng)基后,用PBS洗1~2次,然后直接吸取適量PBS用吸管或者泵吹打培養(yǎng)皿,把細胞吹下來,轉(zhuǎn)移到無RNA酶的EP管中,加裂解液進行提取。用于各種植物、動物、微生物的RNA提取,在每個試劑盒里都有一份說明使用說明書。蘇州正規(guī)RNA提取試劑單價
RNA提取試劑注意事項:1、需自備氯仿,異丙醇,DEPC,75%乙醇(DEPC水配制),和DEPC水。2、所有離心管,泵頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染。耐高溫器物可150℃烘烤4小時以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,然后滅菌,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%(體積比)diethylpyrocarbonate(DEPC)至重蒸水或MiliQ級水中,處理過夜,滅菌即成DEPC水。3、使用凍存的細胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細胞或組織差一些。因為在細胞或組織凍融過程中一些細胞或組織內(nèi)的RNase會被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時抽提RNA,推薦先加入適量TRIReagent,并裂解樣品后凍存。貴陽RNA提取試劑直銷價細胞質(zhì)和細胞核RNA提取試劑盒特點:方便快捷的離心柱操作方式。
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒:1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術(shù),已成功用于葡萄,中草藥等多糖含量高的樣品,成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑,PCR壓制物清理劑,核酸提取優(yōu)化劑,樣品核酸穩(wěn)定劑,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品。2、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,色素等次級代謝物豐富的植物樣本難題。昆蟲RNA柱式提取試劑盒特點:操作簡單快速,處理一個樣品只需要約十分鐘。RNA純度高,平均OD260/280一般都在2.0左右,能夠有效去除大多數(shù)昆蟲中的多糖污染。適用于各種昆蟲組織,每100mg組織能提取到20~30μg總RNA。
RNA提?。褐饕噭㏕rizol是一種新型總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速破碎細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶。1.Trizol試劑含有苯酚,具有毒性和刺激性,注重操作。2.RNase污染的主要來源是操作過程中手和空氣中的浮沉,注重配帶手套,樣品盡可能蓋嚴。3.細胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全會降低較后得率,因為一部分RNA會殘留在未裂解的細胞中。細胞裂解之后要看不見顆粒狀物質(zhì)(結(jié)締組織和骨除外)。在清洗和裂解細胞時較好在低溫下操作,防止在操作過程中釋放的內(nèi)源RNase降解了RNA。4.酵母和一些細菌由于細胞壁的特別結(jié)構(gòu),可以加入Trizol試劑同時加入無RNase的玻璃珠并劇烈振蕩,使細胞裂解充分。2-8℃避光保存一年。研缽150度烘烤4小時,離心管、吸頭用DEPC處理。
病毒RNA提取試劑盒可以快速從全血、血清、血漿、口腔拭子等生物液體中提取病毒RNA。在此試劑盒中,使用了核酸助沉劑--carrierRNA。核酸助沉劑不光有利于微量RNA的沉淀,同時也可以減少RNA的降解。本試劑盒操作簡捷方便。30-40min就可以完成一個樣品的提取,得到純凈的RNA。RNA可以使用RT-PCR,real-timeqPCR,Northernblot,Dotblot,poly(A)+selection,體外翻譯,和分子克隆等實驗。此外,裂解液VLS也是病毒RNA樣品的一個很好的保存液。儲存在裂解液中的病毒RNA(在病毒樣品中加入3倍體積裂解液后劇烈渦旋裂解樣品)可以在-20℃情況下穩(wěn)定至2個月;在-80℃情況穩(wěn)定半年;同時,儲存在裂解液中的樣品在運輸過程中,也可以在4℃穩(wěn)定一日;-20℃穩(wěn)定一周。血漿/血清RNA提取試劑盒:30~40分鐘內(nèi)即可完成提取過程,提取的總RNA純度高。貴陽RNA提取試劑直銷價
為了提高裂解效果,可以將裂解緩沖液與機械裂解步驟(研磨珠破碎)匹配。蘇州正規(guī)RNA提取試劑單價
植物RNA提?。褐参锝M織中,富含酚類化合物,或富含多糖,或含有某些尚無法確定的次級代謝產(chǎn)物,或RNase的活性較高。這些物質(zhì)在細胞裂解后與RNA緊密結(jié)合形成難溶復合物或者膠狀沉淀,很難將其去除。所以我們在提取植物組織時,要選取針對植物的試劑盒,試劑盒里的裂解液能有效解決多酚易氧化、多糖化合物與核酸分離等難題。1、植物的果皮、果肉、種子、葉片等要在研缽中充分研磨,研磨過程中液氮要及時補充,避免樣品融化,研磨后的樣品應(yīng)迅速加入裂解液中震蕩混勻,避免RNA降解。2、像水稻及小麥葉片等富含纖維的樣本,則應(yīng)適當減少提取用量,否則組織研磨及裂解不徹底,會使提取的RNA產(chǎn)量較低。3、含水分較多的植物組織例如石榴果實、西瓜果實、桃子果實等則應(yīng)當適當提高樣本量(可選100~200mg)。4、植物組織,如植物葉片、根莖、堅硬的果實等材料一般建議使用液氮在研缽中徹底研缽成份,再繼續(xù)進行提取步驟。常規(guī)的組織勻漿機對植物組織的勻漿效果可能不佳,一般不建議使用。蘇州正規(guī)RNA提取試劑單價
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...