無血清細(xì)胞凍存液的使用方法及注意事項(xiàng)：1.將分裝好的細(xì)胞凍存管，直接置于-80度冰箱過夜保存，次日投入液氮中保存即可備注：1、凍存過程中，第2步在冰袋附近操作時，低溫避免保護(hù)劑對細(xì)胞造成損傷。2、細(xì)胞凍存管一定要保證完全密封，否則在復(fù)蘇過程中有可能會炸（1）提前開啟水浴鍋，溫度調(diào)節(jié)到37（2）將凍存的細(xì)胞冷凍管從液氮中取出，迅速置于水浴鍋中融化，盡量1min融化，時間越短，對細(xì)胞影響越小。（3）將融化后的含細(xì)胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻，（如細(xì)胞冷凍保存液為500ul，則加入到5ml新鮮培養(yǎng)基中，如細(xì)胞冷凍保存液位1ml，則加入10ml新鮮培養(yǎng)基中。）（4）混勻后立即離心，800轉(zhuǎn)，3min即可離心結(jié)束后棄上清，加入預(yù)溫的新鮮培養(yǎng)液。（5）混勻后分瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（二氧化碳濃度根據(jù)培養(yǎng)基要求決定，通常為5%【注意事項(xiàng)】細(xì)胞系凍存密度備注正常人成纖維細(xì)胞1～310cells/ml雜交瘤細(xì)胞1～310cells/ml某些hybridoma會因冷凍濃度太高而在解凍24小時后死去。血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。廈門正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹

細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。細(xì)胞凍存液除去蛋白酶，添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液.細(xì)胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中，在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費(fèi)，而且細(xì)胞一旦開始原代培養(yǎng)，它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進(jìn)行細(xì)胞凍存十分必要。細(xì)胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；細(xì)胞儲存在液氮中，溫度達(dá)-196℃，理論上儲存時間是無限的。廈門正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹凍存液中使用的所有原料均應(yīng)符合臨床或藥物需求。

產(chǎn)品簡介我們經(jīng)過長期的實(shí)驗(yàn)研究與反復(fù)驗(yàn)證，研發(fā)出一系列新型細(xì)胞凍存產(chǎn)品，能有效地提高常規(guī)細(xì)胞、原代細(xì)胞與干細(xì)胞的復(fù)蘇后存活率與活力。產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠，使用方便，助力科研工作者擺脫程序繁瑣、操作復(fù)雜、容易污染的傳統(tǒng)凍存方法，專注于后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。LiveCyteTM（LC-1601）是即用型細(xì)胞凍存液，所含化學(xué)成分明確，無動物源性成分，可一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存并長期在-80℃冰箱保存，保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷，適用于大多數(shù)常規(guī)細(xì)胞。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細(xì)胞及干細(xì)胞**凍存液，可進(jìn)一步提高原代細(xì)胞和干細(xì)胞凍存效率。

無血清快速細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法：1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4.清洗細(xì)胞，充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。6.鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營養(yǎng)成分。

細(xì)胞凍存秘籍：1.在倒置相差顯微鏡上每隔幾分鐘檢查酶處理的進(jìn)展情況。一旦細(xì)胞變圓，輕輕敲擊細(xì)胞瓶使其脫離塑料表面。加入5mL含血清的生長培養(yǎng)基滅活胰酶?？赡苄枰獎×业囊埔翰僮鱽硎古囵B(yǎng)容器底部的剩余細(xì)胞脫落，或?qū)⒓?xì)胞團(tuán)塊分解成單細(xì)胞懸浮液。胰酶的去除或失活對于冷凍細(xì)胞至關(guān)重要。如果游離試劑不能直接滅活，可以通過下一步的離心去除。2.用15ml離心管收集細(xì)胞。取出樣本進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，剩余的細(xì)胞懸液以約100×g離心5分鐘以獲得細(xì)胞沉淀。離心時，用細(xì)胞計(jì)數(shù)板對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。使用臺盼藍(lán)染液檢查細(xì)胞的活性。一些保護(hù)劑，易于穿透細(xì)胞，避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞。珠海無血清細(xì)胞凍存液廠家推薦

使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓。廈門正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹

無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)點(diǎn)有哪些呢：很多所使用的傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液的成份主要是：新鮮的培養(yǎng)基，其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO。凍存的方法：將冷凍管置于4℃條件喜愛10分鐘，接著在-20℃的條件下30分鐘，-80℃的條件下保存16-18個小時（或隔夜保存也可以），較后再液氮的環(huán)境中進(jìn)行長期的儲存。需要注意在-20℃的環(huán)境下保存不可超過1個小時，主要用以防止冰晶產(chǎn)生過大，造成細(xì)胞大量的死亡。對于無血清的細(xì)胞凍存液來說，其所含有的成分是：不含血清，含DMSO、pH調(diào)節(jié)劑、葡萄糖等各種細(xì)胞營養(yǎng)成分等。其中不含有動物來源性的蛋白，所以能夠減少各類的細(xì)菌、霉菌、支原體等帶來的污染，而且可以確保凍存細(xì)胞的安全。比較通用于各種動物的細(xì)胞株。廈門正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹