提取RNA的詳細(xì)步驟:首先,將研缽晾干夠,倒入1/3體積的液氮,加入0.2g均質(zhì)的植物材料,充分研磨后轉(zhuǎn)入一個(gè)含有300微升GMT的1.5ml的離心管中,搖勻。然后,加入30微升2mol/lNaAc進(jìn)行搖勻,加入300微升酸酚搖勻,加入100微升的氯仿?lián)u勻。然后,在四攝氏度12000r/min下離心二十分鐘,吸取上清液的3/4,加入等體積的異丙醇,于冰上放置十五分鐘。然后,在四攝氏度12000r/min下離心十分鐘,將沉淀懸浮于含100微升的4mol/lLiCl小試管中,于-20攝氏度下放置過夜。然后,在4攝氏度13000r/min下離心10-15min,將沉淀溶于0.4mlDEPC處理水中,加入1/2體積氯仿和1/2體積酸酚,搖勻,進(jìn)行抽提,在4攝氏度13000r/min下離心五分鐘。將上清液中加入等體積的氯仿?lián)u勻,進(jìn)行抽提,在四攝氏度13000r/min下離心五分鐘,上清液中加入1/10體積3mol/lNaAc和兩倍體積的午睡乙醇與-20攝氏度放置一小時(shí)。拭子RNA提取試劑的選擇?洗脫液洗脫能力好,核酸的提取得率就高。徐州唐山RNA提取試劑
超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢(shì):1、、無DNA污染可直接用于熒光定量PCR:目前市面上的試劑盒大多提出的RNA會(huì)出現(xiàn)DNA污染其結(jié)果嚴(yán)重影響后續(xù)實(shí)驗(yàn),特別是非常靈敏的熒光定量PCR的實(shí)驗(yàn)。一些市面上單獨(dú)賣的去DNA污染的試劑,效果不穩(wěn)定,去除DNA污染不徹底。本產(chǎn)品操作簡(jiǎn)單,去除DNA徹底,得到的RNA樣品可直接用于熒光定量PCR,反轉(zhuǎn)錄等各種后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術(shù),已成功用于葡萄,中草藥等多糖含量高的樣品,成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發(fā)了糖類清理劑,PCR壓制物清理劑,核酸提取優(yōu)化劑,樣品核酸穩(wěn)定劑,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產(chǎn)品。3、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,色素等次級(jí)代謝物豐富的植物樣本難題。青島正規(guī)RNA提取試劑服務(wù)電話DNA/RNA Shield 也會(huì)保證取樣時(shí)微生物基因多樣性不會(huì)發(fā)生改變。
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡(jiǎn)介。改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。二、試劑盒特點(diǎn):1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好??朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn),不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨(dú)有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程,提取RNA純度更高。5、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量,提高了純度~
RNA是核糖核酸,是存在于生物細(xì)胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA是由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成的長(zhǎng)鏈狀分子。一個(gè)核糖核苷酸分子則由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成。在細(xì)胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者;rRNA是組成核糖體的部分,而核糖體是蛋白質(zhì)合成的機(jī)械。細(xì)胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。而其他如I、II型內(nèi)含子、HDV、核糖體RNA等等都有催化生化反應(yīng)過程的活性,即具有酶的活性,這類RNA被稱為核酶。植物RNA提取試劑:提取的總RNA純度極高,沒有蛋白和其他雜質(zhì)的污染。
新型土壤總RNA快速提取試劑盒:獨(dú)特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。試劑盒特點(diǎn):離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好??朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。兼容性強(qiáng),適用于各種不同的土壤、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。RNA提取試劑:TRIpure試劑操作上的簡(jiǎn)單性允許同時(shí)處理多個(gè)樣品,所有的操作可以在一小時(shí)內(nèi)完成。青島正規(guī)RNA提取試劑服務(wù)電話
tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者。徐州唐山RNA提取試劑
那RNA到底是什么呢?它又和基因有什么關(guān)系呢?基因的表達(dá).其實(shí)人體內(nèi)的RNA主要和基因的表達(dá)有關(guān)系。不知道你思考過這么一個(gè)問題沒有,基因是我們體內(nèi)的遺傳物質(zhì),它如何來表達(dá)自己呢?事實(shí)上,這個(gè)過程是需要用到RNA的。具體來說是這樣的,由于染色體是存在于細(xì)胞核當(dāng)中的,而根據(jù)上述的內(nèi)容,我們知道,基因其實(shí)是存在于染色體上的。如果一個(gè)基因要表達(dá),只有兩種辦法,一個(gè)就是它親自到細(xì)胞核外去完成一切的生命活動(dòng),另一個(gè)辦法就是找個(gè)幫手來完成。而我們的基因選擇的是第二條路徑,也就是找一個(gè)幫手,這個(gè)幫手就是RNA,更準(zhǔn)確地說是信使RNA(mRNA),基因會(huì)通過轉(zhuǎn)錄,利用堿基互補(bǔ)原則,合成一條信使RNA,這個(gè)過程都是在細(xì)胞核內(nèi)部完成的。徐州唐山RNA提取試劑
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個(gè)月以上。保存在7...