石蠟包埋組織RNA快速提取試劑盒(離心柱型):原理簡介:改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA(RNA)從硅基質(zhì)膜上洗脫。試劑盒特點(diǎn):1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn),不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨(dú)有的MRL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。4、多次漂洗去蛋白過程,提取RNA純度更高。RNA提取試劑注意事項(xiàng):間層用乙醇沉淀可回收DNA。徐州濟(jì)南RNA提取試劑
RNA提?。褐饕噭㏕rizol是一種新型總RNA抽提試劑,內(nèi)含異硫氰酸胍等物質(zhì),能迅速破碎細(xì)胞,壓制細(xì)胞釋放出的核酸酶。1.Trizol試劑含有苯酚,具有毒性和刺激性,注重操作。2.RNase污染的主要來源是操作過程中手和空氣中的浮沉,注重配帶手套,樣品盡可能蓋嚴(yán)。3.細(xì)胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全會降低較后得率,因?yàn)橐徊糠諶NA會殘留在未裂解的細(xì)胞中。細(xì)胞裂解之后要看不見顆粒狀物質(zhì)(結(jié)締組織和骨除外)。在清洗和裂解細(xì)胞時較好在低溫下操作,防止在操作過程中釋放的內(nèi)源RNase降解了RNA。4.酵母和一些細(xì)菌由于細(xì)胞壁的特別結(jié)構(gòu),可以加入Trizol試劑同時加入無RNase的玻璃珠并劇烈振蕩,使細(xì)胞裂解充分。2-8℃避光保存一年。珠海正規(guī)RNA提取試劑銷售廠家拭子RNA提取試劑的選擇?對離心柱法而言,拭子核酸得率的高低。
總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實(shí)驗(yàn)操作快速方便,顏色鮮明,便于分層。本試劑適用范圍普遍,可以從動物組織、植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細(xì)胞等樣品中提取總RNA。該方法對少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時能夠較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后,溶液會分成三層:上層無色水相、中間層和下層紅色有機(jī)相,RNA分布在上清層中。收集上清層后,經(jīng)異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好,無蛋白和DNA污染,可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn),如RT-PCR、Real-timeRT-PCR、Northernblot、DotBlot、體外翻譯等
piRNA。是一類長度約為24-31nt的非編碼小RNA,通過特異性地與PIWI蛋白結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)作用。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)其在生殖干細(xì)胞分化、胚胎發(fā)育、維持基因組完整性、表達(dá)遺傳學(xué)調(diào)控、異染色質(zhì)的形成和物種的性別決定等方面起著重要作用,此外在壓制轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)錄和基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中也扮演著重要角色,并且越來越多的研究表明在病癥組織中piRNA的表達(dá)不盡相同。lncRNA。長度約為200-100000個核苷酸,可以通過不同的分子生物學(xué)機(jī)制調(diào)控編碼基因的表達(dá),參與疾病相關(guān)的信號通路,對疾病的發(fā)生、發(fā)展及醫(yī)治有重要作用。研究發(fā)現(xiàn),lncRNA-DANCR明顯增強(qiáng)肝病細(xì)胞的感性特征,促進(jìn)一些疾病細(xì)胞的形成,在體內(nèi)干擾DANCR的作用可導(dǎo)致一些疾病細(xì)胞活力降低,同時阻止一些miRNA的壓制效應(yīng),揭發(fā)出一個涉及l(fā)ncRNA、mRNA和miRNA的新一些疾病形成機(jī)制??梢姡琹ncRNA對一些疾病方面有重要作用。另外有研究發(fā)現(xiàn)lncRNA在宿主抗病菌反應(yīng)、骨關(guān)節(jié)炎、囊性纖維化、藥物研發(fā)等方面也有重要的臨床應(yīng)用價值。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機(jī)相。
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介。改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。二、試劑盒特點(diǎn):1、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。2、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn),不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3、獨(dú)有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。買點(diǎn)無酶的吸頭、離心管,找一個普通的試驗(yàn)臺,穿好實(shí)驗(yàn)服戴好手套,保護(hù)好自己就好。南昌RNA提取試劑銷售廠家
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。徐州濟(jì)南RNA提取試劑
科學(xué)家曾經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室里就成功地讓RNA實(shí)現(xiàn)了自我復(fù)制的功能。不僅如此,還有科學(xué)家構(gòu)建了一種DNA-RNA雜交基因組的大腸桿菌。這個實(shí)驗(yàn)證明,即使有DNA-RNA的雜交鏈的中間態(tài),生物也不至于會死亡。所以,RNA較早可能給就是生物的遺傳物質(zhì),只是后來逐步被替代了。當(dāng)然,還有一些次要的原因,比如,我們都知道DNA是在細(xì)胞核當(dāng)中的,完成生命活動這些步驟其實(shí)都在細(xì)胞核外進(jìn)行,因此這樣其實(shí)更加安全。而如果是RNA,那就沒有必要存在細(xì)胞核了,但是當(dāng)細(xì)胞損失時,就很容易出現(xiàn)問題。因此,DNA后來逐漸取代了RNA作為生物的遺傳物質(zhì)。但這并不是說RNA不能夠作為遺傳物質(zhì),相反它是可以作為遺傳物質(zhì)而存在的。徐州濟(jì)南RNA提取試劑
總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項(xiàng):樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在7...