無血清細胞凍存液:產(chǎn)品優(yōu)勢:1.化學(xué)成分明確,無任何外源蛋白和血清,適用于各類動物細胞株凍存。2.無需程序降溫,細胞復(fù)蘇率90%以上。3.凍存細胞可直接存放于-80℃冰箱,穩(wěn)定保存數(shù)年。4.即用型產(chǎn)品,4℃可穩(wěn)定保存。細胞凍存:1.收集融合率>90%的對數(shù)期的貼壁細胞或者懸浮細胞于離心管中。2.1000rmp離心5分鐘,去除離心管中的上清液,收集細胞沉淀。3.加入適量細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為1x106~1x107cells/mL。頭輕柔吹打混勻,Z成細胞懸液。4.將離心管中的細胞懸液分裝與細胞凍存管中,每管1mL或1.5mL。5.將分裝好的細胞直接凍存于-80℃冰箱中,可穩(wěn)定凍存數(shù)年。6.如若長期保存,可在次日轉(zhuǎn)移至液氮中。鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。昆明無血清細胞凍存液哪里買
血清血液成分(加入抗凝劑)血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng),血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿比較大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。徐州正規(guī)無血清細胞凍存液銷售廠家無血清細胞凍存液,通用于人和各種動物細胞株。
無血清細胞凍存液的使用方法及注意事項:1.將分裝好的細胞凍存管,直接置于-80度冰箱過夜保存,次日投入液氮中保存即可備注:1、凍存過程中,第2步在冰袋附近操作時,低溫避免保護劑對細胞造成損傷。2、細胞凍存管一定要保證完全密封,否則在復(fù)蘇過程中有可能會炸(1)提前開啟水浴鍋,溫度調(diào)節(jié)到37(2)將凍存的細胞冷凍管從液氮中取出,迅速置于水浴鍋中融化,盡量1min融化,時間越短,對細胞影響越小。(3)將融化后的含細胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻,(如細胞冷凍保存液為500ul,則加入到5ml新鮮培養(yǎng)基中,如細胞冷凍保存液位1ml,則加入10ml新鮮培養(yǎng)基中。)(4)混勻后立即離心,800轉(zhuǎn),3min即可離心結(jié)束后棄上清,加入預(yù)溫的新鮮培養(yǎng)液。(5)混勻后分瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(二氧化碳濃度根據(jù)培養(yǎng)基要求決定,通常為5%【注意事項】細胞系凍存密度備注正常人成纖維細胞1~310cells/ml雜交瘤細胞1~310cells/ml某些hybridoma會因冷凍濃度太高而在解凍24小時后死去。
無血清細胞凍存液復(fù)蘇細胞實驗步驟:1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4.清洗細胞,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后,將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。無血清細胞凍存液用途:無血清細胞凍存液用于造血干細胞、間充質(zhì)干細胞等干細胞的儲存。
細胞凍存:取出凍存管,注明細胞名稱,代數(shù),日期。離心后,以無菌吸管吸棄上清,不要吸到底部的細胞沉淀。將細胞沉淀與凍存液充分混勻,根據(jù)計數(shù)結(jié)果,將細胞總數(shù)調(diào)節(jié)成細胞數(shù)量為5-10*105/ml為宜。將細胞凍存懸液分裝進細胞凍存管中,一般2ml的凍存管中裝入1-1.5ml凍存液為宜。嚴密封口后,使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1℃。或者,將裝有細胞的凍存管放入異丙的醇凍存盒中,然后將凍存盒置于–80℃條件下過夜。若無凍存盒及其他凍存裝置,可以先將凍存管置于4℃30min,再-20℃凍存1h直至完全冷凍,再轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過夜。第二天將已經(jīng)冷凍的細胞轉(zhuǎn)移到液氮容器中,置于液氮上方的氣相空間中儲存。無血清細胞凍存液使用方法:將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。上海無血清細胞凍存液進貨價
無血清凍存液特性:不含動物成分。昆明無血清細胞凍存液哪里買
無血清細胞凍存液,通用于人和各種動物細胞株。特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)具有有效提高細胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞的凍存。產(chǎn)品特色:不含動物源成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。成分明確,無批次差異??芍苯哟娣庞?80℃冰箱凍存,無需經(jīng)過費時的程序降溫過程(省時、省力、省錢)。獨特配方有效提高細胞凍存存活率及復(fù)蘇率。即用型,無需現(xiàn)配,即開即用。通用型,適用于凍存各種細胞系,原代細胞??晌⒘?,原位凍存,例如雜交瘤細胞的凍存,省時高效。存儲條件:儲存于4℃以下,質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期兩年。3個月以上沒有使用凍存液計劃時,盡可能-20℃冷凍保存。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低,推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,再存放于4℃以下或-20℃冰箱凍存。昆明無血清細胞凍存液哪里買
細胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現(xiàn)用現(xiàn)配。除了這個方式,還可選擇20%的DMSO機上80%的小牛血清,配成兩倍的儲存液,在使用時細胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存。使用細胞凍存液需要注意以下幾點:1、在使用凍存液前,需要確保細胞凍存液已經(jīng)完全融化,并要輕輕的混勻。對融化后的細胞凍存液要置于4℃的環(huán)境中保存。2、使用凍存液之前應(yīng)該確保凍存前的細胞生長情況比較良好,比如說細胞需要處于對數(shù)生長期,并且凍存的時候存活率大于90%。3、在使用細胞凍存液期間,為了保證可以發(fā)揮較佳的效果,建議將細胞凍存在液氮之中,這...